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【复习目标?/p>
本课题通过尝试对血液中血红蛋白的提取和分离,
使学生能?/p>
体验从复杂体系中提取生物大分子的基本过程和方法,并了解色
谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理,为今后学习运用这
些技术打下基础?/p>
【复习重点与难点?/p>
复习重点:凝胶色谱法的原理和方法?/p>
复习难点?/p>
样品的预处理?/p>
色谱柱填料的处理和色谱柱的装填?/p>
【知识回顾?/p>
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一、实验原?/p>
蛋白质的物化理性质?/p>
形状?/p>
大小?/p>
电荷性质和多少?/p>
溶解度?/p>
吸附性质、亲和力等千差万别,由此提取和分离各种蛋白质?/p>
1
.凝胶色谱法(分配色谱法?/p>
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?/p>
1
)原理:分子?/p>
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的分子通过
多孔凝胶颗粒的间?/p>
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路程
?/p>
?/p>
流动?/p>
;分子量
?/p>
的分子穿?/p>
多孔凝胶颗粒内部,路程长?/p>
流动?/p>
?/p>
?/p>
2
)凝胶材料:多孔性,多糖类化合物,如葡聚糖、琼脂糖?/p>
[
来源
: ]
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3
)分离过程:
混合物上柱→洗脱→大分子流动快?/p>
小分子流动慢→收集大?/p>
子→收集小分?/p>
?/p>
洗脱
:从色谱柱上端不断注入缓冲液,促使蛋白质分子的差
速流动?/p>
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4
)作用:
分离蛋白质,测定生物大分子分子量,蛋白质?/p>
脱盐等?/p>