性质，但难以直接培育成转基因植株，为使其获得抗除草剂性状，需依次进行步骤 Ⅰ．获得抗除草剂转基因玉米自交系 A，技术路线如下图。
I 、II 试验。
（ 1）为防止酶切产物自身环化， 构建表达载体需用 2 种限制酶， 选择的原则是 ①Ti 质粒内，每种限制酶只有一个切割位点
②G 基因编码蛋白质的序列中，每种限制酶只有一个切割位点 ③酶切后， G 基因形成的两个黏性末端序列不相同 ④酶切后， Ti 质粒形成的两个黏性末端序列相同 A． ①③
B． ①④
C． ②③
D．②④
（单选）。
（ 2）下表是 4 种玉米自交系幼胚组织培养不同阶段的结果。据表可知，细胞脱分化时使用的 激素是 体。
，自交系 的幼胚最适合培养成愈伤组织作为转化受
（ 3）农杆菌转化愈伤组织时， T-DNA 携带插入其内的片段转移到受体细胞。筛选转化的愈伤 组织，需使用含 的选择培养基。
（ 4）转化过程中，愈伤组织表面常残留农杆菌，导致未转化愈伤组织也可能在选择培养基上 生长。含有内含子的报告基因只能在真核生物中正确表达，其产物能催化无色物质 色。用 K 分别处理以下愈伤组织，出现蓝色的是
K 呈现蓝
（多选）。
A．无农杆菌附着的未转化愈伤组织 B．无农杆菌附着的转化愈伤组织 C．农杆菌附着的未转化愈伤组织 D．农杆菌附着的转化愈伤组织
（ 5）组织培养获得的转基因植株（核 DNA 中仅插入一个 G 基因）进行自交，在子代含 G 基 因的植株中，纯合子占 。继续筛选，最终选育出抗除草剂纯合自交系 A。
II ．通过回交使自交系 B 获得抗除草剂性状
（ 6）抗除草剂自交系 A（GG）与自交系 B 杂交产生 F1，然后进行多轮回交（下图） 。自交系 B 作为亲本多次回交的目的是使后代 。
（ 7）假设子代生活力一致，请计算上图育种过程 F1、H1、H2、H3 各代中含 G 基因植株的比 例，并在图 1 中画出对应的折线图。若回交后每代不进行鉴定筛选，直接回交，请在图 2 中画 出相应的折线图。
（ 8）下表是鉴定含 G 基因植株的 4 种方法。请预测同一后代群体中， 4 种方法检出的含 G 基 因植株的比例，从小到大依次是 方法 的比例 PCR 扩增 分子杂交
基因组 DNA 总 mRNA
G 基因 G 基因转录产物 G 基因编码的蛋白质 抗除草剂幼苗
x1 x2 x3 x4
检测对象
。
检测目标
检出的含 G 基因植株
抗原-抗体杂交 总蛋白质 喷洒除草剂
幼苗
对 Hn 继续筛选，最终选育出高产、抗病、抗除草剂等优良性状的玉米自交系 【答案】（1）A （ 2） 2,4-D （ 3）除草剂 （ 4） BD （ 5） 1/3
（ 6）积累越来越多自交系 B 的遗传物质 /优良性状 （ 7）
乙
（ 8） X4， X3，X2 ，X1
【解析】（1）质粒作为将目的基因导入受体细胞的载体， 每种限制酶的切割位点最好只有一个，
DNA 上，
否则切割后会导致基因缺失，影响基因的表达；限制酶的识别序列和切割位点位于 G 基因编码的序列是蛋白质，没有限制酶的识别序列和切割位点；酶切后，
G 基因和 Ti 质粒
形成的两个黏性末端序列均不相同。 故选 A 。（ 2）细胞脱分化形成愈伤组织， 由表中结果可知， 使用 2,4-D 时愈伤组织形成率最高。比较 4 个自交系，甲自交系中芽的分化率比较低，丙自交 系中根的诱导率比较低，丁自交系中愈伤组织的形成率比较低，乙自交系中愈伤组织形成率、 芽的分化率和根的诱导率都相对较高， 故最适合培养成愈伤组织作为转化受体。 （ 3）试验的目 的是获得抗除草剂转基因玉米自交系 A ，则筛选转化的愈伤组织， 需使用含除草剂的选择培养 基。（ 4）含有内含子的报告基因位于农杆菌 Ti 质粒的 T-DNA 中，无农杆菌附着的未转化愈伤
组织不含内含子的报告基因， 不会出现蓝色；不论是否有无农杆菌附着，转化愈伤组织中都含 有 Ti
质粒，含内含子的报告基因，会出现蓝色；农杆菌附着的未转化愈伤组织，含内含子的
报告基因位于农杆菌中， 农杆菌属于原核生物， 其中的报告基因不能正确表达， 不会出现蓝色。 故选 BD 。（5）由于转基因植株的核 DNA 中仅插入一个 G 基因，设其基因型为 GO，则其自 交后代含 G 基因的植株基因型为 GG 或 GO，比例为 1∶ 2，纯合子占 1/3。（ 6）回交是指杂交 后代与自交系 B 杂交，会使后代积累越来越多自交系 B 的遗传物质 /优良性状。（7）自交系 B 不含抗除草剂基因，设基因型为 OO，则自交系 A（ GG）与之杂交得 F1，基因型为 GO，都含 有 G 基因，再与自交系 B（OO）回交得 H1，基因型为 GO 和 OO，比例为 1∶1，含有 G 基 因 的 植 株 占 1/2 ， 筛 选 去 除 基 因 型 为 OO 的 植 株 后 ， 剩 余 的 都
出抗除草剂性状，所以检测出的含 G 基因植株的比例，由小到大依次是 X4， X3，X2 ，X1 。 27.（2016 新课标 2 卷.32)（12 分）某种植物的果皮有毛和无毛、果肉黄色和白色为两对相对 性状，各由一对等位基因控制（前者用 D、d 表示，后者用 F、f 表示），且独立遗传。利用该 种植物三种不同基因型的个体（有毛白肉 如下：
回答下列问题：
（ 1）果皮有毛和无毛这对相对性状中的显性性状为 对性状中的显性性状为
。
，果肉黄色和白色这对相
A、无毛黄肉 B、无毛黄肉 C）进行杂交，实验结果
（ 2 ） 有 毛 白 肉 A 、 无 毛 黄 肉 B 和 无 毛 黄 肉 C 的 基 因 型 依 次 为
。
（ 3 ） 若 无 毛 黄 肉 B 自 交 ， 理 论 上 ， 下 一 代 的 表 现 型 及 比 例 为
。
（ 4 ） 若 实 验 3 中 的 子 代 自 交 ， 理 论 上 ， 下 一 代 的 表 现 型 及 比 例 为
。
。
（ 5）实验 2 中得到的子代无毛黄肉的基因型有
【答案】（1）有毛 （ 2） DDff 、 ddFf、ddFF
黄肉
（ 3）无毛黄肉 :无毛白肉＝ 3:1
（ 4）有毛黄肉 :有毛白肉：无毛黄肉 :无毛白肉＝ 9:3:3:1 （ 5） ddFF、 ddFf
28.（2016 浙江卷 .32) (18 分)若某研究小组用普通绵羊通过转基因技术获得了转基因绵羊甲和 乙各 1 头,具体见下表。
请回答：
(1 ) A+基因转录时，在 的催化下，将游离核苷酸通过
,多肽合成结束。
键聚合成 RNA 分子。
翻译时 ,核糖体移动到 mRMA 的
(2) 为选育黑色细毛的绵羊，以绵羊甲、绵羊乙和普通绵羊为亲本杂交获得 现型为
的绵羊和
F1，选择 F1 中表
的绵羊杂交获得 F2。用遗传图解表示由 F1 杂交获得 F2 的