《分子生物学》复习资料(一)
一、选择题
1. 增强子的作用是 ( )
A. 增强 DNA 复制 B. 增强基因转录 C. 增强基因稳定性 D. 增强 RNA 的稳定性
2. 反式作用因子的激活方式不包括 ( )
A. 表达式调节 B. 共价修饰 C. 蛋白质相互作用 D.DNA 成环 3. 以下哪项不是目前使用的研究转录子组的主要方法 ( )
A. 基因芯片技术 B.表达系列分析 C.差异显示 PCR D.Western blot 4. 无义突变是 ( )
A. 产生另一种氨基酸序列不同的蛋白质 B.突变后产生缩短的多肽链 C. 产生的一种氨基酸序列相同的蛋白质 D.突变毫无意义 5. 质粒是 ( )
A. 环状双链 DNA B.线性双链 DNA C.环状单链 DNA D.线性单链 DNA 6. 可检测基因拷贝数变化的是 ( )
A. 生物质谱技术 B. 双向电泳 C.Southern blot D.RNAi 7. 以下哪种因素不直接影响转录的是 ( )
A. 启动子 B. 阻碍蛋白 C. 基因激活蛋白 D.SD 序列 8. 限制性核酸内切酶可对 ( )
A. 双链 DNA 的特异部位进行切割 B.单链 DNA 的特异部位进行切割 C. 多肽链的特异部位进行切割 D.mRNA的特异部位进行切割 9. 以下哪项是原核生物基因组的结构特点 ( )
A. 由 DNA 或 RNA 组成 B. 有单链、双链之分 C. 操纵子结构 D. 与组蛋白结合
10. 以下哪项属于启动子和上游启动子元件 ( ) A. 内含子 B. 外显子 C.TATA 盒 D.终止子 二、判断题(如正确写√,错误写×)
1. 现代分子生物学的研究几乎都是围绕核酸和蛋白质进行的。 ( )
2. 原核生物翻译效率受 SD 序列顺序的影响,与 SD 序列的位置无关。 ( ) 3. 重组修复是先进行复制再进行切除修复。 ( )
4. 在同样的环境条件下,具有不同遗传背景的人发病的几率或病情的进展不同。 ( )
5. 点突变是指一个嘌呤碱基被嘧啶碱基取代或一个嘧啶碱基被嘌呤碱基取代。 ( )
6. 基因诊断可检测基因突变引起的疾病,不能检测外源性致病基因引起的疾病。 ( )
7. 基因置换是通过导入外源基因使靶细胞表达其本身不表达的基因。 ( ) 8. 差异显示 PCR 是目前使用的研究转录子组的主要方法之一。 ( ) 9.Northern blot常用于检测 RNA, Western blot常用于检测 DNA 。 ( ) 10. 反义 RNA 可增强基因表达, RNA 干涉可沉默基因表达。 ( ) 三、简答题
1、转座作用的机制及其遗传学效应。 2、列举几种真核基因的顺式作用元件。
3、说明乳糖操纵子的结构及其正负性协调调控原理。 4、简述物理因素引起的 DNA 损伤。 5、简述 Sanger DNA测序法的原理。
答: Sanger DNA 测序法是建立在两个基本原理之上: 四、问答题
从多个层次论述真核基因的表达调控。
《分子生物学》复习资料(一)答案
一、选择题
1-5 BDDBA 6-10 CDACC
二、判断题(如正确写√,错误写×)
1. √;2. ×;3. √;4. √ ;5.; ×6. × ;7. √;8. √;9. × ;10. × ; 三、简答题
1、转座作用的机制及其遗传学效应。
答:转座作用可分为复制性转座和简单转座两种类型。(2)复制性转座是转座因子复制出一 个新拷贝转移到基因组新的位置, 转座可以使供体和受体复制子融合, 形成共整合体, 解离 后释放出两个复制子, 每一个都带有一个转座子。(1) 简单转座是转座因子从原来位置上切除并 转移到基因组新的位置。(1)
遗传学效应:引起插入突变,携带标志基因使受体增添新基因,可形成共整合体,转座 的结果使靶点序列倍增,促使染色体畸变。(2) 2、列举几种真核基因的顺式作用元件。 答:(1)启动子:Hogness 盒, CAAT 盒;(2)
(2)增强子:SV40病毒中,位于早期启动子 5ˊ上游约 200 bp,内含 2个 72 bp的重复序 列,其核心序列为 GGTGTGGAAAG ;(2)
(3)沉默子:SV40中的 AGGTTTTTT 序列为终止转录调控元件。(2) 3、说明乳糖操纵子的结构及其正负性协调调控原理。
答:(1)编码 β-半乳糖苷酶、半乳糖苷通透酶及硫代半乳糖苷转乙酰基酶三种酶蛋白的结 构基因 Z 、 Y 、 A ,加上调控元件 —— 启动子(promoter , P )和操纵基因(operator , O )即 构成乳糖操纵子。(3)
(2)有葡萄糖无乳糖时,阻遏蛋白与操纵基因结合, lac 结构基因不转录, cAMP 处于低水 平, CAP 蛋白不能与启动子附近的 CAP 位点结合;(1)葡萄糖和乳糖均存在时,阻遏蛋白与乳 糖结合,空间构象改变,不再与操纵基因结合, cAMP 处于低水平, CAP 蛋白不与 CAP 位 点结合,结构基因有少量表达;(1)无葡萄糖有乳糖时,阻遏蛋白不与操纵基因结合, cAMP 处 于高水平,形成 cAMP-CAP 复合物并与 CAP 位点结合,结构基因大量表达。(1) 4、简述物理因素引起的 DNA 损伤。 答:物理因素引起的 DNA 损伤有: (1)紫外线照射引起的 DNA 损伤。(1)当 DNA 受到最易被其吸收波长(260nm)的紫外线照射时,同一条 DNA 链上相邻的嘧啶以共价键连成二聚体,相 邻的两个 T、或两个 C、或 C 与 T 间都可以环丁基环连成二聚体,其中最容易形成的是 T-T 二聚体。 (2)
(2)电离辐射引起的 DNA 损伤:(1)有直接和间接的效应,直接效应是 DNA 直接
吸收射 线能量而遭损伤; 间接效应是指 DNA 周围其他分子吸收射线能量而产生具有很高反应活性的 自由基,进而损伤 DNA。(2) 5、简述 Sanger DNA测序法的原理。
答: Sanger DNA 测序法是建立在两个基本原理之上:
(1) 核酸是依赖于模板在聚合酶的作用下由 5′端向 3′端聚合; (2)
(2)可延伸的引物必须能提供游离的 3′羟基末端,双脱氧核苷酸由于缺少游离的 3′羟基末端,因此会终止聚合反应的进行。(2)如果分别用 4种双脱氧核苷酸终止反应,则会获得 4组长度不同的 DNA片段。通过比较所有 DNA 片段的长度可以得知核苷酸的序列。(2) 四、问答题
从多个层次论述真核基因的表达调控。 答:(1)基因组 DNA 水平的调控:(2)
基因组水平的调控即转录前调控, 指发生在基因组水平的基因结构的改变, 这种调控方 式较稳定持久,有时甚至是不可逆的。真核生物基因表达在 DNA 水平的调控主要方式为:① 染色质的丢失 ② 基因扩增 ③ 基因重排 ④ 基因的甲基化修饰 ⑤ 染色质结构对基因表达的调 控作用 (2)转录水平的调控: (2)
转录水平的调控主要是通过反式作用因子与顺式作用元件和 RNA 聚合酶(RNA polymerase , RNA pol)的相互作用来完成的。顺式作用元件是一些能影响基因表达但不编 码蛋白质和 RNA 的 DNA 序列,按照功能分为启动子、增强子、沉默子。反式作用因子是 指能直接或间接地识别或结合在各顺式作用元件 8~12 bp核心序列上,参与调控靶基因转 录效率的一组蛋白质。 转录水平的调控机制主要为:
① 反式作用因子的活性调节。特定的反式作用因子被激活后,可以启动特定基因的转 录。激活方式为:表达式调节,共价修饰,配体结合,蛋白质与蛋白质相互作用。 ② 反式作用因子作用方式。反式作用因子与顺式元件的结合位点通常与其所调控的基 因相距较远,其作用方式模式为:成环,扭曲,滑动, Oozing 。
③ 反式作用因子的组合式调控作用。每一种反式作用因子结合顺式元件后虽然可发挥促进或抑制作用, 但反式作用因子对基因表达的调控不是由单一反式作用因子完成的, 而是 由几种因子组合,发挥特定的作用。 (3)转录后水平的调控: (2)
①5ˊ端加帽和 3ˊ端多聚腺苷酸化 mRNA
② 前体的选择性剪接 (4)翻译水平的调控: (2)
① 翻译起始的调控,包括翻译起始因子的功能调控、阻遏蛋白的调节作用、 5ˊAUG 对翻译的调节作用、 mRNA 5ˊ端非编码区长度对翻译的影响等。 ② 稳定性调节
③ 小分子 RNA 对翻译的调控作用