人参茎段组织培养研究
摘要
?/p>
MS
为基本培养基,附加不同浓度的
2
?/p>
4-D
?/p>
NAA
?/p>
6-BA
,研
究不同激素水平对人参茎段诱导不定芽的影响。结果表明:
MS
培养?/p>
+2
?/p>
4-D
0.1mg/L+NAA 0.1mg/L+6-BA 0.5 mg/L
诱导效果最好,出芽率可?/p>
100%
。不?/p>
芽在适宜培养基上能快速增殖?/p>
带腋芽茎段在培养过程中可产生丛生芽,
经继?/p>
培养可大量增殖。小苗在
1/2
MS
培养基中容易生根,健壮小苗经驯化后移栽,
成活率可?/p>
100%
,建立了人参的快繁体系?/p>
关键?/p>
人参;幼芽;组织培养;快速繁?/p>
人参具有重要的医疗保健价值和巨大的经济效益,
自古以来就被人们枧为?/p>
品。但是人参自然生长缓慢,发育期长?/p>
5
?/p>
7
年,对生长环境要求严格,对培
育新品种和大量生产造成很大的困?/p>
[1-3]
?/p>
?/p>
20
世纪
60
年代以来?/p>
人参组织?/p>
养技术得到深入的研究和应用?/p>
研究人员希望通过植物组培等新技术,
在人工控
制条件下大量繁殖人参有效的组织或细胞,使人参生产摆脱自然环境条件的限
制,
同时达到快速培育新品种的目?/p>
[4-5]
?/p>
该文通过人参茎段快速诱导不定芽?/p>
方法,大量繁殖人参幼苗,以为快速获得人参无菌苗开辟新途径?/p>
1
材料与方?/p>
1.1
试验材料
取人参幼茎若干,经自来水冲洗
5
?/p>
6
次,放在吸水纸上将其晾干。接着?/p>
刀片将幼茎切成
1 cm
的小段,经过一段时间培养后形成不定芽?/p>
1.2
试验方法
1.2.1
外植体消毒?/p>
取人参外植体的幼茎,
将处理晾干后的材料转入高?/p>
消毒的烧杯中?/p>
在超净工作台上先用
75%
酒精浸泡杀?/p>
30 s
?/p>
去除酒精后用无菌
水漂?/p>
3
?/p>
4
次,之后迅速加?/p>
0.1%
升汞液浸泡杀?/p>
8
?/p>
10
min
,浸泡过程中?/p>
常摇动烧杯。倒掉升汞液,用无菌水冲洗
4
?/p>
5
次,最后用无菌水浸泡备?/p>
[6]
?/p>
1.2.2
初代培养。将消毒后的人参幼茎切成若干
1
cm
的小茎段,接种于
诱导不定芽培养基。设?/p>
3
种培养基配比关系?/p>
MS
培养?/p>
+3%
蔗糖
+2
?/p>
4-D 0.1
mg/L+NAA 0.1 mg/L+6-BA 0.5 mg/L+
琼脂
0.75%
?/p>
pH
值为
5.8
?/p>
MS
培养?/p>
+3%
蔗糖
+2
?/p>
4-D 0.2 mg/L+NAA 0.5 mg/L+6-BA 1.0 mg/L+
琼脂
0.75%
?/p>
pH
值为
5.8
?/p>
MS
培养?/p>
+3%
蔗糖
+2
?/p>
4-D 0.3 mg/L+NAA 1.0 mg/L+6-BA 2.0 mg/L+
琼脂
0.75%
?/p>
pH
值为
5.8
。培养温度为
23
?/p>
27
℃,湿度
30%
,光照强?/p>
2
000
lx
,光照时?/p>
?/p>
14 h/d
,培养数天后观察其变化?/p>
1.2.3
继代培养?/p>
切取诱导形成的不定芽转移至不定芽扩繁培养基,
采用
MS+3%
蔗糖
+NAA 0.5 mg/L+6-BA 1.0 mg/L+
琼脂
0.75%
进行扩繁?/p>
15
?/p>
20 d
分离
诱导的丛生芽?/p>
在生根培养基转接生长健壮?/p>
长势良好的人参小苗,
其余的单?/p>
再进行继代培?/p>
[7]
?/p>
1.2.4
生根培养。在生根培养?/p>
1/2MS+NAA 1.0 mg/L
上培养高
2
?/p>
3 cm
?/p>
2
?/p>
3
片叶的单株幼苗。培养条件:温度?/p>
25±
2
)℃,光?/p>
2 000 lx
,光照时?/p>
12
h/d
?/p>
2
结果与分?/p>
2.1
人参茎段诱导培养
采取
3
种激素配比培养基对人参茎段进行诱导不定芽,结果表明:
MS
培养
?/p>
+3%
蔗糖
+2
?/p>
4-D 0.1 mg/L+NAA 0.1 mg/L+6-BA 0.5 mg/L+
琼脂
0.75%
诱导效果