饱和硫酸铵溶液的配制
①在
25
℃下,硫酸铵溶液由初浓度调到终浓度时,每升溶液所加固体硫酸铵的克数?/p>
1
?/p>
?2
?/p>
?
调整硫酸铵溶液饱和度计算表(
0
℃)
①在
0
℃下,硫酸铵溶液由初浓度调到终浓度时,每
100
毫升溶液所加固体硫酸铵的克数?/p>
25
℃下
100%
硫酸铵是
1L
水中约加
780g
硫酸铵。可以在加进去之后,用微波炉加热?/p>
溶解为止,然后放置在过夜,第二天就会有晶体析出,这就可以了?/p>
双蒸水中加入过量硫酸铵,热至
50
?/p>
60
度保温数分钟,趁热滤出沉淀,在
0
度或
25
度平?/p>
1
?/p>
2
天,有固体析出时即达
100
%饱和度,以氨水调节
PH
值至
7.0
?/p>
硫酸铵在水中的溶解度?/p>
100
度时?/p>
1.034g/ml
?/p>
0
度时?/p>
0.706g/ml
。因此,?/p>
100ml
蒸馏水加
90gAR
级结晶硫酸铵?/p>
80
度溶解,趁热过滤,降至室温后即有结晶析出,应任其
留存瓶中,使用前吸出所需的量,用
28%
的氨水调
PH
?/p>
7.2
即可。结晶(要留着,随着?/p>
度变化,
溶解度也会变化,
你总要保证溶液中是饱和的,
所以结晶留在瓶底,
不需要再过滤?/p>
使用时取上面的溶液即可?/p>
pH7.0
?/p>
7.2
影响不大,也有调?/p>
7.4
的,因为最后沉淀的蛋?/p>
一般都是用
PBS
稀释的?/p>
?/p>
最方便的就?/p>
500ml
水加半瓶
250g
硫酸铵剧烈搅拌,上层澄清的就是饱和的了?/p>
另外较快达到饱和状态的方法是,
将过量的硫酸?/p>
(参考不同温度下的溶解大多数?/p>
?/p>
干脆多加点)放在水浴箱内高温溶解,取出致室温放置至其平衡(会有硫酸铵重新析出?/p>
?/p>
上清即为室温下的饱和硫酸?/p>
先将硫酸?/p>
80
克溶解到
100
水中,加热到
80
左右?/p>
溶解部分过滤?/p>
其余的再溶,仍有
一部分结晶?/p>
过滤的溶液当降到室温的时候就会有结晶?/p>
平衡一两天?/p>
取上清用同时氨水?/p>
?/p>
PH
值用?/p>
硫酸铵沉淀主要分为两种形式?/p>
1.
将事先配好的饱和硫酸铵溶液加入目标溶液中,这种方法精确度高,硫酸铵是弱酸?/p>
的,事先调好
pH
后,再补入溶液中
pH
变化小,适合于对
pH
敏感的蛋白(酶类)或要求
比较高的实验?/p>
2.
直接将固体硫酸铵补入目标溶液中,这种方法比较快速,但是加入后溶?/p>
pH
值会?/p>
一定程度的降低,适合于对
pH
不敏感的蛋白,这种操作应该能满足一般实验的要求?/p>