（4）洗脱：开启输液泵，按适当流速输入展开剂。
（5）收集：按一定ml数或依据色带（可见或紫外）分部收集。 （6）鉴定：洗脱液TLC鉴定，相同斑点合并，浓缩结晶。 4、例（P137）
人参叶提取物经硅胶柱层析分离后，得到收集流份，某流份经TLC检查，出现4个斑点。
此混合物250mg溶于1ml展开剂及2ml乙醇中
展开剂：n-BuOH：CHCl3：MeOH：H2O（40：20：15：20），流速为1.7ml / min。TLC板：硅胶GF25435g + 0.5CMC-Na 75ml，90。C活化3h 收集流份25份（5~6ml/份）：流份5——人参皂苷Rb2 流份9~11——人参皂苷Rc 流份15~17——20-glc人参皂苷Rf 流份19~23——人参皂苷Rd
（六）离心液相色谱法（CLC）
CLC是在离心TLC的基础上发展起来的一种制备分离技术。 1、特点
a) 不用预制板，制板体积固定。
b) 载量大，厚度可达1cm，厚度均匀，分离效果好，制备量大于CTLC。 c) 填充剂可用多种分离材料：硅胶、氧化铝、聚酰胺、凝胶、离子交
换树脂。扩大了使用范围。
d) 与柱层相比，因引进了离心，所以分离速度快，效果好。
2、仪器
（1）控制器：调节转速（由此控制流速），分离时间，收集时间。 （2）洗脱器：进样，注入展开剂。有进样通道，展开通道。
（3）分离盘：由底盘、垫圈、盘盖、柱芯、旋盖组成，由垫圈的不同规格，控制装填厚度。注入吸附剂，在离心作用下，圆盘封闭体系内逐渐被分离材料充满，形成一定厚度的平整涂层。 （4）分部收集器 3、操作
（1）制备填充剂
硅胶填料的用量 垫圈规格 防漏层硅胶（g） 铺板用硅胶（g） 调糊用溶剂（ml） 3mm 8 80 450 5mm 12 120 600 10mm 16 160 1000
（2）填装防漏层 （3）装填填充剂 （4）进样、洗脱
（5）收集、鉴定：分部收集器收集，TLC鉴定，洗脱液处理同常法。 4、实例（P141）
红秦艽MeOH提取物，上样量200mg，60g硅胶G制板，板厚2mm，转速300转/min。展开剂Pet：四氢呋喃：MeOH（100：10：3），分离时间1h，得丹参酮IIA，丹参酸甲酯，丹参酮I。
（七）电泳
1937年开始，现在中药成分研究中，成功地用于生物碱、有机酸、氨基酸、蛋白质的分离、鉴定。 1、原理
带电荷的化合物在电场作用下产生定向移动，由于混合物中各组分所带电荷性质（+、—）、数量、强度及分子量不同，各组分移动的方向及速度均不相同，从而达到分离。 2、电泳速度的影响因素
电泳速度cm2/秒/伏=电子迁移率 a、分子的性质，离子态，电泳速度快。
极性基团多，电泳速度快，在电场作用下，发生极化，产生电性。 b、电场强度（电位降/cm），电场强度高，电泳速度快。 c、溶液离子强度：介质（缓冲液），离子强度高，成分移动慢。 d、电渗（液体对于支持体的相对移动）
支持物的极性基团在电场作用下产生电性，支持物上的溶液产生相反的电性，这样，影响到各个组分的电泳速度。此外，缓冲液黏度、温度也有一定的影
响。
3、纸电泳（简单、易行）
（1）装置：稳压器，电极，缓冲液槽
（2）缓冲液的选择：离子强度0.02~0.2，控制电泳速度恒定。 （3）点样：点状或带状，点在滤纸中央。
点样后纸两端浸入缓冲液，至距样品4~5cm取出，让缓冲液扩散至样品。 （4）电泳：点好样的滤纸放在支架上，二端下垂浸入缓冲液槽中，通电流。 一般电场强度为10伏/cm，电泳2h （5）显色：同一般PC
（6）作用：了解各组分酸碱性及强弱，再针对性地提取、分离。
纸电泳谱位及判断
缓冲液 正极 负极 结果判断
酸性缓冲液 ▓ 中性成分
碱性缓冲液 ▓
酸性缓冲液 ▓ 中性成分
碱性缓冲液 ▓
酸性缓冲液 ▓ 弱碱性成分
碱性缓冲液 ▓
酸性缓冲液 ▓ 强碱性成分
碱性缓冲液 ▓
酸性缓冲液 ▓ 弱酸性成分
碱性缓冲液 ▓
酸性缓冲液 ▓ 强酸性成分
碱性缓冲液 ▓
酸性缓冲液 ▓ 两性成分
碱性缓冲液 ▓
4、琼脂板电泳
以琼脂板为支持物的一种凝胶电泳。
制板 点样 电泳 染色