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逆转?/p>

PCR 

RT-PCR 

为反转录

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reverse 

transcription 

PCR

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和实?/p>

PCR

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time 

PCR

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共同的缩写。逆转?/p>

PCR

,或者称反转?/p>

PCR(reverse transcription-PCR, 

RT-PCR)

,是聚合酶链式反?/p>

(PCR)

的一种广泛应用的变形。在

RT-PCR

中,一?/p>

RNA

链被逆转录成为互?/p>

DNA

,再以此为模板通过

PCR

进行

DNA

扩增?/p>

 

逆转?/p>

PCR 

 

 

由一?/p>

RNA

单链转录为互?/p>

DNA

(cDNA)

称作

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,由依赖

RNA

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DNA

聚合?/p>

(逆转录酶?/p>

来完成?/p>

随后?/p>

DNA

的另一条链通过脱氧核苷酸引物和依赖

RNA

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DNA

聚合酶完成,随每个循环倍增,即通常?/p>

PCR

。原先的

RNA

模板?/p>

RNA

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H

降解,留下互?/p>

DNA

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RT-PCR

的指数扩增是一种很灵敏的技术,

可以检测很低拷贝数?/p>

RNA

?/p>

RT-PCR

广泛应用于遗传病的诊断,并且可以用于定量监测某种

RNA

的含量?/p>

(检测基因表?/p>

的方法,参见

Northern Blot

法?/p>

?/p>

 

 

 

 

RT-PCR

有时候也会指代实?/p>

PCR(real-time 

PCR)

。为了与逆转?/p>

PCR

相区别,

通常被写?/p>

?/p>

定量

PCR?quantitative PCR)

或?/p>

RTQ-PCR(real-time quantitative PCR)

?/p>

 

 

实时

PCR 

 

 

实时

PCR(real-time PCR)

,属于定?/p>

PCR

?/p>

Q-PCR

)的一种,以一定时间内

DNA

的增幅量为基础进行

DNA

的定量分析?/p>

 

 

 

 

real time PCR 

的定量使用萤光色素,目前有二种方法。一种是?/p>

ds DNA

中插?/p>

特异的萤光色素;另一种使用一种能与增?/p>

DNA

序列中特定寡核酸序列相结合的一

种萤光探针(

probe

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time 

PCR 

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transcription 

PCR 

相结合,能用微量?/p>

RNA

来找出特

定时间、细胞、组织内的特别表达的遗传基因。这两种

RT PCR

的组合又被称之为

?/p>

?/p>

?/p>

RT-PCR

?/p>

quantitative RT-PCR

?/p>

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RT-PCR

技术相关试?/p>

 

 

 

oligo: 

多聚体,相当?/p>

mRNA

引物

 

 

 

 

AMV

?/p>

M-MLV

?/p>

:逆转录酶

 

 

 

 

dNTP

:脱氧核苷酸

 

 

 

 

RNase

?/p>

RNA

酶抑制剂

 

 

 

 

PCR Buffer

?/p>

RT-PCR

缓冲?/p>

 

 

 

 

MgCl2

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2

价镁离子

 

 

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广泛应用于遗传病的诊断,并且可以用于定量监测某种

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(检测基因表?/p>

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RT-PCR

有时候也会指代实?/p>

PCR(real-time 

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半定量RT-PCR - 百度文库
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