编辑?/p>
word
实验报告
课程名称?/p>
生物化学实验
(丙?/p>
指导老师?/p>
方祥?/p>
成绩?/p>
__________________
实验名称?/p>
蔗糖酶蛋白含量的测定、蔗糖酶活力测定及其分离纯化效果的评?/p>
同组学生姓名?/p>
金宇尊、鲍其琛、袁平、朱耀仁、蔡玉林
一、实验目的和要求(必填)
二、实验内容和原理(必填)
三、实验材料与试剂(必填)
四、实验器材与仪器(必填)
五、操作方法和实验步骤(必填)
六、实验数据记录和处理
七、实验结果与分析(必填)
八、讨论、心?/p>
一、实验目的和要求
1
、蔗糖酶蛋白含量的测定—?/p>
Folin-
酚法
①学?/p>
Folin-
酚法测定蛋白质含量的原理和方法;
②掌握分光光度法制作标准曲线,准确测定未知样品的蛋白质含量;
③掌握分光光度计的使用方法?/p>
2
?/p>
蔗糖酶活力测定—?/p>
3.5
-二硝基水杨酸法
①掌握酶活力测定的基本原理和方法?/p>
②学习酶的比活力的计算?/p>
二?/p>
实验内容和原?/p>
1
?/p>
Folin-
酚测定法
Folin-
酚试剂是由甲、乙两种试剂组成的。甲试剂由碳酸钠、氢氧化钠、硫酸铜和酒石酸钾钠组成,在
碱性条件下蛋白质中的肽键与酒石酸钾钠铜盐起作用?/p>
生成紫红色络合物?/p>
乙试剂是由磷钼酸和磷钨酸?/p>
硫酸、溴等组成,在碱性条件下,铜
-
蛋白质络合物以及蛋白质中的酪氨酸残基(酚基)和色氨酸还原
磷钼?/p>
-
磷钨酸试剂(乙试剂)产生深蓝色(钼蓝和钨蓝的混合物)
,其色泽深浅与蛋白质含量成正比?/p>
可用
500nm
波长比色测定,适于测定蛋白质含?/p>
0.05
?/p>
0.5g/L
?/p>
优点?/p>
简单、迅速、灵敏度高;反应较稳定?/p>
缺点?/p>
该反应受多种因素的干扰?/p>
2
?/p>
蔗糖酶活力测?/p>
蔗糖酶(β
-D-
呋喃型果糖苷
-
果糖水解?/p>
EC 3.2.1.26
?/p>
,是一种水解酶。它能催化非还原性双糖(蔗糖?/p>
?/p>
1,2
-糖苷键裂解,将蔗糖水解为等量的葡萄糖和果糖(还原糖?/p>
。因此,每水?/p>
1mol
蔗糖,就能生
?/p>
2mol
还原糖。还原糖的测定有多种方法,例如:纳尔逊-索模吉试剂比色法,斐林试剂法等?/p>
专业?/p>
农业资源与环?/p>
姓名?/p>
李佳?/p>
学号?/p>
3130100246
日期?/p>
2015.5. 26
地点?/p>
生物实验中心
310
?/p>
?/p>
?