植物遗传育种实验指导书

园林植物遗传育种学实验指导书

(3)从步骤(三)即净度分析后获得的净种子中,用电子天平(感量为0.001g)称取2份试样,各4.5~5.0g(此处若用直径等于或大于8cm以上的铝盒,试样量则为10g),置于标号的铝盒中摊匀,称重,记为m1;

(4)将试样的铝盒,迅速置于盒盖上放入预热的烘箱,5~10min,将温度调至103℃±2℃,烘干8h,盖好盒盖,用坩埚钳取出,于干燥器内冷却30~45min后称重,记作m2。

2. 130℃高温烘干法:

其程序与低恒温烘干法相同。只是菜豆属、豌豆、西瓜种子烘干前必须磨碎。烘箱预热温度为140~145℃,烘干时保持温度130℃,试样烘干时间缩短为1h。

(三)发芽力测定

(1)数取试验样品:净度分析后,充分混合的净种子。随机数取400粒。通常以100粒为一次重复,大粒种子或带有病原菌的50粒,甚至可以再分为25粒为一次重复。复胚种子单位可视为单粒种子进行试验,不需弄破(分开)。

(2)选用发芽床:《规程》对各种作物的适宜发芽床有具体规定。通常小粒种子选用纸上;大粒种子选用沙床或纸间;中粒种子选用纸床、沙床均可。

一般用滤纸、吸水纸作纸床。纸上是指将种子放在一层或多层纸上发芽;纸间是将种子放在两层纸中间。将纸床放在培养皿内,置于保湿的发芽箱进行发芽。沙床包括沙上(即种子压入沙的表面)、沙中(即种子播在平整的湿沙上,然后根据种子大小加盖10~20mm厚度的松散沙)。沙子使用前必须洗涤和高温消毒。当纸床或沙床上幼苗出现植物中毒症状或对幼苗鉴定发生怀疑时,为了比较或有某些研究目的,才采用土壤作为发芽床。

(3)加水:纸床应吸足水分后,再沥去多余的水即可。沙床加水应为最大持水量的60%~80%。土壤加水至手握土黏成团,再用手指轻压就碎为宜。

(4)置床培养:将数取的种子均匀地排在湿润的发芽床上,粒与粒之间应保持一定距离。在培养器上贴上标签,放在《规程》规定的条件下进行培养。发芽期间要经常检查湿度、水分和通气状况。如有发霉的种子应取出冲洗,严重发霉的应更换发芽床。

(5)幼苗鉴定:鉴定要在主要构造已发育到一定时期进行。每株幼苗都必须按《规程》规定的标准进行鉴定。根据种的不同,试验中绝大部分幼苗应达到:

子叶从种皮中伸出(如莴苣属)、初生叶展开(如菜豆属)。尽管一些种如胡萝卜在试验末期,并非所有幼苗的子叶都从种皮中伸出,但至少在末次计数时,可以清楚地看到子叶基部的“颈”。

在计数过程中,发芽良好的正常幼苗应从发芽床中拣出,对可疑的或损伤、畸形或不均衡的幼苗,通常到末次计数。严重腐烂的幼苗或发霉的种子应从发芽床中除去,并随时增加计数。

复胚种子单位作为单粒种子计数,试验结果用至少产生一个正常幼苗的种子单位的

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百分率表示。当送验者提出要求时,也可测定100个种子单位所产生的正常幼苗数,或产生一株、两株及两株以上正常幼苗的种子单位数。 六、结果分析

(一)净度分析 (1)P0=

MpMD?MO?MmX100%

(2)P1=

PXPMX100%, P2=01 Mg100%式中:P0为净种子百分率;P1为重型混杂物百分率;P2为含重型混杂物样品换算后的净种子百分率。

据前两步方法所示,有已测得的M1,M2,Mm,还可以对杂质、其他植物种子数进行换算,分别记为Pm,Pos,公式如下:

Pos=

M0MXp1X1X100%

Mp?M0?MmMMmM2XPXX100% 1Mp?M0?MmMPm=

百分率修约:将各成分的百分率相加,总和应为100%,若不是,则应从百分率最大值上加0.1%进行修约。但应注意修约值大于0.1%时,需检查计算有无差错。

(二)含水量测定

W=

m1?m2X100%

m1?m式中:W为种子含水量;若一个样品的两份测定之间的差距不超过0.2%,其结果可用两份测定的算术平均值表示。否则需重新实验。

(三)发芽力测定

发芽试验结果以发芽种子粒数的百分率表示。当一个试验的4次重复(每个重复以100粒计,相邻的副重复合并成100粒的重复)正常幼苗百分率都在最大容许差距内,则以平均数表示发芽百分率。正常幼苗、不正常幼苗和未发芽种子百分率的总和必须为100%。

当试验出现下列情况时,应重新试验。怀疑种子有休眠(即有较多的新鲜不发芽种子),可采用温度处理、化学处理和机械处理等方法重新试验,并应注明所用的方法;由于真菌或细菌的蔓延而使试验结果不一定可靠时,可采用沙床或土壤进行试验;当用纸床正确鉴定幼苗数有困难时,可按规定选用沙床或土壤进行试验;当发现试验条件、幼苗鉴定或计数有差错时,采用同样的方法重新试验;当100粒种子重复间的差距超过

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《规程》规定的最大容许差距时,采用同样方法进行重新试验。

填报发芽试验结果时,须填报正常幼苗、不正常幼苗、硬实、新鲜不发芽种子和死种子的百分率。同时还须填报采用的发芽床和温度、试验持续时间、以及为促进发芽所采用的处理方法等。 七、思考题

(1)园林植物种子水分测定应注意什么问题? (2)种子检验在种子贸易中有何作用与意义?

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