微生物的培养与应用测试题（附解析）
一、基础题点练
1．关于实验室培养和纯化大肠杆菌过程中的部分操作，下列说法正确的是( ) A．配培养基、倒平板、接种需要在酒精灯火焰旁进行 B．倒平板时，倒入的培养基冷却后盖上培养皿的皿盖 C．划线接种时，灼烧接种环后立即进行再次划线 D．划线接种结束后，需将平板倒置后放入培养箱中培养
解析：选D 倒平板、接种需要在酒精灯火焰旁进行，而配培养基不需要在酒精灯火焰旁进行；倒入培养基后立即盖上培养皿的皿盖，冷却后将平板倒过来放置；划线接种时，灼烧接种环后要等待其冷却后才能进行再次划线；划线接种结束后，需将平板倒置后放入培养箱中培养。
2．下列有关微生物分离、纯化及计数的叙述，错误的是( ) A．常用富含纤维素的培养基富集培养纤维素分解菌 B．平板划线法通过连续划线将聚集的菌种分散并计数 C．稀释涂布平板法通过系列梯度稀释可将微生物分散
D．用血细胞计数板计数微生物时，实验结果往往比稀释涂布平板法得到的结果偏大 解析：选B 纤维素是纤维素分解菌的碳源，因此常用富含纤维素的培养基富集培养纤维素分解菌；平板划线法通过连续划线将聚集的菌种分散，但不能用于微生物的计数；稀释涂布平板法通过系列梯度稀释可将微生物分散并计数；用血细胞计数板计数微生物时，会将死的微生物计数在内，因此导致实验结果往往偏大。
3．以下关于分离纤维素分解菌的实验操作错误的是( ) A．经选择培养后将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 B．选择培养这一步可省略，但得到的纤维素分解菌会较少
C．可通过定时测定葡萄糖产量的变化来衡量纤维素分解菌培养液中的纤维素酶产量 D．对照组可用等量的纤维素分解菌培养液涂布到含纤维素的培养基上
解析：选A 经选择培养后，再经梯度稀释，才能将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上；富集培养可省略，但培养分离的纤维素分解菌较少；纤维素酶的测定方法一般是采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量的测定；实验组和对照组遵循单一变量原则，对照组可用等量的纤维素分解菌培养液涂布到含纤维素的培养基上，设置对照组能证明经“浓缩”培养的确得到了欲分离的微生物。
4．下表表示某培养基的配方，下列叙述正确的是( )
成分 含量 蛋白胨 10 g 葡萄糖 10 g KH2PO4 2 g 伊红 美蓝 蒸馏水 1 000 mL 0.4 g 0.065 g 1
A．从物理性质看该培养基属于液体培养基，从用途看该培养基属于选择培养基 B．培养基中属于碳源的物质主要是葡萄糖，属于氮源的物质是蛋白胨 C．该培养基缺少提供生长因子的物质 D．该培养基调节合适的pH后就可以接种
解析：选B 从物理性质看该培养基属于液体培养基，从用途看该培养基属于鉴别培养基；微生物的营养物质主要包括氮源、碳源、水和无机盐等，培养基中属于碳源的物质主要是葡萄糖，属于氮源的物质是蛋白胨；生长因子主要包括维生素、氨基酸和碱基等，它们一般是酶和核酸的组成成分，蛋白胨可以提供生长因子；该培养基调节合适的pH后还需经灭菌后才可以接种使用。
5.如图是微生物平板划线示意图，划线的顺序为1→2→3→4→5，下列说法正确的是( )
A．操作前要将接种环用酒精消毒 B．划线操作须在酒精灯火焰上方进行 C．只有在5区才可以得到所需菌落
D．在12345区域中划线前后都要对接种环灭菌
解析：选D 在每次划线前后都要对接种环进行灭菌，接种环的灭菌方法应是在酒精灯火焰上灼烧，不能用酒精消毒；接种时划线操作是在酒精灯火焰附近进行；在5个区域中，只要有单个活细菌，通过培养即可获得所需菌落；每次划线前都要灼烧接种环，目的是杀死接种环上原有的微生物(第一次划线前)和上次划线结束后接种环上残留的菌种，使每次划线的菌种都来自上一次划线的末端，划线结束后灼烧接种环以防止污染环境和感染操作者。
6．取9个洁净培养皿，均分为三组(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)，各组分别加入等量的不同培养基，每个平板均用涂布法接种0.1 mL大肠杆菌菌液，37 ℃培养36 h后，统计 菌落数(见表)，以下相关叙述正确的是( )
组别 各平板的菌落数 1 Ⅰ Ⅱ Ⅲ A．Ⅰ组和Ⅱ组说明维生素可以促进大肠杆菌生长 B．Ⅰ组和Ⅲ组说明大肠杆菌正常生长需要糖类物质 C．三组实验均使用了液体培养基，以方便菌落计数
2
培养基 2 琼脂、C6H12O6、NH4NO3 琼脂、C6H12O6、NH4NO3、维生素 琼脂、NH4NO3、维生素 3 30 169 0 31 178 0 27 193 1 D．三组实验所使用的培养基均需62 ℃、30 min消毒
解析：选A 由表格分析可知：Ⅰ组和Ⅱ组说明维生素可以促进大肠杆菌生长；Ⅱ组和Ⅲ组作对照，自变量是葡萄糖的有无，说明大肠杆菌正常生长需要葡萄糖；由题意知：每个平板都含有琼脂，属于固体培养基；三组实验所使用的培养基均需高压蒸汽灭菌。
二、高考题型练
7．(2019·西安一模)环境污染物多聚联苯难以降解，受到多聚联苯污染的土壤中，常有重金属污染同时存在。研究发现联苯降解菌内的联苯水解酶是催化多聚联苯降解的关键酶。为了从富含多聚联苯的环境中分离联苯降解菌，某同学设计了甲、乙两种培养基(成分见表)：
培养基甲 培养基乙
注：＋表示添加该物质，－表示没有添加该物质
(1)甲培养基中加入多聚联苯作为________用于培养联苯降解菌，该培养基属于________(填“选择”或“鉴别”)培养基。接种前需对甲培养基采用________________法进行灭菌。
(2)培养基乙________(填“能”或“不能”)用于测定联苯降解菌的数量，原因是__________________________________________________________。统计联苯降解菌数量时，应进行多组实验，再________。
(3)联苯降解菌在实验室里的降解率很高，但是实际污染环境的治理中降解率很低，这可能是因为________________________________(答出一种可能即可)。
解析：(1)分析表格，甲培养基中加入多聚联苯作为唯一碳源用于培养联苯降解菌，因此该培养基属于选择培养基。接种前需对甲培养基采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。(2)培养基乙没有加入琼脂，属于液体培养基，可以在其中培养联苯降解菌，采用显微计数法测量联苯降解菌数量。统计联苯降解菌数量时，应进行多组实验，再取平均值。(3)联苯降解菌在实验室里的降解率很高，但是实际污染环境的治理中降解率很低，这可能是因为实际污染环境中多聚联苯不是唯一碳源或其他污染物(如重金属)等导致联苯水解酶的数量或活性降低。
答案：(1)碳源 选择 高压蒸汽灭菌 (2)能 培养基乙为液体培养基，可以在其中培养联苯降解菌，采用显微计数法测量联苯降解菌数量 取平均值 (3)实际污染环境中多聚联苯不是唯一碳源或其他污染物(如重金属)等导致联苯水解酶的数量或活性降低(意思接近即可)
8．(2019·瑞金模拟)常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖进行酒精发酵，自然界中某些酵母菌能分解木糖产生酒精，科学家欲从果园的葡萄上或土壤中分离这种酵母
3
维生素 ＋ ＋ NH4NO3 ＋ ＋ MgCl2 ＋ ＋ 多聚联苯 ＋ ＋ 水 ＋ ＋ 琼脂 ＋ －