实验
标准曲线法测定罗丹明
B
的含?/p>
1
?/p>
实验目的
?/p>
1
)了解紫?/p>
-
可见分光光度计的结构及使用方法?/p>
?/p>
2
)掌握标准曲线法定量分析的技术,了解紫外可见光谱法进行纯组分?/p>
量分析的全过程?/p>
?/p>
3
)掌握不同浓度的配制和样品含量的计算?/p>
2
?/p>
实验原理
在有机化合物分子中有形成单键?/p>
σ
电子?/p>
有形成双键的
π
电子?/p>
有未成键
的孤?/p>
n
电子?/p>
当分子吸收一定能量的辐射能时?/p>
这些电子就会跃迁到较高的?/p>
级,
此时电子所占的轨道称为反键轨道?/p>
而这种电子跃迁同内部的结构有密切?/p>
关系?/p>
[3]
在紫外吸收光谱中,电子的跃迁?/p>
σ→?
?/p>
n→?
?/p>
π→π*
?/p>
n→π*
四种类型?/p>
各种跃迁类型所需要的能量依下列次序减小:
σ→?>n→?>π→π*>n→π*
跃迁类型
吸收?/p>
λm
ax/nm
特征
典型基团
εmax
σ→?
?/p>
紫外?/p>
150
远紫外区测定
C-C
?/p>
C-H
(在紫外光区观测?/p>
到)
n→?
?/p>
吸收
150
~
230
紫外区短波长端至
远紫外区的强吸收
-OH
?/p>
-NH
?/p>
?/p>
-X
?/p>
-S
π→π*
E1
?/p>
<
190
芳香环的双键吸收
(-
C=C-C=C
-)
n
>200
K(E2)
?/p>
<
217
共轭多烯?/p>
-C=C-C=O-
等的吸收
>10,000
n→π*
R
?/p>
200~400
?/p>
CO
?/p>
NO
2
?/p>
n
?/p>
子基团的吸收
C=O
?/p>
C=S
、-
N=O
、-
N=N
-?/p>
C=N
<100
由于一般紫外可见分光光度计只能提供
190
?/p>
850nm
范围的单色光,因此,
我们只能测量
n→?
的跃迁,
n→π*
跃迁和部?/p>
π→π*
跃迁的吸收,
而对只能产生
200nm
以下吸收?/p>
σ→?
的跃迁则无法测量?/p>
紫外吸收光谱是带状光谱,分子中存在一些吸收带已被确认,其中有
K
带?/p>
R
带?/p>
B
带?/p>
E1
?/p>
E2
带等?/p>
K
带是二个或二个以?/p>
π
键共轭时?/p>
π
电子?/p>
π *
反键轨道跃迁的结果,?/p>
简单表示为
π→π *
?/p>
R
带是与双键相连接的杂原子(例?/p>
C=O
?/p>
C=N
?/p>
S=O
等)上未成键电子
的孤对电子向
π *
反键轨道跃迁的结果,可简单表示为
n→π *
?/p>