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小肽含量的测定方?/p>

 

1.

试剂

 

标准蛋白溶液:准确称?/p>

0.4g

牛血清白蛋白,用蒸馏水溶解定容至

100mL

?/p>

贮存?/p>

4

℃冰箱?/p>

 

双缩脲试剂:称以

1.50g

硫酸?/p>

 (CuSO

4

·

5H

2

O)

?/p>

6.0g

酒石酸钾?

(KNaC

4

H

4

O

6

·

4H

2

O)

,用

500mL

水溶解,在搅拌下加入

300mL 

10% 

NaOH

溶液?/p>

用水稀释到

1L

,贮存于塑料瓶中?/p>

 

10%

的三氯乙酸(

TCA

):准确称取

1.0 

TCA

,用蒸馏水溶解定容至

10mL

?/p>

 

2.

小肽含量的测定步?/p>

 

2.1 

样品前处?/p>

 

        

准确称取

1.0g

样品加入

9mL

水混匀,然后加?/p>

10mL 10%

?/p>

TCA

溶液?/p>

震荡混匀,静?/p>

30min

,最后离心,取上清液备用?/p>

 

2.2 

标准曲线的制?/p>

 

试剂

 

1 

2 

3 

4 

5 

6 

蛋白标准溶液?/p>

mL

?/p>

 

0 

1 

2 

3 

4 

5 

蒸馏水(

mL

?/p>

 

5 

4 

3 

2 

1 

0 

双缩脲试剂(

mL

?/p>

 

5 

5 

5 

5 

5 

5 

按表

1.1

所示分别添加上述试剂,混匀,避光反?/p>

30min

,反应结束后?/p>

540nm

波长下测定吸光度值,以蛋白浓度为横坐标,吸光度值为纵坐标作标准

曲线?/p>

 

2.3 

样品测定

 

        

用移液枪准确移取

1mL 

上清液于试管中,加入

4mL

蒸馏水,混匀?/p>

加入

5mL

双缩脲试剂,混匀,避光反?/p>

30min

,反应结束后?/p>

540nm

波长下测

定吸光度值将吸光度值代入标准曲线计算样品的小肽含量?/p>

 

 

 

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小肽含量的测定方?/p>

 

1.

试剂

 

标准蛋白溶液:准确称?/p>

0.4g

牛血清白蛋白,用蒸馏水溶解定容至

100mL

?/p>

贮存?/p>

4

℃冰箱?/p>

 

双缩脲试剂:称以

1.50g

硫酸?/p>

 (CuSO

4

·

5H

2

O)

?/p>

6.0g

酒石酸钾?

(KNaC

4

H

4

O

6

·

4H

2

O)

,用

500mL

水溶解,在搅拌下加入

300mL 

10% 

NaOH

溶液?/p>

用水稀释到

1L

,贮存于塑料瓶中?/p>

 

10%

的三氯乙酸(

TCA

):准确称取

1.0 

TCA

,用蒸馏水溶解定容至

10mL

?/p>

 

2.

小肽含量的测定步?/p>

 

2.1 

样品前处?/p>

 

        

准确称取

1.0g

样品加入

9mL

水混匀,然后加?/p>

10mL 10%

?/p>

TCA

溶液?/p>

震荡混匀,静?/p>

30min

,最后离心,取上清液备用?/p>

 

2.2 

标准曲线的制?/p>

 

试剂

 

1 

2 

3 

4 

5 

6 

蛋白标准溶液?/p>

mL

?/p>

 

0 

1 

2 

3 

4 

5 

蒸馏水(

mL

?/p>

 

5 

4 

3 

2 

1 

0 

双缩脲试剂(

mL

?/p>

 

5 

5 

5 

5 

5 

5 

按表

1.1

所示分别添加上述试剂,混匀,避光反?/p>

30min

,反应结束后?/p>

540nm

波长下测定吸光度值,以蛋白浓度为横坐标,吸光度值为纵坐标作标准

曲线?/p>

 

2.3 

样品测定

 

        

用移液枪准确移取

1mL 

上清液于试管中,加入

4mL

蒸馏水,混匀?/p>

加入

5mL

双缩脲试剂,混匀,避光反?/p>

30min

,反应结束后?/p>

540nm

波长下测

定吸光度值将吸光度值代入标准曲线计算样品的小肽含量?/p>

 

 

 

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小肽含量的测定方?/p>

 

1.

试剂

 

标准蛋白溶液:准确称?/p>

0.4g

牛血清白蛋白,用蒸馏水溶解定容至

100mL

?/p>

贮存?/p>

4

℃冰箱?/p>

 

双缩脲试剂:称以

1.50g

硫酸?/p>

 (CuSO

4

·

5H

2

O)

?/p>

6.0g

酒石酸钾?

(KNaC

4

H

4

O

6

·

4H

2

O)

,用

500mL

水溶解,在搅拌下加入

300mL 

10% 

NaOH

溶液?/p>

用水稀释到

1L

,贮存于塑料瓶中?/p>

 

10%

的三氯乙酸(

TCA

):准确称取

1.0 

TCA

,用蒸馏水溶解定容至

10mL

?/p>

 

2.

小肽含量的测定步?/p>

 

2.1 

样品前处?/p>

 

        

准确称取

1.0g

样品加入

9mL

水混匀,然后加?/p>

10mL 10%

?/p>

TCA

溶液?/p>

震荡混匀,静?/p>

30min

,最后离心,取上清液备用?/p>

 

2.2 

标准曲线的制?/p>

 

试剂

 

1 

2 

3 

4 

5 

6 

蛋白标准溶液?/p>

mL

?/p>

 

0 

1 

2 

3 

4 

5 

蒸馏水(

mL

?/p>

 

5 

4 

3 

2 

1 

0 

双缩脲试剂(

mL

?/p>

 

5 

5 

5 

5 

5 

5 

按表

1.1

所示分别添加上述试剂,混匀,避光反?/p>

30min

,反应结束后?/p>

540nm

波长下测定吸光度值,以蛋白浓度为横坐标,吸光度值为纵坐标作标准

曲线?/p>

 

2.3 

样品测定

 

        

用移液枪准确移取

1mL 

上清液于试管中,加入

4mL

蒸馏水,混匀?/p>

加入

5mL

双缩脲试剂,混匀,避光反?/p>

30min

,反应结束后?/p>

540nm

波长下测

定吸光度值将吸光度值代入标准曲线计算样品的小肽含量?/p>

 

 

 

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小肽含量的测定方?- 百度文库
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小肽含量的测定方?/p>

 

1.

试剂

 

标准蛋白溶液:准确称?/p>

0.4g

牛血清白蛋白,用蒸馏水溶解定容至

100mL

?/p>

贮存?/p>

4

℃冰箱?/p>

 

双缩脲试剂:称以

1.50g

硫酸?/p>

 (CuSO

4

·

5H

2

O)

?/p>

6.0g

酒石酸钾?

(KNaC

4

H

4

O

6

·

4H

2

O)

,用

500mL

水溶解,在搅拌下加入

300mL 

10% 

NaOH

溶液?/p>

用水稀释到

1L

,贮存于塑料瓶中?/p>

 

10%

的三氯乙酸(

TCA

):准确称取

1.0 

TCA

,用蒸馏水溶解定容至

10mL

?/p>

 

2.

小肽含量的测定步?/p>

 

2.1 

样品前处?/p>

 

        

准确称取

1.0g

样品加入

9mL

水混匀,然后加?/p>

10mL 10%

?/p>

TCA

溶液?/p>

震荡混匀,静?/p>

30min

,最后离心,取上清液备用?/p>

 

2.2 

标准曲线的制?/p>

 

试剂

 

1 

2 

3 

4 

5 

6 

蛋白标准溶液?/p>

mL

?/p>

 

0 

1 

2 

3 

4 

5 

蒸馏水(

mL

?/p>

 

5 

4 

3 

2 

1 

0 

双缩脲试剂(

mL

?/p>

 

5 

5 

5 

5 

5 

5 

按表

1.1

所示分别添加上述试剂,混匀,避光反?/p>

30min

,反应结束后?/p>

540nm

波长下测定吸光度值,以蛋白浓度为横坐标,吸光度值为纵坐标作标准

曲线?/p>

 

2.3 

样品测定

 

        

用移液枪准确移取

1mL 

上清液于试管中,加入

4mL

蒸馏水,混匀?/p>

加入

5mL

双缩脲试剂,混匀,避光反?/p>

30min

,反应结束后?/p>

540nm

波长下测

定吸光度值将吸光度值代入标准曲线计算样品的小肽含量?/p>

 

 

 



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