HEK-293
细胞
293A 293S 293T
?/p>
293FT cell
区别比较
293
细胞分为几种,文献上所提总是笼统的讲
293
细胞,可
293
?/p>
293A,
还有
293T
,请?/p>
二者有什么区别,是否
293A
是用来包腺病毒的?/p>
293T
是用来包慢病毒的,是否还有其?
293
细胞,比?/p>
293S
课题需要做腺病毒转染,看了
initrogen
的说明书上说?/p>
293A
细胞。在
clontech
的说明书
上就?/p>
293
细胞?/p>
293
细胞比较容易转染?/p>
是一个很常用的表达研究外源基因的细胞株?/p>
293
细胞的一个衍?
株:
293T/17
的转染效率更高,成为广大研究者研究基因功能的一个强大工具?/p>
293
细胞的缺陷是生长过程中贴壁强度比较小?/p>
所以在实验过程中容易流失,
从而影?/p>
实验结果。如果一个实验室新得到的
293
细胞是邮寄得到的并且细胞在培养瓶中,就需?
让细胞沉降几天时间,因为大量细胞会漂浮在培养液里?/p>
来源:人体肾?/p>
形态:上皮细胞
生长特性:贴壁
注释:该细胞含腺病毒
5 DNA
?/p>
培养液:
MEM
?/p>
?/p>
2 mM L-
谷氨酰胺
?/p>
Earle's BSS
?/p>
1.5 g/L NaHCO3, 0.1 mM
非必
需氨基?/p>
, 1.0 mM
丙酮酸钠?/p>
?/p>
10%
马血清(热灭活)
?/p>
传代?/p>
吸去培养液?/p>
?/p>
0.25% (w/) Trypsin- 0.53 mM EDTA
洗一次,以去除血清(血?/p>
会抑制胰酶的活性)
?/p>
?/p>
2-3
毫升
Trypsin-EDTA
,放?/p>
37
℃培养箱内约
5
分钟,直到细?/p>
全部脱落?/p>
?/p>
6-8
毫升培养液,用移液器把细胞吹散?/p>
加适量的细胞到新的培养器皿中?
(以
1
?/p>
2
?/p>
1
?/p>
4
为宜,传代期间培养液
2-3
天更?/p>
1
次)
冻存?/p>
95%
培养?/p>
+5%DMSO
冻存于液氮?/p>
293A
比较有意思了?/p>
?/p>
293
中后来又建的细胞亚株?/p>
这个
A
?/p>
adhere
的意思,
就是?/p>
293
倾向于形成单层细胞(
monolayer
?/p>
,它?/p>
293
好的地方是在做计算病毒数量的空斑试验
?/p>
plaque assay)293A
是均匀的一层,没有细胞重叠和细胞空隙(
hole
?/p>
,就这个意思,?
?/p>
A
所对的?/p>
293S
?/p>
suspension).
293
细胞系是原代人胚肾细胞转?/p>
5
型腺病毒
(Ad 5) DNA
的永生化细胞,表达转染的腺病
?/p>
5
的基因?/p>
293T
细胞表达
E1A
蛋白?/p>
S40
?/p>
T
抗原,含?/p>
S40
复制起始点与启动子区的质粒可以复
制?/p>
293FT
细胞
能制造高滴度的慢病毒?/p>
293A
细胞来源于人肾纤维母细胞?/p>
组成性表?/p>
E1A
?/p>
E1B
蛋白?/p>