1
基因工程复习归纳
第一?/p>
绪论
1.
基因工程的定义:
是指按照人们的愿望,经过严密的设计,将一种或多种生物体(供体)的基因
与载体在体外进行拼接重组,然后转入另一种生物体(受?/p>
/
宿主)内,使之按照人们的意愿稳定
遗传、并表达出新的性状的技术?/p>
2.
基因工程概念的发展:
遗传工程?/p>
DNA
重组技术→分子
/
基因克隆?/p>
Molecular/Gene
→基因工程→
基因操作。应用领域以
?/p>
基因工程
?/p>
?/p>
?/p>
DNA
重组
?/p>
为主
基因工程基因工程的历史性事?/p>
1973
?/p>
Boyer
?/p>
Cohen
建立
DNA
重组技?/p>
1978
?/p>
Genetech
公司在大肠杆菌中表达出胰岛素
1982
:世界上第一个基因工程药物重组人胰岛素上?/p>
1988
?/p>
PCR
技术诞?/p>
1989
:我国第一个基因工程药?/p>
rhIFN
α
1b
上市
2003:
世界上第一个基因治疗药物重组腺病毒
-p53
上市
3.
基因工程的三大关键元?/p>
基因(供体)
:外源基因、目的基?/p>
载体:能将外源基因带入受体细胞,并能稳定遗传?/p>
DNA
分子(克隆载体、表达载体)
?/p>
宿主(受体)
?/p>
,能摄取外源
DNA
、并能使其稳定维持的细胞(组织、器官或个体?/p>
?/p>
4.
基因工程的基本步骤(
切、接、转、增、检(大肠杆菌是中心角色?/p>
?/p>
1
)目的基因的获取:从复杂的生物基因组中,经过酶切消化?/p>
PCR
扩增等步骤,分离出带有目
的基因的
DNA
片断?/p>
?/p>
2
)重组体的制备:将目的基因的
DNA
片断插入到能自我复制并带有选择性标记(抗菌素抗性)
的载体分子上?/p>
?/p>
3
)重组体的转化:将重组体(载体)转入适当的受体细胞中?/p>
?/p>
4
)克隆鉴定:挑选转化成功的细胞克隆(含有目的基因)
?/p>
?/p>
5
)目的基因表达:使导入寄主细胞的目的基因表达出我们所需要的基因产物?/p>
