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学习交流文档
免疫共沉淀实验原理及方?/p>
免疫共沉淀?/p>
CoIP
)概述及原理
免疫共沉淀?/p>
Co-Immunoprecipitation
?/p>
CoIP
)是研究蛋白
-
?/p>
白间相互作用的经典方法,
属于免疫沉淀技术的一类,
常被用于鉴定
特定蛋白复合物的中未知蛋白组分?/p>
免疫共沉淀的设计理念是?/p>
假设
一种已知蛋白是某个大的蛋白复合物的组成成员?/p>
那么利用这种蛋白
的特异性抗体,
就可能将整个蛋白复合物从溶液中“拉”下?/p>
(常?/p>
的“pul
l-
down”),进而可以用于鉴定这个蛋白复合物中的其他?/p>
知成员?/p>
免疫共沉淀的特点可以概括为两点?/p>
第一是天然状态,
第二
是蛋白复合物?/p>
免疫共沉淀的优势:
与其他研究蛋白质相互作用技术(?/p>
GST-Pull down
、酵母双?/p>
交等?/p>
相比?/p>
免疫共沉淀鉴定的相互作用蛋白是在细胞内与目的蛋?/p>
发生的天然结合,避免了人为的影响,因此符合体内实际情况,得到
的蛋白可信度更高?/p>
免疫共沉淀的局限性和注意事项?/p>
1.
免疫共沉淀是建立在蛋白复合物成员间彼此紧密结合的基础
上,意味着松散结合的蛋白组分很可能检测不到;