课后训练
一、选择题
1．使用凝胶色谱法分离蛋白质实验中，相对分子质量不同的蛋白质在凝胶中的行进过程，可表示为图中（ ）。
2．关于凝胶色谱柱的装填，除哪项外均为正确解释（ ）。
A．交联葡聚糖凝胶（Sephadx G75）“G”表示凝胶的交联程度、膨胀程度及分离范围，75表示凝胶得水值
B．色谱柱内不能有气泡存在，一旦发现有气泡，必须重装
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C．用300 mL物质的量浓度为20 mmol·L1的磷酸缓冲液充分洗涤平衡凝胶12 h D．凝胶用自来水充分溶胀后，配成凝胶悬浮液
3．下列对在凝胶柱上加入样品和洗脱的操作，不正确的是（ ）。 A．加样前要使柱内凝胶面上的缓冲液下降到与凝胶面平齐
B．让吸管管口沿管壁环绕移动，贴壁加样至色谱柱顶端，不要破坏凝胶面
C．打开下端出口，待样品完全进入凝胶层后，直接连接缓冲液洗脱瓶开始洗脱 D．待红色的蛋白质接近色谱柱底端时，每5 mL收集一管，连续收集流出液
4．使用十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺电泳过程中，不同蛋白质的电泳迁移率完全取决于（ ）。
A．电荷的多少 B．分子的大小 C．肽链的多少 D．分子形状的差异 5．凝胶色谱分离法分离蛋白质时，凝胶的种类较多，但其作用的共同点是（ ）。 A．改变蛋白质分子通过凝胶时的路径
B．吸附一部分蛋白质，从而影响蛋白质分子的移动速度 C．将酶或细胞固定在凝胶中
D．与蛋白质分子进行化学反应，从而影响其移动速度
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6．将经处理破裂后的红细胞混合液以2 000 r·min1的速度离心10 min后，离心管中的溶液分为四层，从上到下的顺序依次是（ ）。
A．血红蛋白、甲苯层、脂溶性物质层、沉淀层 B．甲苯层、沉淀层、血红蛋白、脂溶性物质层 C．脂溶性物质层、血红蛋白、甲苯层、沉淀层 D．甲苯层、脂溶性物质层、血红蛋白、沉淀层 7．（2011·江苏南通期末）下列关于血红蛋白提取和分离实验中样品处理步骤的描述，正确的是（ ）。
A．红细胞的洗涤：加入蒸馏水，缓慢搅拌，低速短时间离心
B．血红蛋白的释放：加入生理盐水和甲苯，置于磁力搅拌器上充分搅拌
C．分离血红蛋白：将搅拌好的混合液离心、过滤后，用分液漏斗分离
D．透析：将血红蛋白溶液装入透析袋，置于pH为4.0的磷酸缓冲液中透析12 h 8．在血红蛋白的整个提取过程中，不断用磷酸缓冲液处理的目的是（ ）。 A．防止血红蛋白被氧化
B．血红蛋白是一种两性物质，需要酸中和 C．磷酸缓冲液会加速血红蛋白的提取过程
D．让血红蛋白处在稳定的pH范围内，维持其结构和功能 9．下面说法不正确的是（ ）。
A．在一定范围内，缓冲溶液能够抵制外界的酸和碱对溶液pH的影响，维持pH基本不变
B．缓冲溶液通常由1～2种缓冲剂溶解于水中配制而成 C．电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程 D．透析袋能使大分子自由进出，而将小分子保留在袋内
10．蛋白质的分离与纯化技术是蛋白质研究的重要技术。下列有关叙述不正确的是（ ）。
A．根据蛋白质分子不能透过半透膜的特性，可将样品中各种不同的蛋白质分离 B．根据蛋白质所带电荷性质的差异及分子大小等，可通过电泳分离蛋白质 C．根据蛋白质相对分子质量的大小，可通过凝胶色谱法分离蛋白质 D．根据蛋白质的分子大小、密度不同，可通过离心沉降法分离蛋白质 二、非选择题 11．测定蛋白质的相对分子质量是研究蛋白质的一项重要技术。常用的测定方法是凝胶色谱法。请回答下列问题。
（1）凝胶色谱法的原理是_____________________________________________________。
（2）还有同学将大肠杆菌破碎并提取得到大肠杆菌蛋白质，一同学利用琼脂糖凝胶电泳技术将得到的蛋白质进行分离，在电泳过程中，影响蛋白质迁移速度的因素包括蛋白质分子的__________，分子的大小、形状等。而另一位同学则利用凝胶过滤法分离蛋白质。待蛋白质接近凝胶色谱柱底端时，用试管连续收集流出液。先收集到的蛋白质与后收集到的蛋白质的区别是_____________________________________________________________________。
12．凝胶色谱技术是20世纪60年代初发展起来的一种快速而又简单的分离技术，由于设备简单、操作方便，不需要有机溶剂，对高分子物质有很高的分离效果，目前已经被广泛应用于多个领域，请回答问题。
（1）若选用Sephadex G100，则G表示__________________________________________。 （2）通过凝胶色谱法可将从红细胞中分离出的血红蛋白样品进一步________，在血红蛋白的提取和分离实验中有以下操作，试回答：
①实验时要对采集到的血液中的红细胞进行洗涤，洗涤的目的是________。 ②在________的作用下，红细胞会破裂释放出血红蛋白。
③将释放出的血红蛋白收集到透析袋中透析，这是样品的________，而透析的目的是________________________________________________________________________。
④实验最后经过SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳进行________。
（3）装填凝胶色谱柱时，要注意色谱柱内不能有气泡存在，一旦发现气泡必须重装。这是因为_________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。
13．随着人类基因组计划的进展以及多种生物基因测序工作的完成，人类跨入了蛋白质时代。对蛋白质的研究和应用，首先需要获得高纯度的蛋白质。请回答下列问题。
（1）蛋白质的提取和分离一般分为四步：__________、__________、__________和纯度鉴定。
（2）如果要从红细胞中分离出血红蛋白，实验前取新鲜血液要在采血容器中预先加入柠檬酸钠，这样做的目的是
__________________________________________________________。
（3）血红蛋白的提取又可以细分为：红细胞的洗涤、__________、分离血红蛋白溶液和__________。其中分离血红蛋白溶液时需要用到__________（仪器）分出下层的红色透明液体。