经典液相色谱法习题 一、单项选择题
1．某组分在以丙酮作展开剂进行吸附薄层色谱分析时，欲提高该组分的比移值，可选择的展开剂是（ ）
A．环己烷 B．乙醚 C．氯仿 D．乙醇 2．纸色谱中滤纸所起的作用是（ ）
A．固定相 B．展开剂 C．吸附剂 D．惰性载体 3．纸色谱中可用于鉴定氨基酸的显色剂是（ ） A．荧光黄 B．苯胺 C．茚三酮 D．溴甲酚绿
4．使两组分的相对比移值发生变化的主要原因是（ ） A．改变薄层厚度 B．改变固定相粒度 C．改变固定相种类 D．改变展开温度 5．下列说法错误的是（ ）
A．采用纸色谱进行分离时，样品中极性较小的组分比移值大
B．采用正相分配色谱进行分离时，样品中极性较小的组分先被洗脱出柱
C．采用分子排阻色谱进行分离时，样品中相对分子质量小的组分先被洗脱出柱 D．采用离子交换色谱进行分离时，样品中高价离子后被洗脱出柱
6．在柱色谱法中，可以用分配系数为零的物质来测定色谱柱中的（ ） A．固定相的体积 B．柱内总体积 C．填料孔隙的体积 D．死体积 7．影响硅胶吸附色谱中硅胶吸附能力的因素有（ ） A．被分离成分的极性大小 B．洗脱剂的极性大小 C．洗脱剂的酸碱性大小 D．硅胶的含水量
8．在正相液固色谱中，下列化合物的保留值从小到大的顺序是（ ） A．酮<醛<醚<酯 B．醛<酮<酯<醚 C．醚<酯<酮<醛 D．酮<酯<醛<醚
9．在以硅胶为固定相薄层色谱中，若用某种有机溶剂为流动相，则在展开过程中迁移速度慢的组分是（ ）
A．极性大的组分 B．极性小的组分 C．挥发性大的组分 D．挥发性小的组分 10．正相分配色谱常用的流动相为（ ）
A．亲水性溶剂 B．亲脂性溶剂 C．酸的水溶液 D．碱的水溶液 二、简答题
1．试简述正相色谱、反相色谱及各自适用于分离的物质。
2．以苯-甲醇（2:3）为展开剂，在硅胶薄层板A上，某物质的Rf值为0.6，在硅胶薄层板B上，该物质的Rf值为0.5，试问A、B两板所用硅胶哪个活度级别大？ 3．试简述边缘效应及产生的原因。 4．薄层色谱如何检视斑点？
5．简述氧化铝作为吸附剂的特性及应用范围。
6．试述如何应用“相似相溶”原则选择分配色谱的固定液。
三、计算题
1．某薄层板展开A、B两物质，已知A、B的相对比移值为1.2。展开结束后，B的斑点中
心距原点距离为8.5cm，溶剂展距为15cm，请问A的斑点中心距原点多远？A的比移值是多少？
经典液相色谱法习题参考答案 一、单项选择题
1．D 2．D 3．C 4．C 5．C 6．D 7．D 8．C 9．A 10．B 二、简答题 答案略。 三、计算题 解：
气相色谱法习题 一、单项选择题
1．根据速率方程，在高流速情况下，影响柱效的因素主要是 （ ） A．传质阻力 B．纵向扩散 C．涡流扩散 D．弯曲因子
2．若其他条件相同，仅理论塔板数增加一倍，则两相邻峰的分离度是（ ） A．原来的2倍 B．原来的C．原来的1/
倍
倍 D．原来的1/2倍
3．气液色谱中，被分离组分与担体的相互作用常常会导致（ ） A．形成非常窄的洗脱峰 B．过度的涡流扩散 C．拖尾峰的形成 D．降低检测器的灵敏度
4．在气液色谱中，色谱柱的使用上限温度取决于（ ）
A．样品中沸点最高组分的温度 B．样品中各组分沸点的平均值 C．固定液的沸点 D．固定液的最高使用温度 5．提高热导检测器灵敏度的方法是（ ） A．增加载气流速 B．增加检测器温度 C．适当提高桥电流 D．增加气化室温度
6．在气相色谱中，直接表征组分在固定相中停留时间长短的保留参数是 （ ） A．死时间 B．调整保留时间 C．相对保留值 D．保留指数 7．使用热导检测器时，应选用的载气是（ ） A．H2 B．He C．Ar D． N2 8．在气相色谱中，填料为涂有角鲨烷的红色担体，载气为氮气，先流出色谱柱的组分是（ ） A． 甲烷 B． 乙烷 C． 丙烷 D． 丁烷
9．当载气线速度较小，速率方程中的分子扩散项起主要作用时，为提高柱效可采用的载气是（ ）
A．CO2 B．H2 C．N2 D． He
10．用气相色谱法测定化学原料药中有机溶剂的残留量，宜采用的检测器是 （ ） A．热导检测器 B．氢焰离子化检测器 C．电子捕获检测器 D．火焰光度检测器 二、简答题
1．简述气相色谱仪的基本组成部分及各自的作用。
2．若要用气液色谱分离苯（bp80.1℃）与环己烷 （bp80.7℃）的化合物，应该如何选择固定液？并说明组分流出顺序。
3．简述气相色谱法中常用的色谱定量方法及其各自的优缺点和使用范围。
4．当各参数发生下列改变时：（1）柱长缩短；（2）固定相改变；（3）流动相流速增加；（4）相比减少是否会引起分配系数的改变？为什么？
5．样品在进样器以塞子状进样，起始谱带非常窄，但经色谱柱分离后谱带变宽，试问这一现象是由哪些因素造成的？
6．在气相色谱法中，固定相确定之后柱温是最重要的分离条件。试问柱温对色谱分析有何影响？如何选择柱温？
三、计算题
1．一根 2 m长的填充柱的操作条件及流出曲线的数据如下： 流量 20 mL/min（ 50℃） 柱温 50℃
柱前压力：133.32 kPa 柱后压力101.32kPa
空气保留时间0.50 min 正己烷保留时间3.50 min 正庚烷保留时间4.10 min
（1）计算正己烷，正庚烷的调整保留体积；
（2）如正庚烷的半峰宽为0.25 min，用正庚烷计算色谱柱的理论塔板数和理论塔板高度； （3）求正己烷和正庚烷的分配比k1和k2。
2．用气相色谱法测一个乙酯样品中游离的乙醇，取2.00mL样品进样，得到乙醇峰面积0.85cm2。再取样品5.00mL和25.00mL乙醇混合，取混合液2.00mL进样，得到乙醇峰面积1.45cm2。计算乙醇在样品中的质量分数。（已知乙醇密度0.789g/mL，乙酯密度0.901 g/mL）
气相色谱法习题参考答案 一、单项选择题
1．A 2．B 3．C 4．D 5．C 6．B 7．A 8．A 9．C 10．B 二、简答题 答案略。 三、计算题 1．解：（1）
（2）W1/2(正庚烷)＝0.25min
n=5.54×(t/W1/2)2=5.54×(4.10/0.25)2=1490 H=L/n=200/1490= 0.13cm
（3）
2．解：设2μL样品中含乙醇
，则5mL样品中含乙醇
2μL混合液中含乙醇
因为乙醇含量与峰面积成正比
x=11.04
所以乙酯中乙醇含量
高效液相色谱法习题
一、单项选择题
1．对高效液相色谱的H-u曲线描述正确的是（ ）
A．与气相色谱一样，存在着Hmin B．H随流动相的流速增加而下降 C．H随流动相的流速增加而上升 D．H受流动相的流速影响很小
2．高效液相色谱中，使用最多的固定相为化学键合固定相，它是用化学反应的方法将（键合在载体表面上而形成的。
A．固定相 B． 流动相 C． 固定液的官能团 D．流动相的官能团
3．下列高效液相色谱仪检测器中，其检测原理依据朗伯比尔定律的是（ ） A．紫外检测器 B．蒸发光散射检测器 C．示差折光检测器 D．电导检测器
4．对HPLC色谱法定量方法描述正确的是（ ）
A．常用归一化法 B．标准曲线过原点常用外标一点法
C．标准曲线不过原点常用外标一点法 D．标准曲线过原点常用外标两点法 5．HPLC与GC的比较，可忽略纵向扩散项，这主要是因为（ ） A．柱前压力高 B．流速比GC的快 C．流动相黏度较小 D．柱温低
6．在液相色谱中，梯度洗脱适用于分离（ ）
A．异构体 B．沸点相近，官能团相同的化合物 C．沸点相差大的试样 D．极性变化范围宽的试样
）7．当用硅胶为基质的填料作固定相时，流动相的pH范围应为（ ） A．在中性区域 B．5-8 C．2-8 D．1-14
8．在液相色谱中，常用作固定相又可用作键合相基体的物质是（ ） A．分子筛 B．硅胶 C．氧化铝 D．活性炭
9．在反相色谱法中，若以甲醇-水为流动相，增加甲醇的比例时，组分的容量因子k与保留时间tR的变化为（ ）
A．k与tR增大 B． k与tR减小 C． k与tR不变 D．k增大，tR减小 10．分离有机弱酸、弱碱与中性化合物的混合物样品，应选用（ ） A．离子交换色谱 B．吸附色谱
C．正相分配色谱 D． 离子抑制色谱
二、简答题
1．简述高效液相色谱仪主要部件及其作用。
2．简述HPLC中，紫外检测器的检测原理及其局限性。 3．简述高效液相色谱法中化学键合固定相的优点。 4．简述高效液相色谱常用检测器及其适用范围。
5．什么是梯度洗脱？试比较梯度洗脱与气相色谱中的程序升温之间的异同点？ 三、计算题
1．在ODS柱上分离乙酰水杨酸和水杨酸混合物，结果乙酰水杨酸保留时间7.42min，水杨酸保留时间8.92min，两峰的峰宽分别为0.87min和0.91min，问此分离度是否适合定量分析？
2．用反相HPLC测样品中芦丁的质量分数。选对氨基苯甲酸为内标。方法如下：准确配制1mg/mL浓度的芦丁标准溶液和对氨基苯甲酸标准溶液，精取芦丁标准溶液2.00mL、4.00mL、6.00mL、8.00mL、10.00mL，分别置于25mL容量瓶中，同时各加入内标溶液2.00mL，定容。各进样三次，进样量10μL。得芦丁色谱峰面积与内标物峰面积之比得平均值分别为1.43、2.86、4.29、5.73和7.16。精称样品0.2070g，溶解，定容于100mL容量瓶中。精取10.00mL于25mL容量瓶中，同时加入内标溶液2.00mL，定容。进样量10μL，三次进样得芦丁色谱峰面积与内标物峰面积之比得平均值为5.10。计算样品中芦丁的质量分数。（以芦丁与内标体积比对面积比作标准曲线，回归方程为Ai/As=1.433V芦丁/V内标-5×10-3 r=0.9999）
高效液相色谱法习题参考答案
一、单项选择题
1．C 2．C 3．A 4．B 5．D 6．D 7．C 8．B 9．B 10．D 二、简答题
1．答：键合相的优点主要有：①使用过程中不易流失；②化学性能稳定，一般在pH2~8的溶液中不变质；③热稳定性好，一般在70℃以下不变性；④载样量大，比硅胶约高一个数量级；⑤适于作梯度洗脱。
2．答：高效液相色谱法中常用的检测器有：紫外检测器、荧光检测器、电化学检测器、示差折光检测器、二极管阵列检测器、蒸发光散射检测器等。紫外检测器适用于检测有紫外吸收的物质。荧光检测器适用于能产生荧光或其衍生物能发荧光的物质。蒸发光散射检测器适用于无紫外吸收（或较弱）的物质如糖类等。
3．答：液相色谱中引起色谱峰扩展的因素主要包括包括涡流扩散、流动的流动相传质阻力、滞留的流动相传质阻力以及柱外效应。在气相色谱纵向扩散比较显著，而液相色谱中纵向扩