分子生物学实验教材:
参考书?/p>
《分子克隆实验指南?/p>
(第三版?/p>
黄培?/p>
等译
科学出版?/p>
实验一﹑大肠杆菌感受态细胞的制备及转?/p>
一
.[
目的要求
]
通过本实验,掌握大肠杆菌感受态细胞的制备及转化的方法和技术?/p>
?/p>
.[
实验原理
]
细菌处于容易吸收外源
DNA
的状态叫感受态。转化是指质粒或以它为载体构建的?/p>
组子导入细菌的过程。细菌处?/p>
0
?/p>
C
?/p>
CaCl
2
低渗溶液中,细胞膨胀成球形,外源
DNA
附着于细胞表面,
?/p>
42
?/p>
C
短时间热击处理,促进细胞吸收
DNA
复合物?/p>
将细胞放置在?/p>
选择性培养基中保温一段时间,促使在转化过程中获得的新表型?/p>
Amp
+
得到表达,然?/p>
将此细菌培养物涂在选择性培养基上进行培养,从而获得转化子?/p>
?/p>
.[
教学内容
]
1.
感受态细胞的制备基础知识及方法简?/p>
2.CaCl
2
法制?/p>
DH5
?/p>
?/p>
JM109
感受态细胞,计算转化效率