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献给初学者:大神教你瞬时转染快,准,?/p>

 

 

 

 

 

 

一般情况下?/p>

瞬时转染是将

 

DNA 

导入真核细胞的方?/p>

之一。在瞬时转染中,重组

 

DNA 

导入感染性强的细胞系?/p>

获得目的基因暂时但高水平的表达?/p>

 

转染?/p>

 

DNA 

不必整合到宿主染色体?/p>

可在比稳定转染较?/p>

时间内(最多一周左右)收获转染的细胞,并对溶解产物?/p>

目的基因的表达进行检测?/p>

 

如果过表达基因用质粒,如果敲降用的是

 

siRNA(

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microRNA 

实验中,过表达用的是

 

mimics

,敲降用的是

 

inhibitor)

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通过瞬时转染,将目的基因敲降或者过表达?/p>

gain and loss 

实验?/p>

,观察下游靶基因的表达情况,或者细胞表?/p>

?/p>

phenotype

)的变化,例如凋亡,周期,增殖,侵袭,转

移等。那该怎么做呢

 

01 

实验前准?/p>

 

lipofectamine2000

(转染试剂)

(避光)

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Opti-MEMI 

减血?/p>

培养?/p>

(避光)

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目的基因的质粒或?/p>

 

siRNA

(以

 

siRNA 

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例)

,细胞,六孔板,培养基,以及一些细胞实验所需的普

通物品?/p>

 

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一般情况下?/p>

瞬时转染是将

 

DNA 

导入真核细胞的方?/p>

之一。在瞬时转染中,重组

 

DNA 

导入感染性强的细胞系?/p>

获得目的基因暂时但高水平的表达?/p>

 

转染?/p>

 

DNA 

不必整合到宿主染色体?/p>

可在比稳定转染较?/p>

时间内(最多一周左右)收获转染的细胞,并对溶解产物?/p>

目的基因的表达进行检测?/p>

 

如果过表达基因用质粒,如果敲降用的是

 

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移等。那该怎么做呢

 

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可在比稳定转染较?/p>

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献给初学者:大神教你瞬时转染???- 百度文库
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获得目的基因暂时但高水平的表达?/p>

 

转染?/p>

 

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不必整合到宿主染色体?/p>

可在比稳定转染较?/p>

时间内(最多一周左右)收获转染的细胞,并对溶解产物?/p>

目的基因的表达进行检测?/p>

 

如果过表达基因用质粒,如果敲降用的是

 

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实验中,过表达用的是

 

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通过瞬时转染,将目的基因敲降或者过表达?/p>

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实验?/p>

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实验前准?/p>

 

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