时间分辨技术的原理最新资料

而ELISA阳性无,采用配对x2检验,x2=30,P<,差异有非常显着性,两法比较符合率为230/260=%;其中-HBs含量10~100mIU/ml占79例,10~200mIU/ml占16例,201~1000mIU/ml占46例,1000mIU/ml以上占19例。 HBeSg ELISA法 结果阳性17例,阳性率%;TR-FIA法结果阳性18例,阳性率%;两法都阳性17例,两法都阴性242例,TRFIA阳性而ELISA阴性1例,TRFIA阴性而ELISA阳性无,采用配对x2检验,x2=1,P>,差异无显着性,两法比较符合率为259/260=%;其中HBeSg含量~ml占1例,~ml占4例,~2NCU/ml11例,~8NCU/ml12例。 抗-HBe ELISA法 结果阳性86例,阳性率33%;TR-FIA法结果阳性73例,阳性率28%;两法都阳性67例,两法都阴性168例,TRFIA阳性而ELISA阴性6例,TRFIA阴性而ELISA阳性19例,采用配对x2检验,x2=,P<,差异有非常显着性,两法比较符合率为235/260=%;其中抗-HBe含量~2NCU/ml14例,2 .1~5NCU/ml14例, ~~10NCU/ml23例,20NCU/ml以上24例。 抗-HBc ELISA法 结果阳性54例,阳性率%;TRFIA法结果阳性72例,阳性率%;两法都阳性52例,两法都阴性186例,TRFIA阳性而ELISA阴性20例,TRFIA阴性而ELISA阳性2例,采用配对x2检验,x2=,P<,差异有非常显着性,两法比较符合率为238/260=%;其中抗-HBc含量~ml11例,~1NCU/ml1例, 1~5NCU/ml10例,~10NCU/ml36例,10NCU/ml以上14例。 3讨论 TRFIA法检测HBV-M与ELISA法相比,其特异性和敏感性都高,特别是能够检测低浓度HBsAg和HBeAg,对减少HBV感染漏诊和误诊具有较高价值。因HBsAg阳性是HBV感染的金标准[1]。有学者对血清呈低水平存在、血清HBsAg约在5ng/ml以下者做过研究[2],对象是非肝炎患者住院人群,结果是占总人群的%,占HBsAg阳性人群的%。而本文只检测出%和10%。此结果存在一定差异,有待进一步探讨。抗-HBs是对HBV的保护性免疫指标,有学者认为仍有保护作用的最低抗-HBs的浓度为10mIU/ml,提出基础免疫后高度抗体滴度的再接种方案,最后一次接种后4周,如抗-HBs<10mIU/ml立即再接种;10~100mIU/ml,3~6个月后必须再接种[3]。实际工作中发现抗-HBs定量检测对于监测、指导肝移值中乙型肝炎免疫球蛋白的应用具有肯定作用。说明了对抗-HBs定量的检测是很有必要的,同时也可了解人体是否有抗-HBs、是否有足够的量可抵御HBV的侵袭。本文抗-HBs结果显示,160例TRFIA法阳性79例,抗-HBs浓度值在10~100mIU/ml以内,此量因无确切的抵御能力,建议加强预防措施。对于抗-HBs阴性的人群更应做好预防,至于100mIU/ml以上含量的人群,说明他们已有好的抵御能力。另外结果提示,ELISA法的抗-HBe阳性率明显高于TRFIA法,由于本身方法学的限制,最好在发出报告时加以综合分析或提高Cutoff值。 从实验结果表明HBV-M各项阳性结果都显示了不同的含量,说明了人体感染HBV后,病毒的复制程度或经抗病毒药物治疗后,HBV-M含量也随之变化,提示了动力学关系。据所掌握的资料观察,患都治疗前及治疗后HBV-M含量变化结果比较。见表1。 表1 2例病人HBV-M治疗前后结果比较 略 可以看出,HBsAg和HBeAg逐渐下降,而所有抗体逐步增高,这说明抗病毒治疗是有效的,同时也给临床预后判断提供了依据。 目前临床上对检测HBV-M的血清常用方法是血清免疫学检测,也就是检测患者对病毒侵染机体产生的免疫反应,因此免疫血清学指标可间接反映病毒的感染状况。随着检测水平的不断提高,TRFIA技术的问世给免疫自身的研究和发展提供了新的手段。虽然DNA是直接反映病毒本身在机体内的存在情况,而人们越来越意识到两者既相关,又不尽一致,高灵敏准确的HBV-M定量结果可与HBV-DNA的检测相互印证,给临床提供更客观有效的实验报告,临床上需要将两者结合起来对患者进行综合诊断、治疗和预后等判断。如果在没有开展HBV-DNA项目检测的单位,HBV-M含量检测其本身也就是一个很好监测病毒动力学变化的辅助指标。 参考文献 1、 陈紫榕,病毒性肝炎,北京:人民卫生出版社,2002,6,191. 2、 陈瑜,钟步云,徐根云,等.低水平血清乙肝病毒表面抗原测定及临床意义。中华检测医学杂志,2001,24:1. 3、 Klaus-peter Maier 着,郝连杰等译.第四版;北京人民卫生出版社,1997,8,35。 作者单位:521021广东省潮州市中心医院检验科 关于乙肝病毒标记物“两对半”定量 测定和肝功能(肝纤维化)检测的通知

各临床科室: 为增加我院临床诊断、治疗和观察病情的参考依据,进一步提高我院的医疗水平和我院的综合竞争能力。我们要积极开展应用技术、新项目。最近检验科在院领导的大力支持下引进了WALLAC公司生产的时间分辨荧光免疫分析系统,该时间分辨荧光免疫分析系统可进行多种检测(见附录)其中对“乙肝两对半”可进行准确的定量测定。欢迎各临床科选用 医务科 2002年12月25日 一、两对半定量测定 乙肝病毒(HBV)标记物的检测方法常用测定乙肝病毒的抗原、抗体标记物,由60年代末70年代初的琼脂扩撒法,依次发展为血凝法→酶联免疫吸附(ELISA)、同位素免疫标记(RIA)→化学发光免疫分析、生物发光、电化学发光免疫标记和80年代中建立的稀土离子荧光标记(时间分辨荧光免疫分析)等不同的检测方法。随着科学的发展和检验技术的进步,其方法每发展一步,乙肝标记物检出的灵敏度和准确性都得到不同的提高(其中RIA为10-12mol/L、ECL 10为10-19 mol/L、CLIA为10-15m ol/L、ECL10为-17/L、TRF为10-19 mol/L)。其中时间分辨荧光免疫分析(TRF)为近年新研制成功的用三价稀土离子作为示踪物,以单克降抗体包被支持物与样品中抗原反应,再加入有铕(EU)标记的抗体,进行反应检测,可大大降低一般同位素和荧光标记受环境干扰缺点,提高了检测的灵敏和准性,该TRF法检测乙肝病毒标记物较其他方法灵敏度高、特异性好,因干扰因素少可大地优于以上各种方法,可与HBV-DNA的检测相比(未经规范化要求开展的HBV-DNA检测,多年的临床实验证明,假阳性、假阴性率较高,重复性差,且不能定量。)TRF为目前检测乙肝病毒标记物最理想怕方法。TRF定量检测乙肝病毒“两对半”为临床诊断乙肝提供了新手段,有助于临床客观的分析HBV感染情况、疗效的观察和转归等情况的分析,至少可对一列情况更具有独特的诊断价值: 1、 治疗前进行病毒定量检测,可以指导选择抗病毒药物,避免盲目用药。 2、 治疗后定量间接判断体内病毒数量,有助于疗效的观察。 3、 怀孕前进行定量测定,有助于选择有利的怀孕时机。乙肝孕妇进行定量检查,有助于使部分病人得到及进的正确的诊断 二、两对半定量与定性组合测定 今后检验科对乙肝“两对半”检查,可给临床提供两种选择,一种是乙肝病毒5项定量测定;另一种是定量与定性组合检查,即在乙肝“两对半”的五项检查中,HbsAg(表面抗原)、抗-HBs(表面抗体)、,HbeAg(E-R抗原)此3项重要的指标中必须有一项是定量的(其余4项定性;也可选择其中2项做定量,其余3项做定性)。任上临床根据病人的经济情况选择,但如果临床不注明,检验科一律做HbsAg定量与其余4定性检查。5项定量测定收费105元,1项定量与其余4项定性检查收费45元。 1使“两对半”检查得到更加准确的结果与及更好解释和发挥“两对半” 此举意义○2使临床检查“两对半”有更多、更切合患者利益选择,如病人经检查的临床意义;○济许可,可选择5项定量测定,如果经济困难即可注明选择其中1项与其它4定性检3此种组合合理,检查意义大,符合国家循征医学的要求。 查。○ (“两对半”定量检查,收费105元,如同时做生化全套,开检验单时请分开单,如“两对半”为1项定量其余4项为定性检查在一张检验单同时申请即可。) 南通医学院 论着

甲胎蛋白、癌胚抗原时间分辨荧光法与化学发光法比较

王桂莲 朱利国 黄飚 蔡刚明 谭成 金坚 单位:江苏省江原医院,无锡241063

关键词:时间分辨荧光免疫分析;化学发光免疫分析;甲胎蛋白;癌胚抗原 [摘要]DTPA法制备了Eu标单抗,采用夹心法建交了AFP和CEA IFMA。它们的灵敏度分别为43ng/L和90ng/L;批内CV为%和%;批间CV为%和%:平均回收率为%和%。与CLIA进行临床应用比较显示结果高度相关(AFP r=,CEA r=)。 [中图分类号] [文献标识码] A [文章编号]1000-2057(2000)02-0159-01 3+

联系客服:779662525#qq.com(#替换为@) 苏ICP备20003344号-4