实训四 葡萄糖注射液的含量测定(旋光法) 一、 实验目的
1. 了解旋光仪的构造和旋光度的测定原理 2. 熟练掌握葡萄糖的含量测定(旋光法)
二、 实验仪器及试剂
旋光仪、洗瓶、胶头滴管、滤纸、移液管; 蒸馏水、氨试液、葡萄糖注射液
三、 实验步骤
1. 旋光仪的结构
旋光度可以由旋光仪来测定。旋光仪有两种:一种是数字自动显示测定结果的自动旋光仪,另一种是目测刻度而得结果圆盘旋光仪。
2.旋光度的测定 (1)预热
打开旋光仪电源开关,预热5~10分钟,待完全发出钠黄光后方可观察使用。 (2)调零
在测定前应将仪器和供试液置规定温度的恒温室里至少
1h,使
温度恒定。在测定样品前,必须先用蒸馏水来调节旋光仪的零点。洗净样品管后装入蒸馏水,使液面略凸出管口。将玻璃盖沿管口边缘轻轻平推盖好,不要带入气泡,旋紧(随手旋紧不漏水为止,旋得太紧,玻片容易产生应力而引起视场亮度发生变化,影响测定准确度)上螺丝帽盖。将样品管擦干后放入旋光仪,合上盖子。开启钠光灯,将刻度盘调在零点左右,会出现大于或小于零度视场的情况。 (3)葡萄糖注射液含量测定
样品的测定和调零方法相同。每次测定之前样品管必须先用蒸馏水清洗1~2遍,再用少量待测液润洗2~3次遍,以免受污物的影响,
精密量取本品适量(约相当于葡萄糖10g),置100ml量瓶中,加氨试液(10%或10%以下规格的本品可直接取样测定),用水稀释至刻度,摇匀,放置10分钟后,在25℃时,依法测定旋光度(附录Ⅵ E),与相乘,即得供试量中含有C6H12O6·H2O的重量(g)。
(4)关机 仪器使用完毕后,应依次关闭示数开关、光源、电源开关。同时取出试管洗净晾干
五、数据处理
(1) 计算公式
葡萄糖的浓度c?100? t无水葡萄糖分子量?l??D?含水葡萄糖分子量葡萄糖的浓度c?
100?198.17?
52.75?1180.16葡萄糖的浓度c????.0???
实验结果:
α1 = α2= α3= (2)计算结果:
C1 C2 C3
平均:
修约:
六、注意事项
(1)试管中若有气泡,应先让气泡浮在凸颈处;通光面两端应先擦干;试管螺帽不宜旋得过紧。
(2)氨试液的配制 取浓氨溶液400ml,加水使成1000ml,即得。