针对药理学有关知识内容与实验课的要求,拟开设以下几个方面的实验:
实验一:药理学实验的基本知识及基本技能训练(4学时)
实验目的与要求:通过实验使学生掌握药理实验有关的动物选择、应用、捉拿、给药、采血等基本知识及基本技能的训练。 要点:
一、常用动物捉持方法 ⑴ 小鼠捉持 ⑵家兔捉持
二、常用动物给药方法 ⑴ 小鼠灌胃——;皮下注射——;腹腔注射——;肌肉注射——; 尾静脉注射——; ⑵家兔灌胃——;耳缘静脉给药——; 三、常用动物取血方法
⑴ 小鼠后眼眶静脉丛取血——用拇指和食,中指捏住鼠颈部,利用捏紧的压力,使静脉丛淤血.将一特制硬玻璃吸管(约长15cm,前端拉成管壁略厚的毛细管),从内眼角插入眼睑和眼球之间,轻轻香眼底方向移动,并略加捻转,血即自然顺便玻璃管流出。
⑵ 眼眶动脉、静脉取血——左手抓住小鼠,拇指和食指尽量将头部皮肤捏紧,使眼球突出,用无钩弯镊将眼球摘除,将鼠倒置,血即流出
1. 小鼠捉持法
以右手捉小鼠尾,将小鼠放于粗糙面上,向后轻拉小鼠尾部,使小鼠固定
于粗糙面上。用左手的拇指、食指和中指捏住小鼠两耳及头部皮肤,无名指、小指和掌心夹住背部皮肤和尾部,使头部朝上,颈部拉直但不宜过紧,以免窒息(见图1—1)。
另一种捉持方法是只用左手,先用食指和拇指抓住小鼠尾巴,后用手掌及小指和无名指夹住其尾部,再以拇指及食指抓住两耳和头部皮肤(见图1—2)。前者易学,后者便与快速捉拿给药。
图1—1 小鼠的捉拿方法1 图1—2 小鼠的捉拿方法2
2. 小鼠灌胃
以左手捉持小鼠,头部朝上,使其头颈充分拉直。右手拿起装有灌胃针头的注射器,自口角插入口腔,再从舌面紧沿上腭进入食道(见图1—3)如插入正确,灌胃针头容易进入,如遇阻力,可能插入气管,应退出再插。灌胃液最多不超过0.1ml。
图1—3 小鼠的灌胃法 图1—4 小鼠的皮下注射法
3. 小鼠皮下注射
将小鼠至于铁丝网上,左手抓住小鼠,以拇指扣食指捏起背部皮肤,右手
持注射器刺入背部皮下注射药液。(见图1—4)。另一种方法可由两人合作,一
人左手抓住小鼠头部皮肤,右手拉住尾巴,另一人左手捏起背部皮肤,右手持注射器(针头不宜过粗,选用5号或6号针头)将针头刺入背部皮下。旋转注射器出针,否则药液将会从针眼处漏出。
4.小鼠肌肉注射
左手拇指和食指抓住小鼠头部皮肤,小指、无名指和手掌夹住鼠尾及一侧
后肢,将针头刺入后肢外侧部肌肉。如两人合作,一人左手抓住小鼠头部皮肤,右手拉住尾巴,另一人持注射器(选用4号或5号针头)。注射量:每腿不宜超过0.2ml。
5.小鼠腹腔注射
左手持小鼠(方法同灌胃),腹部朝上,头部下斜,右手持注射器(选5号
或6号针头),以10°角从下腹左侧或右侧(避开膀胱)朝头部方向首先刺入皮下,然后再以45°角刺入腹腔,注射药液(见图1—5)。两次进镇,防止漏液:针头与富强的角度不宜太小,否则易进入皮下;正腹部进针,以刺破膀胱;穿刺部委不宜太深或太近于上腹部,避免刺破内脏。常用注射量为0.5ml,不宜超过1.0ml。
图1—5 小鼠的腹腔注射法
6.小鼠尾静脉注射
将小鼠置特制的铁皮固定器内,露出尾巴,涂搽75%乙醇,使血管扩张。将
鼠尾拉直,选择一条扩张最明显的血管,用拇指及中指拉住尾尖,使之压迫尾根保持血管充血扩张,用4号注射针头以约3~5°角(几乎平行)刺入尾静脉内,缓缓将药液注入(见图1—6)。如针头没有插入静脉内,推入药液有阻力多,而且局部辩白。此为注入皮下的表现,应重新穿刺。因此,为静脉注射时,必须从近尾端静脉开始,这样可以重复注射数次,以便失败后可在第一次穿刺点的上方重新进行,小鼠尾静脉注射的药液量一般为0.2~1.0ml。
图1—6 小鼠的尾静脉注射法
家兔的捉持和给药方法
1、捉持
一手抓紧背部皮肤,轻轻将兔提起,另一手托住臀部,使兔成坐位姿势(见
图1—7)。
图1—7 兔捉持方法
1、2、3均为不正确的捉兔方法,1可损伤两肾脏;2可造成皮下内出血;3可损伤两耳; 4、5均为正确的捉持方法,颈后部皮较厚,可以抓,并用手托住兔体。
将兔仰卧,一手抓住颈部皮肤,另一手顺其腹部摸至膝关节。另一人用绳带捆绑兔的四肢试图腹部向上固定在土手术台上。头部则用兔头固定夹固定。
2、灌胃
将兔固定于兔箱内,用木制开口器由齿列间插入口内,并向内上方转动直至兔舌被淹压出为止,然后将导尿管从开口器中的小孔插入沿上腭后壁轻轻地送
入食道,约15~20cm左右,已达胃部(见图1—8)。注意不能插入气管,可将导尿管的外端侵入水内,观察有无气泡放出。无气泡方能注入药液,药液推完后再注入4~5ml水或少许空气,以便将导尿管中的药液全部推至胃中。而后将导尿管迅速拔出,否则水可由导尿管中滴至气管内。
图1—8 家兔的灌胃法
3、静脉注射
将兔头固定于兔箱内,先拔去耳背面外侧静脉处的毛(便于认清静脉),然后用左手拇指和中指捏住耳尖部,食指点在兔耳注射处下面。右手持注射器(选用6号针头),先耳尖端开始注射,约以5°角刺入,刺入后用左手拇指、食指及中指捏住针头接头处及兔耳加以固定,以防突然挣扎时针尖脱出血管(见图1—9)。注射时,注意不能有气泡注入,否则兔将立即死亡。常用注射量为10ml以上),应缓缓注射药液。如插入血管,药液推入容易,如插在血管外,则有丘状突起,应拔出针头,在近心端重新注射。针头拔出时必须用棉球压住注射部位以防出血。