实验?/p>
血糖的测定
血液中的葡萄糖称血糖。正常人血糖浓度较恒定,维持在
3
?/p>
9mmol
?/p>
L
?/p>
6
?/p>
1mmol
?/p>
L
之间?/p>
血糖浓度的相对恒定是机体进行正常生理活动的前提条件之一?/p>
有着双重实际意义?/p>
其一,维持稳定的能源供给,满足机体在各种生理状态下对能量的需求。其二,保证机体
不因进食致血糖浓度过高,导致糖的丢失?/p>
因此,血糖的测定是临床生化检验实验室的常规检测项目。血糖测定按其发展过程及
反应原理的不同,大致分三类:氧化还原?/p>
,缩合法(主要有邻甲苯胺法)
,酶法(主要
有己糖激酶法和葡萄糖氧化酶法?/p>
。下边介绍两种方法供选择?/p>
一、葡萄糖氧化酶法
【目的?/p>
1.
了解葡萄糖氧化酶法测定血糖的原理,能进行血糖测定的操作?/p>
2.
掌握血糖测定的临床意义?/p>
【原理?/p>
葡萄糖氧化酶
(glucose oxidase
?/p>
GOD)
能将葡萄糖氧化为葡萄糖酸和过氧化氢。后
者在过氧化物?/p>
(peroxidase
?/p>
POD)
作用下,
分解为水和氧的同时将无色?/p>
4-
氨基安替?/p>
林与酚氧化缩合生成红色的醌类化合物,?/p>
Trinder
反应。其颜色的深浅在一定范围内
与葡萄糖浓度成正比,?/p>
505nm
波长处测定吸光度,与标准管比较可计算出血糖的浓度?/p>
反应式如下:
2H
2
O
2
+
4-氨基安替比林
+
?
红色醌类化合?
POD
2H
2
O
2H
2
O
2
O
2
葡萄?/p>
+
葡萄糖酸
+
GOD
+
【器材?/p>
试管、吸管、试管架、恒温水浴箱、分光光度计
【试剂?/p>
1. 0.1mol/L
磷酸盐缓冲液?/p>
pH7.0
?/p>
称取无水磷酸氢二?/p>
8.67g
及无水磷酸二氢钾
5.3g
溶于
800ml
蒸馏水中,用
1mol/L
氢氧化钠(或
1mol/L
盐酸)调?/p>
pH
?/p>
7.0
,然后用蒸馏水稀释至
1L
?/p>
2.
酶试?/p>
称取过氧化物?/p>
1200U
,葡萄糖氧化?/p>
1200U
?/p>
4-
氨基安替比林
10mg
,叠氮钠
100mg
?/p>
溶于上述磷酸盐缓冲液
80ml
中,?/p>
1mol/L NaOH
?/p>
pH
?/p>
7.0
,加磷酸缓冲液至
100ml
?