Western blot瀹為獙鎵�闇�璇曞墏閰嶅埗鏂规硶 - 鐧惧害鏂囧簱

鏂板缓

涓婁紶

棣栭〉

鍔╂墜

鏈�杩?/div>

璧勬枡搴?/div>

宸ュ叿

涓�锛?/p>

Western blot

瀹為獙鎵�闇�璇曞墏閰嶅埗鏂规硶

 

鍒惰兌璇曞墏锛?/p>

 

1.

 

30

锛咃紙

W/V

锛変笝鐑�閰拌兒婧舵恫锛�

 

 

鍚嶇О

 

鐢ㄩ噺

 

澶囨敞

 

Acrylamide 

29g 

 

N-

鐢插弶鍙屼笝鐑�閰拌�?/p>

 

(N

锛?/p>

N-methylene-bisacylamide

锛?/p>

BIS) 

1g 

鍏呭垎鎼呮媽婧惰В

 

鍘荤�诲瓙姘�

 

80ml 

瀹氬�硅�?/p>

100ml

锛?/p>

0.45渭m

婊よ啘杩囨护闄ゆ潅锛岀疆浜庢��

鑹茬摱涓?/p>

4

鈩?/p>

淇濆瓨锛?/p>

 

锛堟敞鎰忥細

涓欑儻閰拌兒鍏锋湁寮虹儓鐨勭�炵粡姣掓�э紝

閫氳繃鐨�鑲ゅ惛鏀跺苟鍏锋湁绱�绉�鎬э紝

閰嶅埗鏃跺簲鎴存墜濂楁搷浣滐級

 

 

2.

 

10

锛咃紙

W/V

锛夎繃纭�閰搁摰锛�

 

 

鍚嶇О

 

鐢ㄩ噺

 

澶囨敞

 

杩囩～閰搁摰

 

0.1g 

 

鍘荤�诲瓙姘�

 

1ml 

鐜伴厤鐜扮敤

 

锛堟敞鎰忥細

10

锛呰繃纭�閰搁摰婧舵恫鍦�

4

鈩?/p>

淇濆瓨鑳戒娇鐢ㄤ袱鍛ㄥ乏鍙筹紝杩囨湡浼氬け鍘诲偓鍖栨晥鏋滐級

 

3. 

 

1M Tris-HCL, pH=6.8 (36%

鐨勬祿鐩愰吀

) 

锛?/p>

 

鍚嶇О

 

鐢ㄩ噺

 

澶囨敞

 

Tris 

12.1 

 

鍘荤�诲瓙姘�

 

80ml 

 

娴撶洂閰?/p>

 

8.8-9ml 

棰勫疄楠屽凡纭�瀹�

 

鍘荤�诲瓙姘�

 

 

鍔犲叆鍘荤�诲瓙姘村畾瀹硅�?/p>

100ml

鍚庯紝瀹ゆ俯淇濆瓨

 

 

4. 

 

1.5M Tris-HCL, pH=8.8 (36%

鐨勬祿鐩愰吀

) 

锛?/p>

 

鍚嶇О

 

鐢ㄩ噺

 

澶囨敞

 

Tris 

18.17 

 

鍘荤�诲瓙姘�

 

80ml 

 

娴撶洂閰?/p>

 

2.8-3ml 

棰勫疄楠屽凡纭�瀹�

 

鍘荤�诲瓙姘�

 

 

鍔犲叆鍘荤�诲瓙姘村畾瀹硅�?/p>

100ml

鍚庯紝瀹ゆ俯淇濆瓨

 

 

5. 

 

10%SDS

锛?/p>

 

鍚嶇О

 

鐢ㄩ噺

 

澶囨敞

 

SDS 

10g 

 

鍘荤�诲瓙姘�

 

80ml 

鍔犲叆鍘荤�诲瓙姘村畾瀹硅�?/p>

100ml

鍚庯紝瀹ゆ俯淇濆瓨