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实验?/p>

 

 

血糖的测定

 

血液中的葡萄糖称血糖。正常人血糖浓度较恒定,维持在

3

?/p>

9mmol

?/p>

L

?/p>

6

?/p>

1mmol

?/p>

L

之间?/p>

血糖浓度的相对恒定是机体进行正常生理活动的前提条件之一?/p>

有着双重实际意义?/p>

其一,维持稳定的能源供给,满足机体在各种生理状态下对能量的需求。其二,保证机体

不因进食致血糖浓度过高,导致糖的丢失?/p>

 

因此,血糖的测定是临床生化检验实验室的常规检测项目。血糖测定按其发展过程及

反应原理的不同,大致分三类:氧化还原?/p>

 

,缩合法(主要有邻甲苯胺法)

,酶法(主要

有己糖激酶法和葡萄糖氧化酶法?/p>

。下边介绍两种方法供选择?/p>

 

 

一、葡萄糖氧化酶法

 

【目的?/p>

 

1. 

了解葡萄糖氧化酶法测定血糖的原理,能进行血糖测定的操作?/p>

 

2. 

掌握血糖测定的临床意义?/p>

 

【原理?/p>

 

葡萄糖氧化酶

 (glucose oxidase

?/p>

GOD) 

能将葡萄糖氧化为葡萄糖酸和过氧化氢。后

者在过氧化物?/p>

 (peroxidase

?/p>

POD)

作用下,

分解为水和氧的同时将无色?/p>

4-

氨基安替?/p>

林与酚氧化缩合生成红色的醌类化合物,?/p>

 Trinder 

反应。其颜色的深浅在一定范围内

与葡萄糖浓度成正比,?/p>

505nm

波长处测定吸光度,与标准管比较可计算出血糖的浓度?/p>

反应式如下:

 

2H

2

O

2

+

4-氨基安替比林

+

?

红色醌类化合?

POD

2H

2

O

2H

2

O

2

O

2

葡萄?/p>

+

葡萄糖酸

+

GOD

+

 

【器材?/p>

 

试管、吸管、试管架、恒温水浴箱、分光光度计

 

【试剂?/p>

 

 

1. 0.1mol/L

磷酸盐缓冲液?/p>

pH7.0

?/p>

 

 

称取无水磷酸氢二?/p>

8.67g

及无水磷酸二氢钾

5.3g

溶于

800ml

蒸馏水中,用

1mol/L

氢氧化钠(或

1mol/L

盐酸)调?/p>

pH

?/p>

7.0

,然后用蒸馏水稀释至

1L

?/p>

 

 

2. 

酶试?/p>

 

 

称取过氧化物?/p>

1200U

,葡萄糖氧化?/p>

1200U

?/p>

4-

氨基安替比林

10mg

,叠氮钠

100mg

?/p>

溶于上述磷酸盐缓冲液

80ml

中,?/p>

1mol/L NaOH

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pH

?/p>

7.0

,加磷酸缓冲液至

100ml

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血糖的测定

 

血液中的葡萄糖称血糖。正常人血糖浓度较恒定,维持在

3

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9mmol

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6

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1mmol

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之间?/p>

血糖浓度的相对恒定是机体进行正常生理活动的前提条件之一?/p>

有着双重实际意义?/p>

其一,维持稳定的能源供给,满足机体在各种生理状态下对能量的需求。其二,保证机体

不因进食致血糖浓度过高,导致糖的丢失?/p>

 

因此,血糖的测定是临床生化检验实验室的常规检测项目。血糖测定按其发展过程及

反应原理的不同,大致分三类:氧化还原?/p>

 

,缩合法(主要有邻甲苯胺法)

,酶法(主要

有己糖激酶法和葡萄糖氧化酶法?/p>

。下边介绍两种方法供选择?/p>

 

 

一、葡萄糖氧化酶法

 

【目的?/p>

 

1. 

了解葡萄糖氧化酶法测定血糖的原理,能进行血糖测定的操作?/p>

 

2. 

掌握血糖测定的临床意义?/p>

 

【原理?/p>

 

葡萄糖氧化酶

 (glucose oxidase

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GOD) 

能将葡萄糖氧化为葡萄糖酸和过氧化氢。后

者在过氧化物?/p>

 (peroxidase

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POD)

作用下,

分解为水和氧的同时将无色?/p>

4-

氨基安替?/p>

林与酚氧化缩合生成红色的醌类化合物,?/p>

 Trinder 

反应。其颜色的深浅在一定范围内

与葡萄糖浓度成正比,?/p>

505nm

波长处测定吸光度,与标准管比较可计算出血糖的浓度?/p>

反应式如下:

 

2H

2

O

2

+

4-氨基安替比林

+

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红色醌类化合?

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2H

2

O

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2

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葡萄?/p>

+

葡萄糖酸

+

GOD

+

 

【器材?/p>

 

试管、吸管、试管架、恒温水浴箱、分光光度计

 

【试剂?/p>

 

 

1. 0.1mol/L

磷酸盐缓冲液?/p>

pH7.0

?/p>

 

 

称取无水磷酸氢二?/p>

8.67g

及无水磷酸二氢钾

5.3g

溶于

800ml

蒸馏水中,用

1mol/L

氢氧化钠(或

1mol/L

盐酸)调?/p>

pH

?/p>

7.0

,然后用蒸馏水稀释至

1L

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2. 

酶试?/p>

 

 

称取过氧化物?/p>

1200U

,葡萄糖氧化?/p>

1200U

?/p>

4-

氨基安替比林

10mg

,叠氮钠

100mg

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溶于上述磷酸盐缓冲液

80ml

中,?/p>

1mol/L NaOH

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pH

?/p>

7.0

,加磷酸缓冲液至

100ml

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血糖的测定

 

血液中的葡萄糖称血糖。正常人血糖浓度较恒定,维持在

3

?/p>

9mmol

?/p>

L

?/p>

6

?/p>

1mmol

?/p>

L

之间?/p>

血糖浓度的相对恒定是机体进行正常生理活动的前提条件之一?/p>

有着双重实际意义?/p>

其一,维持稳定的能源供给,满足机体在各种生理状态下对能量的需求。其二,保证机体

不因进食致血糖浓度过高,导致糖的丢失?/p>

 

因此,血糖的测定是临床生化检验实验室的常规检测项目。血糖测定按其发展过程及

反应原理的不同,大致分三类:氧化还原?/p>

 

,缩合法(主要有邻甲苯胺法)

,酶法(主要

有己糖激酶法和葡萄糖氧化酶法?/p>

。下边介绍两种方法供选择?/p>

 

 

一、葡萄糖氧化酶法

 

【目的?/p>

 

1. 

了解葡萄糖氧化酶法测定血糖的原理,能进行血糖测定的操作?/p>

 

2. 

掌握血糖测定的临床意义?/p>

 

【原理?/p>

 

葡萄糖氧化酶

 (glucose oxidase

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GOD) 

能将葡萄糖氧化为葡萄糖酸和过氧化氢。后

者在过氧化物?/p>

 (peroxidase

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POD)

作用下,

分解为水和氧的同时将无色?/p>

4-

氨基安替?/p>

林与酚氧化缩合生成红色的醌类化合物,?/p>

 Trinder 

反应。其颜色的深浅在一定范围内

与葡萄糖浓度成正比,?/p>

505nm

波长处测定吸光度,与标准管比较可计算出血糖的浓度?/p>

反应式如下:

 

2H

2

O

2

+

4-氨基安替比林

+

?

红色醌类化合?

POD

2H

2

O

2H

2

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2

葡萄?/p>

+

葡萄糖酸

+

GOD

+

 

【器材?/p>

 

试管、吸管、试管架、恒温水浴箱、分光光度计

 

【试剂?/p>

 

 

1. 0.1mol/L

磷酸盐缓冲液?/p>

pH7.0

?/p>

 

 

称取无水磷酸氢二?/p>

8.67g

及无水磷酸二氢钾

5.3g

溶于

800ml

蒸馏水中,用

1mol/L

氢氧化钠(或

1mol/L

盐酸)调?/p>

pH

?/p>

7.0

,然后用蒸馏水稀释至

1L

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2. 

酶试?/p>

 

 

称取过氧化物?/p>

1200U

,葡萄糖氧化?/p>

1200U

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4-

氨基安替比林

10mg

,叠氮钠

100mg

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溶于上述磷酸盐缓冲液

80ml

中,?/p>

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八血糖的测定葡萄糖氧化酶?- 百度文库
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血糖的测定

 

血液中的葡萄糖称血糖。正常人血糖浓度较恒定,维持在

3

?/p>

9mmol

?/p>

L

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6

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1mmol

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之间?/p>

血糖浓度的相对恒定是机体进行正常生理活动的前提条件之一?/p>

有着双重实际意义?/p>

其一,维持稳定的能源供给,满足机体在各种生理状态下对能量的需求。其二,保证机体

不因进食致血糖浓度过高,导致糖的丢失?/p>

 

因此,血糖的测定是临床生化检验实验室的常规检测项目。血糖测定按其发展过程及

反应原理的不同,大致分三类:氧化还原?/p>

 

,缩合法(主要有邻甲苯胺法)

,酶法(主要

有己糖激酶法和葡萄糖氧化酶法?/p>

。下边介绍两种方法供选择?/p>

 

 

一、葡萄糖氧化酶法

 

【目的?/p>

 

1. 

了解葡萄糖氧化酶法测定血糖的原理,能进行血糖测定的操作?/p>

 

2. 

掌握血糖测定的临床意义?/p>

 

【原理?/p>

 

葡萄糖氧化酶

 (glucose oxidase

?/p>

GOD) 

能将葡萄糖氧化为葡萄糖酸和过氧化氢。后

者在过氧化物?/p>

 (peroxidase

?/p>

POD)

作用下,

分解为水和氧的同时将无色?/p>

4-

氨基安替?/p>

林与酚氧化缩合生成红色的醌类化合物,?/p>

 Trinder 

反应。其颜色的深浅在一定范围内

与葡萄糖浓度成正比,?/p>

505nm

波长处测定吸光度,与标准管比较可计算出血糖的浓度?/p>

反应式如下:

 

2H

2

O

2

+

4-氨基安替比林

+

?

红色醌类化合?

POD

2H

2

O

2H

2

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2

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2

葡萄?/p>

+

葡萄糖酸

+

GOD

+

 

【器材?/p>

 

试管、吸管、试管架、恒温水浴箱、分光光度计

 

【试剂?/p>

 

 

1. 0.1mol/L

磷酸盐缓冲液?/p>

pH7.0

?/p>

 

 

称取无水磷酸氢二?/p>

8.67g

及无水磷酸二氢钾

5.3g

溶于

800ml

蒸馏水中,用

1mol/L

氢氧化钠(或

1mol/L

盐酸)调?/p>

pH

?/p>

7.0

,然后用蒸馏水稀释至

1L

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2. 

酶试?/p>

 

 

称取过氧化物?/p>

1200U

,葡萄糖氧化?/p>

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4-

氨基安替比林

10mg

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100mg

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溶于上述磷酸盐缓冲液

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