上海谱尼测试技术有限公司 编号：SZ
总氰化物的测定方法验证报告
1方法依据
本方法依据HJ 484-2009 方法2 异烟酸-吡唑啉酮分光光度法 2仪器和设备
IE 006-02 紫外分光光度计； IE 115-11恒温水浴锅 3分析步骤
1）量取200mL实验室样品作为试料移入500mL蒸馏瓶，（若氰化物含量较高，可酌情少取，加水稀释至200mL），加数粒玻璃珠。
2）在用于接收的100mL容量瓶中加入10mL氢氧化钠溶液作为吸收液。 3）馏出液导管上端连接冷凝管的出口，下端插入接收瓶的吸收液中，检查连接部分，使其严密。
4）将10mL的Na2-EDTA加入蒸馏瓶内，迅速加入10mL磷酸，可适当多加些，使pH＜2，立即盖好瓶塞，摇匀。打开冷凝水，接上电炉，以2ml/min~4mL/min馏出液速度进行加热蒸馏。
5）接收瓶内溶液接近100mL时停止蒸馏，用少量水洗馏出液导管，取下接收瓶，用水稀释至标线。此碱性馏出液供测定总氰化物用。
6） 向标准管中分别加入1滴酚酞指示剂，用乙酸溶液调至红色刚好消失。向标准管中分别加入5.0mL缓冲溶液，摇匀。迅速加入0.20mL氯胺T溶液立即盖塞摇匀。放置3min-5min。再向各标准管中加入5.0mL异烟酸-吡唑啉酮试剂，加水至25mL刻度，充分混匀。将上述比色管置于25~35℃水浴锅中加热40min，立即比色。于638nm波长处，用10nm比色皿以蒸馏水作参比，测量吸光度。同时做空白。 4试验结果报告 4.1校准曲线及线性范围
按HJ484-2009方法2操作,数据见表1
表1校准曲线数据
浓度(μg) 吸光度 0.00 0.20 0.50 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 0.009 0.026 0.056 0.100 0.183 0.274 0.357 0.451 吸光度（A-Ab ） 0.000 0.017 0.047 0.091 0.174 0.265 0.348 0.442 第1页 共3页
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y = 0.0877x + 0.00092R = 0.99980.50.450.40.350.30.250.20.150.10.050012345系列1线性 (系列1)6
回归方程: y = 0.0877x+0.0009 r=0.9999 4.2 检出限和测定下限实验
在10个空白样品中分别加入5倍检出限浓度的标准物质（即0.020mg/l），进行测定、按HJ 168-2010 规定MDL=t(n?i,0.99)?s，进行计算，结果如下：
表2方法检出限测定结果（N=10）
序号 吸光度(A) 序号 吸光度(A) 标准偏差Sb 1 0.008 11 0.004 2 3 4 5 6 7 8 9 10 0.009 0.008 0.007 0.008 0.009 0.004 0.004 0.004 0.005 12 13 14 15 16 17 18 19 20 0.004 0.006 0.006 0.003 0.004 0.007 0.008 0.003 0.004 0.0021 取20次平行测定空白样的结果，按IUPAC规定MDL=KSb/a?V1 V?V2其中K=3 ； V1：试料馏出液定容体积,100.0mL； V2 ：显色时所取馏出液体积10.00mL； V ：蒸馏时所取试料体积200 mL；Sb: 空白多次测得信号的标准偏差0.0021； a: 校准曲线的斜率:0.0877； 计算得出方法检出限为： MDL=0.004mg/L
4.3精密度
取三份低中高浓度的样品，按照步骤3，分别做3次平行实验，计算出总氰化物的浓度、平均值并求出相对标准偏差，结果见表2
表2精密度实验结果
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样品 1 2 低 3 4 5 6 1 2 高 3 4 5 6 4.4准确度
检测值(mg/L) 检测平均值(mg/L ) 0.021 0.020 0.022 0.020 0.021 0.020 0.184 0.182 0.180 0.180 0.182 0.179 0.181 0.021 相对标准偏差 (%) 4 2 用编号为202249，标准值为0.140±0.025mg/L的质控样，按照步骤3，平行测定3份样品。
表3 准确度实验结果
样品 质控样 编号：202249 1 2 3 检测值(mg/L) 0.138 0.135 0.137 0.137 2 检测平均值(mg/L ) 相对标准偏差 (%) 5是否对方法偏离？是□否■ 6结论
测定高低浓度的三份样品，相对标准偏差分别为3.95%、1.01%。质控的相对标准偏差为97.5%。
我公司对 总氰化物 的检测符合■/不符合□标准HJ484-2009方法2 要求。
实验时间： 年 月 日 至 月 日 实验员： 审核人： 批准人：
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