实验一
TLC
铺板、干燥、活化、色谱用硅胶柱的填装
1
.硅胶薄层色谱板的制备、干燥和活化
薄层色谱中的吸附剂是铺在玻璃?/p>
塑料或金属片或薄板上的较薄的?/p>
均匀的一层细粉状
物质?/p>
因支持剂的种类?/p>
制备方法和选用溶剂的不同,可按吸附?/p>
分配或二者结合的方式?/p>
到分离化合物的目的。可以通过比较斑点?/p>
R
f
值,或将未知样品与对照品在同一板上展开
至同样高度,
对样品进行初步的鉴定?/p>
还可通过比较可见斑点的大小进行半定量的判断?/p>
?/p>
可以通过光密度测量法实现定量测定?/p>
TLC
中涂布的物质与柱色谱用的吸附剂非常相似,如硅胶、氧化铝、聚酰胺等,只是
它们的颗粒更细一些,一般直径为
5
?/p>
40
μ
m
。有些还含有石膏、淀粉等粘合剂以增强涂层
与薄板的粘合力?/p>
有时里面还含有荧光指示剂
(
如硅酸锌?/p>
)
?/p>
?/p>
254
?/p>
365nm
的紫外光下能
显示荧光,可借此对分离的斑点进行检测。到目前为止,硅胶是最常用的薄层色谱吸附剂?/p>
在涂布吸附剂时,
用于排列和放置薄板的排列盘和具有平整表面的薄板是必需的?/p>
而涂
布器也很常用,当它从玻璃板上移过时,会在板的表面均匀铺上所需厚度的吸附剂涂层?/p>
?/p>
1
)实验目?/p>
掌握硅胶薄层色谱板的制备方法?/p>
?/p>
2
)仪器和试剂
?/p>
玻璃?/p>
(5×
10cm
?/p>
10×
20cm
,洁净且干?/p>
)
?/p>
?/p>
薄层色谱用硅?/p>
G
?/p>
?/p>
0.4
%羧甲基纤维素钠水溶液;
?/p>
3
)实验步?/p>
?/p>
把玻璃板在排列盘中依次相邻放好,置涂布器于其中一端?/p>
?/p>
在具塞锥形瓶中把一份硅?/p>
G
?/p>
2
?/p>
3
?/p>
CMC-Na
溶液混合,并用力振摇
30
秒?/p>
?/p>
把混好的糊倒入涂布器中,均匀地移动涂布器至排列盘的另一端后,移开涂布器?/p>
?/p>
铺好的板静置
5
分钟,然后把它们面朝上移至一个水平的平面上,阴干?/p>
?/p>
把阴干后的板?/p>
105
℃的烘箱中烘
30
分钟?/p>
?/p>
待板凉至室温后,置干燥器中保存?/p>
2
.色谱用硅胶柱的填装
液相柱色谱可以是?/p>
-
固色谱或液一液色谱。如果固定相是吸附剂,也称为液相吸附?/p>
?/p>
.
若为离子交换物质,就称为离子交换色谱;若为非离子的聚合物,如聚苯乙烯?/p>
hadex,
则称为凝胶渗透色谱?/p>
凝胶过滤色谱或分子排阻色谱?/p>
在柱中或纸上的液一液分配色谱可?/p>
进一步分为正相分配色?/p>
(
极性固定液
)
和反相分配色?/p>
(
固定相非极?/p>
)
?/p>
对于液相吸附色谱来说,固定相是填入柱中的表面活性固?/p>
(
如氧化铝、硅胶和活性炭