BCA
蛋白浓度测定
Pierce
®
BCA Protein Assay Kit
(
试剂盒室温保?/p>
)
1.
准备
BSA
标准?/p>
?/p>
Table 1
配制一系列的蛋白标准品
.

原液
(stock)
:
取出一?/p>
ample(
内含
2mg/mL
的白蛋白标准?/p>
(
此量足够
3
?/p>
replication)
2.
准备
BCA
工作?/p>
(Working Reagent,WR)
(1)
用公式计算总工作液?/p>
(
标准品数
+
待测样品?/p>
)*(
复制?/p>
)*(
每个工作液的?/p>
)=
总的需要的工作?/p>
的量
例子
:3
个待测样?/p>
,
每个样品
2
个复制所需的工作液?/p>
(9
个标准品
+3
个待测样?/p>
)*(2
个复制数
)*(2ml)=48ml
工作?/p>
Note:
试管?/p>
:
每个试管需
2ml
工作?/p>
微孔?/p>
:
每个孔需
200ul
工作?/p>
(
例子中需?/p>
4.8ml)
(2)BCA
试剂
A:B=50:1
配制适量
BCA
工作液,充分混匀?/p>
对于上面的例?/p>
,
试管法需?/p>
50ml BCA A
?/p>
+1ml BCA B
?/p>
,
微孔板法需
5ml A
?/p>
?/p>
1mlB
?/p>
.