实验五 维生素C的定量测定（2,6-二氯酚靛酚滴定法）
一、实验目的
1. 学习定量测定维生素C的原理及方法。 2. 掌握微量滴定法的操作技术。 二、实验原理
维生素C又称抗坏血酸（ascorbic acid）。在1928年，从牛的肾上腺皮质中提出的结晶物质，证明对治疗和预防坏血病有特殊功效，因此称为抗坏血酸。
还原型抗坏血酸能还原染料2,6-二氯酚靛酚钠盐，本身则氧化成脱氢抗坏血酸。在酸性溶液中，2,6-二氯酚靛酚呈红色，被还原后变为无色。
因此，可用2,6-二氯酚靛酚滴定样品中的还原型抗坏血酸。当抗坏血酸全部被氧化后，稍多加一些染料，使滴定液呈淡红色，即为终点。如无其他杂质干扰，样品提取液所还原的标准染料量与样品中所含有的还原型抗坏血酸量成正比。 三、实验器材
1、新鲜水果（橙子等）或蔬菜（西红柿等）。
2、吸管 3、容量瓶 4、微量滴定管（2ml×1） 5、电子分析天平 6、研钵 7、漏斗
四、实验试剂
1、2%草酸溶液：草酸2g溶于100ml蒸馏水中。 2、1%草酸溶液：草酸1g溶于100ml蒸馏水中。
3、标准抗坏血酸溶液（0.1mg∕ml）：准确称取50.0mg纯抗坏血酸，溶于1%草酸溶液，并稀释至500ml。贮于棕色瓶中，冷藏，最好临用时配制。 4、0.1%2,6-二氯酚靛酚溶液：溶500mg 2,6-二氯酚靛酚于300ml含有104mg NaHCO3的热水中，冷却后加水稀释至500ml，滤去不溶物，贮于棕色瓶内，冷藏（4℃约可保存一星期）。每次临用时，以标准抗坏血酸液标定。 五、操作
1、样品的处理及提取
橙子或西红柿用水洗净，用纱布或吸水纸吸干表面水分。然后称取20.0g，加2%草酸100ml置于组织绞碎机中打成浆状。称取浆状物5.0g，倒入50ml容量瓶中以2%草酸溶液稀释至刻度。静置10min，过滤。滤液备用。
2、滴定
（1）标准液的滴定
准确吸取标准抗坏血酸溶液1.0ml(含0.1mg抗坏血酸)置100ml锥形瓶中，加9ml1%草酸，微量滴定管以0.1% 2,6-二氯酚靛酚滴定至淡红色，并保持15s即为终点。由所用染料的体积计算出1ml染料相当于多少mg抗坏血酸。
（2）样液滴定
准确吸取样液两份，每份10.0ml分别放入两个100ml锥形瓶内，滴定方法同前。
注意：滴定过程宜迅速，一般不超过2min。滴定所用的燃料不应少于1ml或多于4ml，如果样品含抗坏血酸太高或太低时，可酌情增减样液。
六、计算 计算公式：
式中 m：100g样品中所含抗坏血酸的质量（mg）； V：滴定时所用去染料的体积数（ml）；
T：每毫升染料能氧化抗坏血酸质量数（mg∕ml）； W：10ml样液相当于含样品的质量数（g）。
原始数据记录及实验结果： 1、标准液的滴定
滴定初始刻度： 滴定终点刻度： 标准液滴定所用染料体积： T= 2、样液滴定
样品1：初始刻度：
终点刻度： 滴定体积V1： 样品2：初始刻度：
终点刻度： 滴定体积V2： 平均体积V= 3、根据样品的处理方法计算出10ml样品相当于样品的质量数w= 4、100g样品含抗坏血酸质量m（将各参数代入公式计算）
m=
七、思考题
1、实验样品为什么要用2%草酸进行处理？