红细胞裂解液的配?/p>
我在一个公司的网站上看到的红细胞裂解液的说明书上说操作要点是:
1.
?/p>
37
度预热;
2.
充分混匀细胞我就是这样做的,
效果还可以?/p>
不过我只做流式细胞仪的检测,活性没测。我
的裂解液?/p>
0.16M NH4Cl
?/p>
0.13mM EDTA
?/p>
12mM NaHCO3
我用的方法:
全血?/p>
裂解?/p>
=1
?/p>
3
?/p>
?/p>
2ml
的全血加上
6ml
的红细胞裂解液,
充分混匀后,
室温静置
5mim
?/p>
1000rpm
离心
6~10min
。红细胞裂解得非常充分?/p>
0.15 M NH4CL, 0.01 M NaHCO3 and 1 mM EDTA (Sigma)
Ammonium chloride (NH4Cl) 8.29 g 0.155 M
Potassium bicarbonate (KHCO3) 1 g 10mM
EDTA 0.37 g 1mM
H2O 1l.
Filter with 0.45µ
m filter
aliquot in 100 ml aliquots
filter the solution to be used with 0.2µ
m filter.
我们用的?/p>
Tris-NH4Cl,
具体配方如下
:
NH4Cl:4.15
克加双蒸?/p>
500ml,
?/p>
450ml;
Tris:1.0297
克加双蒸?/p>
50ml,
再加上上面的
450ml,
共计
500ml,
高压灭菌
,
用时?/p>
10-20ml,
静置
5min,
效果蛮好
.
9
?/p>
29
日我用的配方