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分子内部哪些位于分子外部；
（2） 为什么在球蛋白内部和外部都能发现Gly和Ala？ （3） Ser，Thr，Asn和Gln都是极性氨基酸，为什么会在分
子内部发现？
（4） 在球蛋白的分子内部和外部都能找到Cys，为什么？ 16． 蛋白质的分离纯化技术中凝胶过滤和超过滤中无共同之
处？它们各自根据什么原理？
17． 举例井简要说明亲和层析分离、纯化蛋白质的原理和主要
步骤。
18． 举例说明利用盐祈法分离蛋白质的原理和方法。 19． 由122个氨基酸组成的多肽链形成α-螺旋后的长度是多
少？分子量又是多少？
20． 解释下列名词：（1）构型和构象；（2）活性肽；（3）ψ角
和φ角；（4）超二级结构；（5）蛋白质变性和复性；（6）抗原和抗体；（7）透析和超滤；（8）盐溶和盐析。
答案 一、是非题
1对。2错。3错。4错。5错。6对。7对。8对。 9错。10对。11对。12错。13对。14对。15错。16对。 17对。18对。19错。20错、21对。22错。23错。24对。 25对。26对。27对。28错。29对。30对。 二、填空题
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1.Pro； 2.Gly；3．Thr ，Ser；4.Phe；5.His；6.Cys 7．Val ，Ile，Thr ；8.Arg，Lys；9.1/2（pK1′+pK2′） 10．二硝基苯基氨基酸 DNP
11． CNBr（溴化氰） 胰蛋白酶 胰凝乳蛋白酶 胃蛋白酶
12．亲水 疏水 13．Gly－Arg－Met Ala－Pro；14．Thr Ser Lys
15．Sanger 一级结构 两 51 16．高
17．凯氏微量定氮法 紫外吸收法 福林（Folin）-酚法 双缩
脲法 凯氏微量定道法
18．茚三酮 吲哚醌 茚三酮 吲哚醌 19．Phe Tyr Trp。 20．苯异氰酸酯。
21．液 固 保护氨基或竣基 缩合反应 去保护剂。 22．牛胰岛素。 23．X一射线衍射法
24．（αα） （βββ） （βαβ） 25．原胶原蛋白
分子 胶原纤维 26．氢键 疏水作用 范德华力 27．竞争氢键 非极性侧链 28．蛋白质分子内在疏水作用力
29． Glu Lys Arg Gly Ala Ser 30． Ile→Ala→Se r→Giu 三、选择题 题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 本文档如对你有帮助，请帮忙下载支持！
答案 C B C A C B A C B C B B C B D 四、问答与计算
1．在组成蛋白质的20种氨基酸中，根据氨基酸侧链基团的极性可分为三种：
（1）带有非极性侧链基团的氨基酸： Ala， Val， Leu， 11。， Th。 trp． Met和 Pro。
（2）带有极性但不解离侧链基团的氨基酸：Thr，Ser，Tyr，Asn，Gln，Cys和Gly。
这些氨基酸的OH、CO一NH2和一SH，在pH7的生理条件下不能解离但显示极性。Gly的H+因受α一碳原子的影响，显示极弱的极性。
（3）带有解离侧链基团的氨基酸：在pH7的生理条件下解离，带正电荷的有Arg，Lys和 HiS；带负电荷的有： Asp和 Glu。在组成蛋白质的 20种氨基酸中， Pro不能参与形成真正的肽键，因为Pro是亚氨基酸，没有游离的氨基。
2．蛋白质分子所带净电荷为零时，溶液的pH值为该蛋白质的等电点。处于等电点状态的蛋白质分子外层的水化层被破坏，分子之间相互聚集形成较大的颗粒而沉淀下来。
3．在蛋白质分子中带电荷的氨基酸侧链部可以与金属离子以离子键的方式结合。例如血红蛋白分子中血红素带有的铁离子，凌肽酶A分子中的锌离子以及其它蛋白质分子中的铜、镁离子。体内常见的与金属离子结合的氨基酸His、Glu和Cys等。
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4．氨基酸溶于纯水中溶液的pH大于或小于7，这正好说明了氨基酸具有兼性离子的性质。氨基酸的共同特点是既带有氨基也有羧基。还带出可解离和不可解离的侧链基团，当固体的氨基酸溶于纯水中时，pK值小于7的基团解离释放出质子使溶液变为酸性，pK′值大于7的基团接受质子使溶液变为碱性．在组成蛋白质的20种氨基酸中．一氨基一羧基的氨基酸溶于水后溶液基本为中性，一氨基二羧基的氨基酸溶于水后溶液pH小于7为酸性，二氨基一羧基的氨基酸，如Lsy。或带有胍基的精氨酸，带有咪唑基的组氨酸溶于水后溶液pH大于7为碱性。
5．蛋白质分子中主链骨架的重复单位称为肽单位，组成肽单位的6个原子，一（Cn一
CO—NH—Cn+1一）位于一个平面上所以也称其为肽平面。如下所示。
C1α一C O—N H——C2α一
肽单位的基本结构是固定的，并且有以下特征：（1）肽键中的C一N键（键长0.1325nm）；比正常的C一N单键（键长0.147nm）短，比C=N键（键长0.127nm）长．因此具有部分双键的性质不能自由旋转。
（2）肽单位是一个刚性平面结构，所以也可以说多肽链是由许多刚性平面连接起来的，
平面之间是α一碳原子、由ψ角和φ角决定了的构象不能轻易改
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变。
（3）在肽平面上C=O与N一N，或者C1α－C与N一C2α可以是顺式也可以是反式，在多肽链中的肽单位通常是反式。
（4）除 Pro外都是反式，反式构型比顺式构型能量低因此比较稳定。 Pro不含游离的氨
基，不能形成真正的肽鲢，由Pro参与形成的肽键可以是顺式也可以是反式。
6．（l） Lys， Asp－Gly－Ala－Ala－Glu－Ser－Gly。 DNP－Lys和DNP－Asp。
（2） Ala－Ala－His－Arg，Glu－Lys，Phe－Ile。 DNP－Ala， DNP－Glu和DNP－Phe。
（3） Tyr－Cys－Lys， Ala－Arg，Gly。 DNP－Tyr， DNP－Ala和DNP－Gly。
（4）该肽中不含Arg和Lys。所以不能被胰蛋白酶水解。 7．该肽的氨基酸顺序是：Gln－Arg－Tyr－Met－His。
N一末端容易环化说明N一末端为Gln。胰蛋白酶水解得到两个片段，一个为坂口试剂阳性，说明含有Arg，一个有强烈地紫外吸收，且呈Millon阳性，说明含有Tyr，两个肽段之间由一Arg－Tyr一相连。溴化氰处理后得到一游离碱性氨基酸，Panly阳性，可确定为His。顺序为Met－His。所以该肽的氨基酸顺序是：Gln－Arg－Tyr－Met－His。在PH—7时， Gln－Arg－Tyr－Met－His中： Gln的NH3+、 Arg的胍基+， His的咪唑基不带电荷、COO-净电荷为正．所以该肽