1
小鼠糖皮质激?/p>
(GC)
ELISA
试剂盒使用说明书
本试剂仅供研究使用目的:
本试剂盒用于测定小鼠血清,
血浆及相关液体?/p>
本中小鼠糖皮质激?/p>
(GC)
含量?/p>
实验原理?/p>
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠糖皮质激?/p>
(GC)
水平。用纯化的小鼠糖皮质
激?/p>
(GC)
抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入糖皮质激?/p>
(GC)
?/p>
再与
HRP
标记的糖皮质激?/p>
(GC)
抗体结合,形成抗?/p>
-
抗原
-
酶标抗体复合物,经过彻底?/p>
涤后加底?/p>
TMB
显色?/p>
TMB
?/p>
HRP
酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最?/p>
的黄色。颜色的深浅和样品中的糖皮质激?/p>
(GC)
呈正相关。用酶标仪在
450nm
波长下测?/p>
吸光度(
OD
值)
,通过标准曲线计算样品中小鼠糖皮质激?/p>
(GC)
浓度?/p>
试剂盒组?/p>
?/p>
试剂盒组?/p>
48
孔配?/p>
96
孔配?/p>
保存
说明?/p>
1
?/p>
1
?/p>
封板?/p>
2
片(
48
?/p>
2
片(
96
?/p>
密封?/p>
1
?/p>
1
?/p>
酶标包被?/p>
1
×
48
1
×
96
2-8
℃保?/p>
标准品:
720ng/L
0.5ml
×
1
?/p>
0.5ml
×
1
?/p>
2-8
℃保?/p>
标准品稀释液
1.5ml
×
1
?/p>
1.5ml
×
1
?/p>
2-8
℃保?/p>
酶标试剂
3 ml
×
1
?/p>
6 ml
×
1
?/p>
2-8
℃保?/p>
样品稀释液
3 ml
×
1
?/p>
6 ml
×
1
?/p>
2-8
℃保?/p>
显色?/p>
A
?/p>
3 ml
×
1
?/p>
6 ml
×
1
?/p>
2-8
℃保?/p>
显色?/p>
B
?/p>
3 ml
×
1
?/p>
6 ml
×
1
?/p>
2-8
℃保?/p>
终止?/p>
3ml
×
1
?/p>
6ml
×
1
?/p>
2-8
℃保?/p>
浓缩洗涤?/p>
?/p>
20ml
×
20
倍)×
1
?/p>
?/p>
20ml
×
30
倍)×
1
?/p>
2-8
℃保?/p>
样本处理及要?/p>
?/p>
1.
血清:
室温血液自然凝?/p>
10-20
分钟?/p>
离心
20
分钟左右
?/p>
2000-3000
?/p>
/
分)
。仔细收集上
清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心?/p>
2.
血浆:应根据标本的要求选择
EDTA
或柠檬酸钠作为抗凝剂,混?/p>
10-20
分钟后,离心
20
分钟左右?/p>
2000-3000
?/p>
/
分)
。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再?/p>
离心?/p>
3.
尿液:用无菌管收集,离心
20
分钟左右?/p>
2000-3000
?/p>
/
分)
。仔细收集上清,保存过程
中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行?/p>
4.
细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离?/p>
20
分钟左右?/p>
2000-3000
?/p>
/
分)
。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用
PBS
?/p>
PH7.2-7.4
)稀释细胞悬液,细胞
浓度达到
100
?/p>
/ml
左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离?/p>
20
?/p>
钟左右(
2000-3000
?/p>
/
分)
。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心?/p>
5.
组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量?/p>
PBS
?/p>
PH7.4
。用液氮迅速冷冻保存备