流式细胞术检测淋巴细胞表面标?/p>
一、实验目?/p>
1.
了解流式细胞仪的组成、原理及应用:初步了解流式细胞仪的工作元件及基本应用
原理;能够认识流式细胞术的应用,特别是常用的一些功能?/p>
2.
熟悉用流式细胞术检测小鼠脾?/p>
T
细胞表面标志的基本流?/p>
3.
学习并掌握流式细胞术结果的分析:能够基本看懂结果图,重点掌握“门”和“补
偿”两个概念?/p>
二、实验原?/p>
1.
流式细胞术(
Flow
Cytometry,
简?/p>
FCM
)是一种可以快速、准确、客观,并且
同时检测单个微粒(通常是细胞)的多项特性(多参数)的技术,同时可以对特定群体加
以分选?/p>
特点:可检测的样本种类多样,大小范围较广(0.2~50µm?/p>
;检测速度快,分析样本
量大
(快速?/p>
大量?/p>
?/p>
细胞及细胞器或微粒的结构及功能不被破坏;
采用激光作为激发光源,
保证其具有更好的单色性与激发效率;利用荧光染料与单克隆抗体技术结合的标记技术,
保证检测的灵敏度和特异性;用计算机系统对流动的单细胞悬液中单个细胞的多个参数信
号进行数据处理分析,保证了检测速度
10000
个细?/p>
(
微粒
)/
秒与统计分析精确性?/p>
2.
流式细胞仪组成及原理