练出高分
1．下图甲、乙是微生物接种常用的两种方法，请回答下列相关问题：
(1)图甲是利用____________法进行微生物接种，图乙是利用__________________法进行微生物接种。这两种方法所用的接种工具分别是__________和____________；对这两种接种工具进行灭菌和消毒的方法依次是________________和酒精消毒。 (2)接种操作为什么一定要在酒精灯火焰附近进行？
________________________________________________________________________。 (3)接种后，在固体培养基上培养细菌时为什么进行倒置培养？
________________________________________________________________________。 (4)如图是采用上述接种方法接种后培养的效果图解，其接种方法是________(填“图甲”或“图乙”)。
答案 (1)划线分离 涂布分离 接种环 玻璃刮刀 灼烧灭菌 (2)火焰附近存在着无菌区域 (3)避免培养过程产生的水分影响微生物的生长 (4)图乙
解析 图甲和图乙分别是划线分离法和涂布分离法，这两种方法所用的接种工具分别是接种环和玻璃刮刀。由于在酒精灯火焰附近存在着无菌区域，因此接种常在火焰附近进行。在微生物培养过程中会产生水，对微生物的生长造成影响，故需要倒置培养。
2．苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株，筛选的主要步骤如图所示，①为土壤样品。请回答下列问题：
(1)②中培养目的菌株的选择培养基中应加入________作为碳源，②中不同浓度碳源的培养基________(A.影响；B.不影响)细菌的数量，如果要测定②中活细菌数量，常采用____________________法。
(2)④为对照，微生物在④中不生长，在⑤中生长，④与⑤培养基的主要区别在于________________________________________________________________________
________________________________________________________________________； 使用______________________________法可以在⑥上获得单菌落。采用固体平板培养细菌时进行倒置培养的原因是_________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (3)实验过程中如何防止其他微生物的污染？
________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 答案 (1)苯酚 A 涂布分离 (2)④的培养基没有加入苯酚作为碳源，⑤的培养基加入了苯酚作为碳源 涂布分离法或划线分离 防止冷凝后形成的水珠滴落在培养基上污染培养基 (3)培养基灭菌，接种环境灭菌，接种过程进行无菌操作
解析 根据微生物对营养的需求，在培养基中加入或不加某些物质以达到促进目的菌生长，抑制或阻止其他杂菌生长的目的，然后再用涂布分离法、划线分离法或其他方法筛选出单个目的菌落，再接种培养即可获得纯目的菌。为防止培养基中水分蒸发形成的水珠落入培养基中影响菌体生长，所以要将培养皿倒置。在设计实验中要注意单一变量原则和对照原则，操作中要严格进行无菌操作。
3．从土壤中分离以尿素为氮源的细菌，实验过程如图所示：
(1)图中物质A为________________，若要统计每克土壤样品中以尿素为氮源的细菌的活菌数目，宜采用________________法接种到尿素培养基上，对照组配制的培养基为____________培养基，若用同浓度的土壤稀释液接种，实验组培养皿中菌落数____________(大于、等于或小于)对照组。在能利用尿素的细菌菌落周围，有红色环带出现的
原
因
是
________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (2)下列培养基中，能分离出分解尿素的细菌的是( ) A．葡萄糖、NaCl、K2HPO4、酚红、琼脂糖、水 B．葡萄糖、NaCl、K2HPO4、酚红、琼脂糖、水、尿素 C．NaCl、琼脂糖、水、蛋白胨、酵母提取物、尿素
D．葡萄糖、NaCl、K2HPO4、酚红、琼脂糖、水、蛋白胨、酵母提取物 (3)欲将分离得到的以尿素为氮源的细菌进行扩大培养，应使用________培养基。
答案 (1)无菌水 涂布分离 LB全营养 小于 因为能利用尿素的细菌产生的脲酶，将培养基中的尿素分解，产生的氨使指示剂呈红色 (2)B (3)LB液体
4．幽门螺杆菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素。在患者体内采集样本
并制成菌液后，进行分离培养。实验基本步骤如下： 配制培养基→灭菌、倒平板→X→培养→观察 请回答：
(1)在配制培养基时，要加入尿素和酚红指示剂，这是因为Hp含有________，它能以尿素作为氮源；若有Hp，则菌落周围会出现______色环带。 (2)下列对尿素溶液进行灭菌的最适方法是__________灭菌。 A．高压蒸汽B．紫外灯照射 C．70%酒精浸泡D．过滤
(3)步骤X表示______________________。在无菌条件下操作时，先将菌液稀释，然后将菌液____________到培养基平面上。菌液稀释的目的是为了获得______________________菌落。
(4)在培养时，需将培养皿倒置并放在____________中。若不倒置培养，将导致__________________。 (5)临床上用
14
C呼气试验检测人体是否感染Hp，其基本原理是Hp能将
14
C标记的
________________分解为NH3和14CO2。 答案 (1)脲酶 红 (2)D (3)接种 涂布 单 (4)恒温培养箱 无法形成单菌落 (5)尿素
解析 (1)幽门螺杆菌(Hp)含有脲酶，能以尿素为氮源，在加入尿素和酚红指示剂的培养基中培养Hp，由于尿素经脲酶的降解可产生碱性的NH3，NH3能使培养基中的酚红由红黄色变成红色，故菌落周围会出现红色环带。(2)由于尿素加热会分解，对尿素溶液进行灭菌最好用G6玻璃砂漏斗过滤。(3)微生物的分离和培养步骤是：配制培养基→灭菌、倒平板→接种→培养。为获得单菌落，接种操作前应先将菌液稀释，然后将菌液涂布到培养基平面上即可。(4)微生物培养时需将培养皿倒置并放在恒温培养箱中，若不倒置培养，则无法形成单菌落。(5)幽门螺杆菌能将14C标记的尿素分解为NH3和14CO2，故临床上常用14C呼气试验检测人体内幽门螺杆菌的存在。
5．酶是生物体内细胞合成的生物催化剂，没有酶，生物体内的代谢反应就不能进行。随着生物科学技术的发展，酶已经走出实验室走进人们的生产和生活。下列是一组关于酶的制备及应用的知识，请回答相关问题：
(1)汇源果汁在口感和澄清度上比自制的果汁好，是因为生产时使用了____________，工业上通常采用______________________________来生产该物质。
(2)所谓固定化酶就是将酶固定在不溶于水的载体上，其最大的优点是________________________________________________________________________。 (3)下图是某课题研究小组的同学为探究果胶酶的某些特性所做的实验：