每小时形成产物的量(μmol) 13.9 17.9 21.3 31.3 37.0
(没有抑制剂)
每小时形成产物的量(μmol) 8.8 12.1 14.9 25.7 31.3
(有抑制剂)
9.甘油醛-3-磷酸脱氢酶(Mr 150 000)的活性位点有一个Cys残基,假定为使
-2
5mL的1.2mg/mL的酶溶液完全失活,需要3.0×10 mg碘乙酰胺(Mr 185),
计算酶的催化亚基的数目?
10.对活细胞的实验测定表明,酶的底物浓度通常就在这种底物的Km值附近,
请解释其生理意义?为什么底物浓度不是大大高于Km或大大低于Km呢? 11.有时别构酶的活性可以被低浓度的竞争性抑制剂激活,请解释?
12.(1)对于一个遵循米氏动力学的酶而言,当[S]=Km时,若V=35μmol/min,
Vmax是多少μmol/min?
(2)当[S]=2×10 -5mo/L,V=40μmol/min,这个酶的Km是多少?
(3)若I表示竞争性抑制剂,KI=4×10-5mol/L,当[S]=3×10-2mol/L和[I]=3
×10-5mol/L时,V是多少?
(4)若I是非竞争性抑制剂,在KI、[S]和[I]条件与(3)中相同时,V是多少?
(2)计算[S]=1.0×10-6mol/L和[S]=1.0×10-1mol/L时的v?
(3)计算[S]=2.0×10-3mol/L或[S]=2.0×10-6mol/L时最初5min内的产物
总量?
(4)假如每一个反应体系中酶浓度增加到4倍时,Km,Vmax是多少?
13.在很多酶的活性中心均有His残基参与,请解释? 22.将下列化学名称与B族维生素及其辅酶形式相匹配?
(A)泛酸;(B)烟酸;(C)叶酸;(D)硫胺素;(E)核黄素;(F)吡哆素;(G)生物素。
(1)B1 ;(2)B2 ;(3)B3 ;(4)B5 ;(5)B6 ; (6)B7 ;(7)B11; (8)B12。
(Ⅰ)FMN;(Ⅱ)FAD;(Ⅲ)NAD+;(Ⅳ)NADP+;(Ⅴ)CoA;(Ⅵ)PLP;(Ⅶ)PMP;(Ⅷ)FH2,
FH4;(Ⅸ)TPP。
参考答案
(一)名词解释
1.米氏常数(Km值):用Km值表示,是酶的一个重要参数。Km值是酶反应速度(V)达到最大反应速度(Vmax)一半时底物的浓度(单位M或mM)。米氏常数是酶的特征常数,只与酶的性质有关,不受底物浓度和酶浓度的影响。 2.底物专一性:酶的专一性是指酶对底物及其催化反应的严格选择性。通常酶只能催化一种化学反应或一类相似的反应,不同的酶具有不同程度的专一性,酶的专一性可分为三种类型:绝对专一性、相对专一性、立体专一性。 3.辅基:酶的辅因子或结合蛋白质的非蛋白部分,与酶或蛋白质结合得非常紧密,用透析法不能除去。
4.单体酶:只有一条多肽链的酶称为单体酶,它们不能解离为更小的单位。分子量为13,000——35,000。
5.寡聚酶:有几个或多个亚基组成的酶称为寡聚酶。寡聚酶中的亚基可以是相同的,也可以是不同的。亚基间以非共价键结合,容易为酸碱,高浓度的盐或其它的变性剂分离。寡聚酶的分子量从35 000到几百万。
6.多酶体系:由几个酶彼此嵌合形成的复合体称为多酶体系。多酶复合体有利于细胞中一系列反应的连续进行,以提高酶的催化效率,同时便于机体对酶的调控。多酶复合体的分子量都在几百万以上。
7.激活剂:凡是能提高酶活性的物质,都称激活剂,其中大部分是离子或简单的有机化合物。
8.抑制剂:能使酶的必需基团或酶活性部位中的基团的化学性质改变而降低酶的催化活性甚至使酶的催化活性完全丧失的物质。
9.变构酶:或称别构酶,是代谢过程中的关键酶,它的催化活性受其三维结构
中的构象变化的调节。
10.同工酶:是指有机体内能够催化同一种化学反应,但其酶蛋白本身的分子结
构组成却有所不同的一组酶。
11.诱导酶:是指当细胞中加入特定诱导物后诱导产生的酶,它的含量在诱导物
存在下显著增高,这种诱导物往往是该酶底物的类似物或底物本身。 12.酶原:酶的无活性前体,通常在有限度的蛋白质水解作用后,转变为具有活
性的酶。
13.酶的比活力:比活力是指每毫克蛋白质所具有的活力单位数,可以用下式表
示:
活力单位数
比活力=
14.活性中心:酶分子中直接与底物结合,并催化底物发生化学反应的部位,称
为酶的活性中心。
(二)英文缩写符号
1.NAD+ (nicotinamide adenine dinucleotide):烟酰胺腺嘌呤二核苷酸;辅酶Ⅰ。 2.FAD(flavin adenine dinucleotide):黄素腺嘌呤二核苷酸。 3.THFA(tetrahydrofolic acid):四氢叶酸。
4.NADP+(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate):烟酰胺腺嘌呤二核苷
酸磷酸;辅酶Ⅱ。
5.FMN(flavin mononucleotide):黄素单核苷酸。 6.CoA(coenzyme A):辅酶A。
7.ACP(acyl carrier protein):酰基载体蛋白。
8.BCCP(biotin carboxyl carrier protein):生物素羧基载体蛋白。 9.PLP(pyridoxal phosphate):磷酸吡哆醛。
(三)填空题 1.活细胞;蛋白质
2.高效性;专一性;作用条件温和;受调控
3.[E];[S];pH;T(温度);I(抑制剂);A(激活剂) 4.Ser195;His57;Asp102;Ser195;氧原子;电荷转接;电荷中继网 5.邻近效应;定向效应;诱导应变;共价催化;活性中心酸碱催化 6.竞争性
蛋白质量
(mg)
7.由多个亚基组成;除活性中心外还有变构中心;米氏方程;S;双;寡聚酶 8.磷酸吡哆醛;VB6;磷酸吡哆醛;磷酸吡哆胺;磷酸吡哆醇;磷酸吡哆醛;转氨酶;脱羧酶;消旋酶
9.还原性产物;DHFA;THFA;一碳单位 10.三
11.酶蛋白;辅助因子;酶蛋白;辅助因子
12.辅酶;辅基;金属离子;辅基;化学方法处理;辅酶;透析法 13.核酶(具有催化能力的RNA)
14.氧化还原酶类;转移酶类;水解酶类;裂合酶类;异构酶类;合成酶类 15.酶学委员会;氧化还原酶类;作用-CHOH基团的亚类;受体NAD+或NADP+
的亚亚类;序号为1
16.绝对专一性;相对专一性;立体专一性 17.结合部位;催化部位;结合部位;催化部位
18.酶催化化学反应的能力;一定条件下,酶催化某一化学反应的反应速度 19.初;底物消耗量<5% 20.齐变;序变
21.稳定性好;可反复使用;易于与反应液分离
22.底物分子的解离状态;酶分子的解离状态;中间复合物的解离状态 23.温度升高,可使反应速度加快;温度太高,会使酶蛋白变性而失活 24.绝对;立体 25.-1/Km;1/Vmax 26.二氢叶酸合成酶 27.比活力;总活力 28.微量;辅酶
29.溶解;水溶性维生素;脂溶性维生素 30.嘧啶;噻唑;亚甲基;TPP;脱羧酶;转酮酶 31.二甲基异咯嗪基;核糖醇基;1,10位氮
32.丁酸衍生物;β-丙氨酸;酰胺键;巯基乙胺;焦磷酸;3’-AMP;CoA;酰
化;酰基
33.吡啶;烟酸;烟酰胺;NAD+;NADP+;脱氢;氢