微生物:微生物是众多肉眼不可见、个体微小的低等生物的总称。通常指直径小于或等于0.1mm的生物。
微生物的分类:界-门-纲-目-科-属-种,界-最大,种-最小最基本,株-不是分类单位
微生物的命名:林奈双名法
学名=属名+(种名) +(命名人的姓)
(拉丁文n.) (拉丁文adj.)
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微生物的特点:
(一)个体极小,比表面积大 (二)种类繁多、分布极广 1.微生物物种丰富多样 2.微生物代谢类型丰富多样 3.微生物生态类型丰富多样 (三)繁殖迅速、数量巨大 (四)代谢能力强,也易变异
微生物的类群(按照有无细胞结构,分为细胞型微生物和非细胞型微生物) (一)原核微生物:细菌、放线菌、支原体、衣原体、立克次氏体、蓝细菌 (二)真核微生物:真菌(霉菌、酵母菌、蕈类)、原生动物、藻类。 (三)非细胞型微生物:病毒(噬菌体)、类病毒、朊病毒
原核微生物——细菌: 大小:微米
形状:球状、杆状、螺旋状 结构:(基本结构和特殊结构)
基本结构:细胞壁,细胞膜,细胞质及内含物,原核(拟核) 特殊结构:荚膜,鞭毛(运动器官),芽孢(休眠体,非繁殖体,具有抗逆性)
+-细菌细胞壁化学成分:主要是肽聚糖,G特有成分磷壁酸,G特有成分脂多糖。
+
根据细菌细胞化学组成与结构的不同,可将所有细菌染色为革兰氏阳性细菌(表示为:G),革兰氏阴性细
-菌(表示为:G)两类。
革兰氏染色步骤:涂片→固定→初染→水洗→媒染→乙醇脱色→水洗→复染→水洗
+
革兰氏阳性菌:G,兰紫色(球菌、杆菌有芽孢)
-革兰氏阴性菌:G,红色(占大部分,杆菌为主)
细菌细胞壁的功能:
1.使细胞具有固定外形和保护细胞;
2.细胞壁化学组成的细微差异可使不同细菌具有不同的抗原性、致病性和对噬菌体等感染的敏感性; 3.细菌细胞壁具有一定孔径的微孔,可以允许水、空气和其他小分子化学物质的进入,但可对大分子物质起阻拦作用;
4.细胞壁是具鞭毛细菌鞭毛运动的力学支点,没有细胞壁的鞭毛无法运动。
按酶的催化反应类型,可分六大类:水解酶类、氧化还原酶类、转移酶类、裂解酶类、异构酶类、合成酶类。
微生物的营养物质主要有五类:碳源(糖、有机酸、醇、脂肪或芳香烃类化合物、纤维素)、氮源(氮气、氨、铵盐、硝酸盐、氰化物、尿素、胺、酰胺、嘧啶、氨基酸、肽、胨以及蛋白质等)、无机盐(钠、钾、钙、镁、铁化合物和磷酸盐、硫酸盐等无机盐、微量元素铜、锰、锌、钴、钼等)、生长因子(维生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等)和水
分解代谢:又称异化作用或分解作用,是微生物将自身的或外来的各种复杂的有机物质分解为简单化合物的过程,在此过程中有能量释放。
合成代谢:(同化作用、合成作用)是微生物不断由外界取得营养物质合成它自身细胞物质的过程,在此过程中需要吸收能量。
营养物质运输机制及特征:
1.单纯扩散(被动扩散,自由扩散):不耗能,不需载体,驱动力浓度差 2.促进扩散:不耗能、需载体、驱动力浓度差 3.主动运输:耗能、需载体、逆浓度梯度
4.基团转位:耗能、需载体、被转运物质化学结构改变。
主动运输:是营养物质逆浓度梯度移动且消耗能量的运输方式。是微生物吸收营养最主要的方式。
微生物五大营养物质的作用 碳源:合成细胞物质、能源 氮源:合成细胞物质、能源
无机盐:构成细胞的组成成分;酶的组成部分、维持酶的活性;调节细胞渗透压、氢离子浓度和氧化还原电位;有些还作为能源。
生长因子:构成酶的辅酶或者辅基参与新陈代谢 水:溶媒;介导;调节温度
微生物细胞中含量最多的成为是:水
培养基:人工配制的满足微生物生长和产生代谢产物的营养基质
培养基配制原则:
1.根据微生物的营养需求供给合适的碳源、氮源、无机盐或生长因子等。 2.注重各营养物质的浓度及配比。 3.控制理化条件
4.利用价格低廉且容易得到的原料作为培养基的营养成分,在工业化生产中,可以降低成本。 此外,配制培养基应避免产生沉淀,配制完毕后应及时灭菌。
高压蒸汽灭菌锅的使用及注意事项: 1.加水,检查锅内蒸馏水量是否充足;
2.装锅、加盖,将待灭菌的物品包装完整,放入锅内,灭菌物品间一定要有空隙;
3.加热排气,加热盖好锅盖,螺母对称拧紧,打开放气阀,关闭安全阀;打开电源观察放气阀是否有蒸汽流出,确定后关闭放气阀;
4.保温保压,待压力表到达0.10Mpa,温度121℃左右,维持15-30分钟,切断电源; 5.出锅,待压力表指针归零后,打开放气阀,按对称方式打开锅盖,取出物品。
注意事项:1.锅内水必须用蒸馏水或纯化水。2.锅盖螺母必须对称拧紧。3.一定要在放气阀出大量蒸汽在关闭。4.当灭菌时间结束时,必须等到压力表归零在打开。5.灭菌锅超过最大耐受压力后,放气阀会自动弹开,此时锅内物品不能保证灭菌完全,需重新灭菌。
培养基按用途分为四类:
1)基础培养基:指含有一般微生物生长繁殖需要的基本营养成分。
2)加富培养基:指培养基中加入额外营养物质,满足某种或某类微生物的需要,使其生长繁殖较其他微生物迅速以逐步淘汰其他微生物
3)选择培养基:指在培养基中添加或不添加特定化学物质以选择性地促进某类微生物生长而抑制不需要微生物的生长
4)鉴别培养基:指利用微生物生长代谢的特性,在培养基中加入适当的指示剂,根据代谢产物与指示剂的反应结果区别不同种类的微生物
培养微生物时平板培养基要倒置原因:
1.如果是温育,如37℃或是更高,培养基中的水份蒸发遇皿盖冷凝后滴回培养基表面,影响菌落的分布。2.倒置后,在重力的作用下,菌落相对不会蔓延的太快,降低计数难度。3.在用强制通风的培养箱里,倒置平板可以减少培养基表面的空气流动,能很大程度的减少外来微生物的侵染,同时培养基水分蒸发减慢,减慢培养基出现干裂的时间。
细菌的生长曲线大致分为迟缓期、对数期、稳定期和衰亡期4个阶段。
迟缓期:当细菌被转入新的培养基中,它们一般不立即繁殖,而是需要一段时间来适应新的环境,然后才开始繁殖。起初速度较慢,随后渐快而进入对数期。
对数期:细菌细胞的数目以几何级数增加,以时间为横坐标,细菌数目的对数为纵坐标,则与时间呈直线关系,此阶段细胞繁殖速率最高,细胞健壮、整齐、代谢活力强,分解有机质的速率也最高。
稳定期:对数生长期后,细胞分裂逐渐减慢,由于营养物质供应不足等生活条件的限制,细胞的死亡率逐渐增加,当细胞增殖率与死亡率达到平衡时,细菌总数即不再增加,这时培养液单位体积中细菌数目达到最高峰,这种状态可以维持一个阶段,称为稳定生长阶段。细菌细胞在稳定生长阶段分裂速度降低,细胞内贮存物质的积累增加,使菌体出现颗粒、异染质、脂肪球等。芽孢细菌多在此时形成芽孢。细胞逐渐呈现衰老。
衰亡期:在稳定期后,由于营养物质缺乏、代谢产物及有毒物质积累,细胞生长受到限制,细胞分裂由缓慢而停止,细胞死亡率增加,生长曲线下降。细胞呈衰老现象,细菌颗粒更明显,原生质中出现液泡与空泡,有些菌细胞常呈畸形或多形态性,有些细胞常自己消解而死亡。环境中营养物质消耗殆尽,细菌开始利用自身的贮藏物质甚至酶等作为养料。故亦称内源代谢阶段或内源呼吸阶段。