微生物遗传育种
一、选择填空(10分)
1.D于1941年用X射线处理粗糙脉孢霉(Neurospora crassa)的分生孢子，分离到了营养缺陷型，从而揭开了微生物遗传学新的一页。
A. G. B. ReedB. J.L. Alloway C. F. Griffith & P.Hadley D. G. Beadle & E. Tatum 2. 1943年，D用严密的实验证实了细菌的抗性是基因突变的结果。
A. F.Griffith & O.T. Avery B. E. Tatum C. J. Lederberg D. S.E. Luria & M. Delbruck 3. 1952年，J和E. Lederberg夫妇用C直接证明了突变的性状与引起突变间的原因无直接对应关系。
A. 波动实验 B. 涂布实验C. 影印实验 D. 彷徨实验
4. 5－嗅尿嘧啶(5-BU)是C的结构类似物，可代替C参入到DNA中，从而造成AT到GC的转换而引起突变。 A. A B. G C. T D. C
5.A可引起氧化脱氨反应，使A变为H，C变为U，G变为X，从而改变配对性质，造成碱基转换突变。
A．HNO2 B．2-Ap C．DES D．NTG
6.羟胺在pH6.0，浓度为0.1~1.0mol/L时，专一地与D起反应，将D转变为只能与A配对的修饰碱基而引起碱基对的转换。 A．A B．T C．G D．C
7. 用NTG处理大肠杆菌群体，在叠氮化钠抗性突变型中出现较多的Leu和Ara突变型，说明B。
A.NTG对这几个基因作用有特异性 B.它们是突变的“热点” C. NTG使它们发生缺失 D.这几个基因是邻近的
8. 吖啶类染料和ICR类化合物主要引起C。
A．碱基置换 B．同义突变 C．移码突变 D．无声突变 9. 对细菌进行诱变育种时，其常用的细胞悬浮液浓度为B。 A．106个/ml B．108个/ml C．107个/ml D．109个/ml 10. 进行化学诱变时，其细胞悬浮液常使用C配制。
A．无菌水 B．无菌生理盐水 C．无菌缓冲液 D．无菌的培养基 二、填空(20分)
1. 1928年Griffith在肺炎链球菌中发现了转化；1944年Avary证明了DNA的化学本质是核酸。
2. 1946年Tatum和Lederberg报道了在大肠杆菌中采用营养缺陷型作为选择性标记，发现了细菌的基因重组现象。
3. 微生物作为遗传学研究材料的优越性在于代时短，易于获得纯培养，可在已知组分培养基上培养，快速获得多个个体，多数为单倍体，生化研究完全，其它（易于获得突变体，基因组较小等）。
4. 在基因符号书写时，一般应先写生化缺陷标记，然后是糖发酵标记和抗性突变，最后是像λ噬菌体一类附加体在细菌内的存在状况及细胞反应和抑制基因符号。 5. 从对遗传信息的改变来看，点突变中的碱基替代，可进一步分为同义突变、错义突变、无义突变；其中错义突变根据其表型变化又分为致死突变 、渗漏突变、中性突变；其中无义突变根据密码子变化的不同又分为三种类型分别为琥珀突变（UAG）、赭石突变（UAA）、乳白突变（UGA）。
6.中性突变连同同义突变一起被称为无声突变。
7. 基因突变的规律有不对应性、自发性、稀有性、独立性、诱发性、稳定性、可逆性。 8. 形成突变热点的主要原因为小型连续重复片段和5-甲基胞嘧啶的存在。 9. 表型延迟现象的原因为分离延迟和生理延迟。
10. 营养缺陷突变株的筛选一般要经过诱变剂处理、消除野生型、营养缺陷型的检出、营养缺陷型的鉴定四个环节；其中在第二个环节中常使用的方法有青霉素浓缩、菌丝过滤、差别杀菌法、饥饿法；第三个环节常使用的方法有逐个检出、夹层培养法、限量补给法、平板影印法；最后一个环节最常用的方法是生长谱法。 11. 抗性突变株的筛选常用梯度平板法。
12. 微生物育种常采用“进、通、截、堵、出”五字策略；常采用的措施有切断分支代谢途径，消除菌种自身反馈调节，增加前体物的合成，排出终产物，利用特殊调节机制。 13. 诱变育种工作中应考虑的原则包括选择优良的原始菌株，制备单细胞悬液，选择简单有效的诱变剂，采用合适的诱变剂量，充分利用复合处理的协同作用，中间培养，创建与利用形态学、生理学与产量的相关性指标，设计及采用高效选择的方法或手段。 14. 在育种实践中，常以杀菌率来作诱变剂的相对剂量。
15. 在提高诱变率的基础上，既能扩大变异幅度，又能促使突变向正变方向的剂量，就是合适的剂量。
三、按基因符号与命名原则对下列符号进行解释(5分) trpAtrpB17 trp-46rfa ? uvrB hisG 46galT ?? Tn10 trpA: 色氨酸A基因座突变
trpB 17: 色氨酸B基因座17号位点突变 trp-46: 色氨酸未知基因座46号位点突变 rfa: 深度粗糙突变
? uvrB: 染色体uvrB基因座缺失 hisG 46：组氨酸G基因座46号位点突变
galT ?? Tn10：由于转座子Tn10转座导致galT(半乳糖发酵基因)座位突变 四、 写出下列表示每部分代表的含义，并根据基因型写出相应的表型(5分)
Escherichia coli As1.1017 F- trpB lacZ thi strA AB C D A-菌株名称 B-菌株编号 C-缺少F质粒 D-遗传标记
该菌株的表型为：缺少F质粒，色氨酸缺陷，半乳糖缺陷，硫胺素缺陷，链霉素抗性的大肠杆菌菌株。（或Trp-、Lac-、B1-、Strr E-coli菌株） 五、名词解释(20分)
1.Promoter up启动子上升突变：突变位点存在于启动子区域，能增强启动子对于转录的启动作用。
2.auxotroph营养缺陷型：野生型菌株由于发生基因突变，而丧失合成一种或几种生长因子的能力，因而无法在基本培养基上正常生长繁殖的变异类型。
3.transposable elements转座元件：原核或真核细胞基因组中可以从一个位置转移到另一个位置的遗传因子。
4.mutator genes增变基因：生物体内有些基因与整个基因组的突变率直接相关，当这些基因突变时，整个基因组的突变率明显增高。
5.photoreactivation 光复活：可见光对紫外线的杀菌或诱变作用的修复过程
6.W-reactivationW–复活：经紫外线照射的λ噬菌体感染的E.coli由于大部分的噬菌体已经被杀死，不具有感染活性，而存活下来的噬菌体出现许多突变。如果把经紫外线照射的噬菌体感染用低剂量的紫外线照射的E.coli，存活的噬菌体数量大为增加，同时突变的噬菌体数目也增加。
7.Amest testAmes实验：1975年，美国学者Ames发明的能够利用微生物来检测药物致癌性的试验方法，同时支持了致癌物质是诱变剂的说法。 8.mutat on rate突变率：微生物在某一段时间内的突变速率。
9.SOS reactionSOS 应答：在细胞内存在一种应答系统，这种应答依赖于某些蛋白质的诱导合成，它是细胞内的一种新的修复机制。
10.leaky mutation渗漏突变：由于DNA的碱基置换造成氨基酸密码子改变，只是蛋白质只具有部分功能的基因突变。
六、在时间0时取3.00×105个细菌涂于培养皿上，立即喷上噬菌体T4，然后培养。另取同样的培养皿培养5小时(这时细菌数为3.07×108)，然后喷上噬菌体后培养，前一培养皿上不出现菌落，而后一培养皿上出现307个菌落，计算突变率。(5分)
七、 有三只斜面菌种，一只为Strr菌株，一只为Strs菌株，一只为Strd菌株，但现在三只菌种管上均无标签，请你设法通过实验，为它们贴上标签。(5分)