H9亚型禽流感病毒和鸭坦布苏病毒二重PCR检测方法的
建立
作者：赵虹;谢芝勋;谢丽基;刘加波;邓显文;谢志勤;庞耀珊;范晴;罗思思
作者机构：广西大学动物科学技术学院,广西南宁530004;广西壮族自治区兽医研究所,广西畜禽疫苗新技术重点实验室,广西南宁 530001;广西壮族自治区兽医研究所,广西畜禽疫苗新技术重点实验室,广西南宁 530001;广西壮族自治区兽医研究所,广西畜禽疫苗新技术重点实验室,广西南宁 530001;广西壮族自治区兽医研究所,广西畜禽疫苗新技术重点实验室,广西南宁 530001;广西壮族自治区兽医研究所,广西畜禽疫苗新技术重点实验室,广西南宁 530001;广西壮族自治区兽医研究所,广西畜禽疫苗新技术重点实验室,广西南宁 530001;广西壮族自治区兽医研究所,广西畜禽疫苗新技术重点实验室,广西南宁 530001;广西壮族自治区兽医研究所,广西畜禽疫苗新技术重点实验室,广西南宁 530001 来源：中国畜牧兽医 ISSN：1671-7236 年：2014 卷：041 期：010 页码：43-47 页数：5 中图分类：Q78 正文语种：chi
关键词：H9亚型禽流感病毒;鸭坦布苏病毒;二重PCR
摘要：本试验旨在建立一种能同时快速检测H9亚型禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)和鸭坦布苏病毒(duck Tem-busu virus,DTMUV)的二重PCR检测方法.根据GenBank中H9亚型AIV的HA基因和DTMUV的NS2基因序列,分别设计了1对针对H9亚型AIV和DTMUV保守基因序列的引物.
利用这2对引物对混有H9亚型AIV和DTMUV的cDNA模板进行二重PCR扩增,得到了2个大小与试验设计相符的特异性扩增条带.利用本试验建立的二重PCR对其他鸭病病原体进行PCR扩增,结果均为阴性.利用这2对引物对H9亚型AIV和DTMUV进行敏感性检测,结果显示最低检测极限分别为6.3和6.6 pg.对临床235份样品检测的结果表明该二重PCR检测方法具有快速、敏感、特异等优点,适用于临床检测的应用.