膜片钳常见问题解答(一?/p>
1.
什么是电压钳与膜片钳,有什么区别?
答:电压钳技术是通过向细胞内注射一定的电流,抵消离子通道开放时所产生
的离子流,从而将细胞膜电位固定在某一数值。由于注射电流的大小与离子流
的大小相等、方向相反,因此它可以反映离子流的大小和方向。膜片钳技术钳
制的是“膜片”,是指采用尖端经过处理的微电极与细胞膜发生紧密接触,使
尖端下的这片细胞膜在电学上与其它细胞膜分离,这大大降低了背景噪声,使
单通道微弱的电流得以分辨出来。采用电压钳技术将这片膜的电位钳制在某一
数值,可记录到单通道电流。从这点上看,膜片钳技术是特殊的电压钳技术?/p>
随着膜片钳技术的发展,它已经不仅仅局限于“膜片”的概念,也不仅仅采?/p>
电压钳技术,还常采用电流钳技术?/p>
2.
离子通道电导的单位是什么?如何换算?/p>
答:离子通道电导的单位是西门子(
Siemens, S
),旧称姆欧,即安培
/
伏特?/p>
常用皮西门子?/p>
pS
),
1pS
?/p>
10E-12 S
?/p>
1,000 pS
?/p>
1 pA/mV
?/p>
3. MultiClamp 700A
中,在放大器和信号器的连接中,放大器?/p>
raw output
?/p>
否需要连接信号器?/p>
ANALOG IN
接口
? scaled output
?/p>
raw output
有什么区
?/p>
?
答:
Raw output
为原始信号输出,放大器输出的信号没有经过处理(如滤波?/p>
放大等)?/p>
scaled
output
为定标输出,输出的信号经过了处理。后者的灵活?/p>
大,因此多采用。目前膜片钳放大器多设有
scaled
output
,你可将其与数模?/p>
换器(你所说的信号器)?/p>
ANALOG IN
连接,这样放大器的输出信号就能传?/p>
给计算机了,此时已经没有必要再使?/p>
Raw output
了。若你想记录两个输出?/p>
则需要将
Raw output
与数模转换器的另一?/p>
ANALOG IN
连接?/p>
4.
?/p>
Clampex
?/p>
Edit protocol/Wave
中,
Step
?/p>
ramp
各有什么适用范围?/p>
答:
Ramp
多用于电流衰减缓慢的离子通道以及失敏不明显的受体通道?/p>
I-V
?/p>
线制作,如多用于钾、钙离子通道。而像钠通道,其衰减非常迅速,在持续去
极化的情况下,通道很快失活,无法使?/p>
ramp
,另外诸如烟碱受体通道等具?/p>
明显失敏特征的受体通道也不宜采?/p>
ramp
?/p>
5.
什么是
ramp
?有什么作用?