姓名:宋亚飞学号?/p>
159310006
专业:养殖(专硕?/p>
1
通常植物组织培养所用培养基构成要素包括哪些?/p>
2
植物组织培养中常用的消毒剂,请列?/p>
4
个以上?/p>
3
植物组织培养一般需要注意哪些培养条件?/p>
1
答:
1.
无机营养物无机营养物主要由大量元素和微量元素两部分组成大量元素主要包括氮?/p>
磷?/p>
钾?/p>
钙?/p>
镁和硫六种氮源通常有硝态氮或铵态氮但在培养基中用硝态氮的较多也有将?/p>
态氮和铵态氮混合使用的?/p>
磷和硫则常用磷酸盐和硫酸盐来提供?/p>
钾是培养基中主要的阳?/p>
子在近代的培养基中其数量有逐渐提高的趋势。而钙、钠、镁的需要则较少?/p>
培养基所需?/p>
钠和氯化物由钙盐?/p>
磷酸盐或微量营养物提供?/p>
微量元素包括碘?/p>
锰?/p>
锌?/p>
钼?/p>
铜?/p>
钴和?/p>
?/p>
些元素有的对生命活动的某个过程十分有用有的对蛋白质或酶的生物活性十分重要有的是
参与某些生物过程的调节。培养基中的铁离子大多以螯合铁的形式存在?/p>
FeSO4
?/p>
Na2
?/p>
EDTA
螯合剂的混合?/p>
2.
碳源培养的植物组织或细胞它们的光合作用较弱。因此需要在培养
基中附加一些碳水化合物以供需要。培养基中的碳水化合物通常是蔗糖或
D-
葡萄糖用量?/p>
常为
2-4
高者可?/p>
5
亦可用市售的白糖所代替但一般应增加用量而且最好用比较固定的厂?/p>
生产的产品以保证实验的稳定性?/p>
3.
有机营养成分包括人工合成或天然的有机附加物包括维
生素氨基酸及其它有机物质等。最常用的有酪朊水解物水解乳蛋白、水解酪蛋白
CH
、酵?/p>
提取物?/p>
玉米胚乳?/p>
麦芽浸出物?/p>
西红柿汁?/p>
椰子?/p>
CM
及各种氨基酸如甘氨酸氨基乙酸等?/p>
维生素在培养基中加入维生素常有利于外植体的发育?/p>
培养基中的维生素属于
B
族维生素?/p>
中效果最佳的有硫氨素组织培养中使用的赤霉素只有一种即赤霉?/p>
GA3
?/p>
虽然已经用于顶端
分生组织的培养和维管分化的研究但在培养基中很少添加因为它的作用往往是负面的?/p>
乙烯
等?/p>
5.
琼脂或其他支持物
除液体悬浮培养外就目前情况而言琼脂是一种极为理想的支持物?/p>
一般浓?/p>
0.4-1
质量越差的琼脂用量越大。琼脂作为培养基的支持物使培养基呈固体状态以
利于各种外植体的培养?/p>
6.
其他添加剂含天然提取物、抗生素?/p>
活性炭
渗透调节剂
抗生
?/p>
抗氧化剂等?/p>
活性炭加入培养基中的目的主要是利用其吸附能力减少一些有害物质的?/p>
响例如防止酚类物质污染而引起组织褐化死亡?/p>
这在兰花组织培养中效果更明显?/p>
另外活?/p>
炭使培养基变黑有利于某些植物生根?/p>
但活性炭对物质吸附无选择性既吸附有害物质也吸?/p>
有利物质因此使用时应慎重考虑不能过量一般用量为
1
?/p>
5
。活性炭对形态发生和器官形成
有良好的效应?/p>
在失去胚状体发生能力的胡萝卜悬浮培养细胞中加?/p>
1
一
4
活性炭可使胚状
体的发生能力得以恢复?/p>
7.
?/p>
水是植物原生质体的组成成分也是一切代谢过程的介质和溶
媒?/p>
配制培养基母液时要用蒸馏水以保持母液及培养基成分的精确性防止储藏过程发霉变质?/p>
大规模生产时可用自来水。但在少量研究上尽量用蒸馏水以防成分的变化引起不良效
果?/p>
8.pH
培养基的
pH
因培养材料不同而异大多数植物都要求?/p>
pH5.6
?/p>
5.8
的条件下进行
组织培养。常?/p>
0.1mol/L
?/p>
Na0H
?/p>
0.1mol/L
?/p>
HCl
来调节培养基?/p>
PH
?/p>
2
答:外植体在接种之前
,
须经严格地灭?/p>
.
由于灭菌剂的种类不同
,
杀菌力不同
,
因此选择?/p>
毒剂
,
既要考虑具有良好的消毒杀菌作?/p>
,
同时又易被蒸馏水冲洗掉或能自行分解的物质
,
?/p>
不会损伤或只轻微损伤组织材料而不影响生长
.
在使用不同的药剂?/p>
,
需要考虑使用浓度?/p>
处理时间
.
现将常用的消毒剂列于下表
?/p>
.
常用消毒?/p>
其中
70%
?/p>
75%
酒精具有较强的杀菌力、穿透力和湿润作?/p>
,
可排除材料上的空?/p>
,
利于其他
消毒剂的渗入
,
因此常与其他消毒剂配合使?/p>
.
由于酒精穿透力?/p>
,
应严格掌握好处理时间
,
?/p>
间太长会引起处理材料的损?/p>
.