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药理学动物实验的基本知识和技术
作者：李铁铮
来源：《科技资讯》2016年第23期
摘要：在药理学动物实验中，要根据实验目的和要求选用不同实验动物。学生要严格掌握青蛙、蟾蜍、小鼠、大鼠、豚鼠、家兔、狗等实验动物的捉持方法，严格掌握各类实验动物的不同给药方法，保证自身安全，获得相应实验结果。在此过程中，可以训练学生客观地观察、比较、分析、综合和解决实际问题的能力，培养学生严谨的科学态度、严密的工作方法和实事求是的作风，达到实验目的。
摘要：药理学；动物实验；基本知识；基本技术
中图分类号：G420 文献标识码：A 文章编号1672-3791（2016）08（b）-0000-00 实验是药理学教学的一个重要组成部分。通过动物实验不仅可以验证理论知识，而且可以训练学生客观地观察、比较、分析、综合和解决实际问题的能力，培养学生严谨的科学态度、严密的工作方法和实事求是的工作作风。 1实验动物的选择和用途 1.1实验动物的选择
青蛙、蟾蜍、小鼠、大鼠、豚鼠、家兔、狗等为药理实验常用动物。动物对药物反应具有种属差异性，应根据实验目的和要求选用不同的实验动物。实验动物可分为4个级别，药理教学实验可选用一级普通动物，科研实验必须用二级以上实验动物，分别为二级清洁动物、三级无特定病原体的动物和四级无菌动物。 1.2实验动物的用途
在离体情况下，青蛙和蟾蜍心脏节律性搏动保持时间较长，可观察药物对心脏的作用，药物对周围神经、横纹肌或神经肌肉接头作用的观察可选用坐骨神经腓肠肌标本。
小鼠易大量繁殖，是最常用实验动物，适用于需要大量动物的实验。大鼠用途与小鼠基本相同，主要用于一些用小鼠不便进行的实验。大鼠对炎症反应较为灵敏，其踝关节炎模型常用于观察药物的抗炎作用。豚鼠对组胺特别敏感，是筛选平喘药和抗组胺药最理想的动物。 家兔性情温顺易饲养，常用于观察药物对心脏、血压、呼吸的影响。狗易于通过驯养与人合作，适于慢性实验。 2实验动物的捉持方法
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2.1青蛙和蟾蜍
用左手的食指和中指夹住左前肢，大拇指压住右前肢，下肢用右手拉直并在无名指和小指之间予以固定。毁脑和脊髓时，左手食指和中指夹持头部，右手将探针经枕骨大孔向前刺入颅腔，左右摆动探针捣毁脑组织。如需破坏脊髓，毁脑后退回探针刺入椎管即可。 2.2鼠类
可双手配合或只用左手捉持小鼠。用右手将鼠尾提起并放在笼子或粗糙面上，将鼠尾向后轻拉，迅速将小鼠头颈部皮肤用左手拇指和食指捏住，并以左手小指、无名指在手掌尺侧将其尾部压住。或者将鼠尾用左手食指和拇指抓住，之后将尾根部用手掌尺侧和小指夹住，左后将其头颈部皮肤用左手拇指和食指捏住。
大鼠和小鼠捉持方法基本相似，左手戴防护手套是不同之处。用右手将鼠尾抓住，头部用左手拇指和食指握住，脊部和腹部用其余手指与手掌握住。为避免用力过大过久致其死亡，不得捏其颈部。
豚鼠一般以左手直接从背侧握持前部躯干，右手托起臀部或抓住两后肢；可用单手捉持体重小的豚鼠。 2.3家兔
用利手将兔颈背部皮肤抓住，轻轻提起（不得握持双耳提起）后再用另手将兔臀部托住，使其呈蹲坐姿势。。 2.4狗
为驯服狗戴特制嘴套（比较凶暴的狗用长柄捕狗夹钳住其颈部，然后套上嘴套），在耳后颈部用绳带将其固定牢固。。也可用绳带将凶暴的狗嘴固定，为避免绳带脱落，应先后绕过下颌和颈后部分别打结。狗麻醉后取仰卧位，在手术台上固定其四肢，将嘴套和绳带取下，经两侧嘴角将金属棒穿过口腔压于舌上，同时将舌拉出口腔以防窒息。然后再用绳带绕过金属棒，将嘴固定于手术台上。 3实验动物的给药方法 3.1鼠类
小鼠灌胃时，左手捉持小鼠，使头部朝上，拉直颈部，操作者与小鼠腹部相对，右手持并从口角将灌胃管插入口腔，使之与食管成一直线，沿上腭从舌面缓慢进入食管2～3cm，将药液缓慢注入。注意操作要轻柔，防止损伤食管。如遇阻碍应重插，为避免试管或器官损伤导致死亡的发生，不可用力强插。大鼠和小鼠的灌胃方法相似，灌胃管的直径不同，必要时助手协
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助将其后肢与尾巴进行固定。为防止误入气管，应回抽注射器针栓，如无空气被抽回则可注入药液。豚鼠和大鼠的灌胃方法相同，应用开口器和导尿管与兔具有相同方法。
小鼠皮下注射需两人协同完成。一人用一手将小鼠头部皮肤捏住，用另一手将鼠尾拉住，牢固固定小鼠；另一人用一手将背部皮肤捏起，持注射器的另一手在背部皮下刺入针头进行注射。为避免药液逸出，用手捏住刺部位片刻，方可拔针。皮下注射亦可一人独立完成：在粗糙面上放置小鼠，鼠尾用手拉住，趁其向前爬动时，持注射器的另一手迅速在小鼠背部皮下刺入针头，推注药进行注射。或左手捉持小鼠，右手持注射器，从右侧肋缘刺入针头于皮下，向前推至右前肢腋下部位推入药液。大鼠与小鼠的操作方法基本相同，背部或大腿外侧皮下为常用注射部位。豚鼠皮下注射方法基本同小鼠，注射部位通常在大腿内侧皮下。 豚鼠可选择臀部和股部肌内注射，小鼠和大鼠不常用。
小鼠腹腔注射时，捉持小鼠使腹部朝上头部下倾，持有注射器的另手以30o角在下腹一侧向头端刺入腹腔。注意刺入腹腔时有落空感，刺入不能太深太靠上，避免伤及肝脏。其他鼠类腹腔注射与小鼠相类似。
小鼠多采用尾静脉注射。将小鼠置入一特制的固定筒内，使鼠尾露在外面。为促进尾部血管扩张，可用75%酒精涂擦或浸泡在45℃左右温水中30s。左手捏住鼠尾，右手持注射器，以鼠尾扩张最明显的静脉，使针头与鼠尾呈3～5°角刺入血管，推入药液。注意穿刺时应从远端开始，以便失败后可在第一次穿刺点的近心端重新穿刺。注射完毕，用棉球按压穿刺点止血。大鼠方法同小鼠，亦可将大鼠麻醉后以股静脉和舌下静脉作为穿刺血管。豚鼠可将脚掌外侧静脉或外颈静脉作为穿刺血管。后脚掌外侧静脉注射时，一人持豚鼠将一条后腿固定，另一人将注射部位体毛剪除，后脚掌外侧皮肤涂擦酒精以充分暴露血管，将小儿头皮静脉输液针头刺入血管见回血后即可行静脉注射。外颈静脉注射时应剪去一点皮肤以暴露血管，然后刺入针头。 3.2家兔
需两人协同完成家兔灌胃。一人取坐位，两腿之间夹兔身，两手分别抓住两前肢和双耳，并牢固固定；另一人在兔口中横插并缓慢旋转开口器，压住并固定兔舌。从开口器中部小孔缓缓将导尿管沿上腭壁插入食管约15～18cm。要掌握判定误入气管的方法和技能，确定导尿管插在食管内后，在导尿管上连接注射器并推入药液，管内残存药液用少量清水进行冲洗，结束操作后缓慢拔出导尿管取出开口器。
家兔以背颈部行皮下注射。左手拇指、食指和中指提起背颈部皮肤，右手持注射器刺入皮下，松开皮肤注入药液。家兔可行臀部和股部肌内注射，腹腔注射与小鼠相似。静脉注射常用耳缘静脉：将家兔置固定箱内，头露在外，去耳壳外缘毛并用酒精涂擦使耳缘静脉充血，兔耳尖部用一手拇指和中指捏住并垫食指于耳下，一手持注射器将针头从静脉远端刺入血管，推注药液。