直接滴定法测还原?/p>
1.
实验原理
实验经除去蛋白质后,在加热条件下,以亚甲基蓝为指示剂,滴定标定过
的碱性酒石酸铜溶液(用还原糖标准溶液标定),根据样品液消耗体积计算还
原糖含量?/p>
2.
实验药品与试?/p>
硫酸铜、亚甲基蓝指示剂、酒石酸钾钠、氢氧化钠、乙酸锌、冰乙酸、亚铁氰
化钾、葡萄糖、氢氧化钠溶?/p>
(40g/L)
碱性酒石酸铜甲液:称取
15g
硫酸铜及
0.05g
亚甲蓝加适量水溶解至
1000ml
碱性酒石酸铜乙液:称取
50g
酒石酸钾钠与
75g
氢氧化钠,加适量水溶解,?/p>
?/p>
4g
亚铁氰化钾,完全溶解后稀释至
1000ml
,贮存于橡胶塞玻璃瓶中?/p>
盐酸溶液:量?/p>
50ml
盐酸加水稀释至
100ml
?/p>
葡萄糖标液:称取
1.0g
干燥
2h
后的葡萄?/p>
,
加水溶解并加?/p>
5ml
盐酸,并以水
稀释到
1000ml
,此溶液每毫克相当于
1.0mg
葡萄糖?/p>
3.
仪器
25ml
滴定管?/p>
250 ml
容量瓶?/p>
150ml
锥形瓶、玻璃珠?/p>
真空泵、电子天平、可
调电炉(带石棉板?/p>
4.
实验步骤
4.1
样品处理?/p>
一般食品是称取粉碎后的样品
2.5~5g
或吸?/p>
5
?/p>
25g
液体样品,置?/p>
250
ml
容量瓶中,加
50ml
水,摇匀。加?/p>
5ml
乙酸锌溶液及
5ml
亚铁氰化钾溶液,
加水至刻度,混匀。静?/p>
30min
,用干燥滤纸过滤,弃去初滤液,滤液备用?/p>
4.2
标定碱性酒石酸铜溶液:
吸取
5.0g
碱性酒石酸铜甲液及乙液,于
150ml
锥形瓶中
加水
10ml,
加入玻璃
珠两粒,从滴定管滴加?/p>
9ml
葡萄糖或其他还原糖标液,控制?/p>
2min
内加热至
沸,趁热?/p>
1
?/p>
/2s
的速度继续滴加葡萄糖或其他还原糖标液至蓝色刚好褪去?/p>
即为终点,记录消耗体积,平行测定
3
次并取平均值,计算?/p>
10ml
酒石酸铜?/p>
液(甲、乙?/p>
5ml
)相当于多少葡萄糖或其他还原糖的质量?/p>
mg
)?/p>
4.3
试样溶液预测?/p>
吸取
5.0g
碱性酒石酸铜甲液及乙液,于
150ml
锥形瓶中
加水
10ml,
加入?/p>
璃珠两粒,控制在
2min
内加热至沸,保持沸腾以先快后慢的速度,从滴定管中
滴加试样溶液,病保持溶液沸腾状态,待溶液颜色变浅时,以
1
?/p>
/2
秒的速度
滴定,直至蓝色刚好褪去即为终点,记录样液消耗体积?/p>