TSA对人骨肉瘤细胞凋亡的影响及作用机制为临床治疗

1.骨肉瘤是最常见的恶性成骨性肿瘤之一。科研人员研究曲古抑菌A(TSA)对人骨肉瘤细胞凋亡的影响及作用机制,为临床治疗寻找新方向。实验过程如下:

步骤1:用含青霉素和链霉素的高糖培养基,在37℃、5% CO培养箱中培养人骨肉瘤细胞一段时间。

步骤2:取适宜浓度的处于生长旺盛期的人类骨肉瘤细胞,用加入不同浓度的TSA(0~200ng·mL)的培养基继续培养24h。

步骤3:对各组细胞进行抽样检测,检测方法是先用台盼蓝试剂(一种细胞活性染料)染色再用血细胞计数板计数,统计细胞存活率(未染色细胞数/细胞总数×100%),结果如图1。 步骤4:分别提取TSA浓度为0 ng·mL、25 ng·mL、50 ng·mL处理的3组细胞,测量细胞中与凋亡相关的基因(Bax、Bcl-2)和β-肌动蛋白基因(不同的组织细胞中表达相对恒定)表达的蛋白质量并计算比值,结果如图2。

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分析回答: (1)与正常成骨细胞相比,骨肉瘤细胞容易在体内分散和转移,其主要原因是 。高糖培养基中加入青霉素和链霉素的目的是 ,细胞培养箱中保持5% CO的作用是 。

(2)步骤2中,设置0ng·mLTSA实验的主要目的是 。 (3)用台盼蓝试剂检测细胞活性的主要原理是 。 (4)图1所示结果表明 。

(5)根据图2判断,骨肉瘤细胞中 基因过度表达会加速细胞凋亡。

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33.(共10分)药物N会抑制菌种A的生长,但对菌种B无明显影响。为了验证上述结

论,请根据以下提供的材料与用具,补充和完善实验思路,预测实验结果并进行分析讨论。

材料与用具:菌种A、菌种B、药物N溶液、培养液、培养瓶若干、显微镜等。

(要求与说明:不考虑加入溶液对体积的影响,细胞计数的具体操作过程不作要求,实验条件适宜) 请回答下列问题: (1)实验思路:

①取菌种A、菌种B,经稀释后得到菌液。在显微镜下进行计数,并记录。 ②取培养瓶若干,分组如下: ▲ 。每组设置若干个重复。

③将上述样品在适宜条件下培养,每隔一段时间,分别取上述培养瓶中的菌液, ▲ 。 ④ ▲ 。

(2)预测实验结果(用坐标系和细胞数变化曲线示意图表示实验结果):

(3)分析与讨论:

菌种A与菌种B的质膜成分不完全相同。药物N能与胆固醇结合,改变质膜通透性,从而起抑制和杀菌作用。据此可推测药物N对菌种B无影响的原因是 ▲ 。 33.(共10分)

(1)②甲组:菌种A+培养液 乙组:菌种A+培养液+药物N 丙组:菌种B+培养液 丁组:菌种B+培养液+药物N(各1分)

③在显微镜下分别进行计数,并记录。(1分) ④对实验数据进行统计分析。(1分) (2) 细 丙、丁 胞甲 数 乙 时间 药物N对不同菌种的影响曲线图 (坐标系1分,4条曲线每个各0.5分,共3分。说明:乙组细胞数比另三组少,丙、丁基本一致或重叠,甲可以在丙、丁之上或之下。) 31. 疟原虫是一种单细胞动物。它能使人患疟疾,引起周期性高热、寒战和出汗退热等临

床症状,严重时致人死亡。

(1)在人体内生活并进行细胞分裂的过程中,疟原虫需要的小分子有机物的类别包括

_____________________________________________________(写出三类)。 (2)进入血液循环后,疟原虫选择性地侵入红细胞,说明它能够_________________并

结合红细胞表面受体。

(3)疟原虫大量增殖后胀破红细胞进入血液,刺激吞噬细胞产生致热物质。这些物质

与疟原虫的代谢产物共同作用于宿主下丘脑的_______________中枢,引起发热。

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