人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋?/p>
(NGAL)
酶联免疫分析
试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用?/p>
检测范围:
96T
0.2
μ
g/L -8
μ
g/L
使用目的?/p>
本试剂盒用于测定人血清?/p>
血浆及相关液体样本中中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋?/p>
(NGAL)
含量?/p>
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋?/p>
(NGAL)
水平。用纯化的人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋?/p>
(NGAL)
抗体包被微孔板,制成固相
抗体?/p>
往包被单抗的微孔中依次加入中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋?/p>
(NGAL)
?/p>
再与
HRP
标记的中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋?/p>
(NGAL)
抗体结合,形成抗?/p>
-
抗原
-
酶标抗体?/p>
合物,经过彻底洗涤后加底?/p>
TMB
显色?/p>
TMB
?/p>
HRP
酶的催化下转化成蓝色,并在酸?/p>
作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋?/p>
(NGAL)
呈正相关?/p>
用酶标仪?/p>
450nm
波长下测定吸光度
?/p>
OD
值)
?/p>
通过标准曲线计算样品
中人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋?/p>
(NGAL)
浓度?/p>
试剂盒组?/p>
1
30
倍浓缩洗涤液
20ml
×
1
?/p>
7
终止?/p>
6ml
×
1
?/p>
2
酶标试剂
6ml
×
1
?/p>
8
标准品(
16
μ
g/L
?/p>
0.5ml
×
1
?/p>
3
酶标包被?/p>
12
孔?/p>
8
?/p>
9
标准品稀释液
1.5ml
×
1
?/p>
4
样品稀释液
6ml
×
1
?/p>
10
说明?/p>
1
?/p>
5
显色?/p>
A
?/p>
6ml
×
1
?/p>
11
封板?/p>
2
?/p>
6
显色?/p>
B
?/p>
6ml
×
1/
?/p>
12
密封?/p>
1
?/p>
标本要求
1
.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验,可将标本放?/p>
-20
℃保存,但应避免反复冻融
2
.不能检测含
NaN3
的样品,?/p>
NaN3
抑制辣根过氧化物酶的?/p>
HRP
)活性?/p>
操作步骤
1.
标准品的稀释:
本试剂盒提供原倍标准品一支,
用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释?/p>
8
μ
g/L
5
号标准品
150
μ
l
的原倍标准品加入
150
μ
l
标准品稀释液
4
μ
g/L
4
号标准品
150
μ
l
?/p>
5
号标准品加入
150
μ
l
标准品稀释液
2
μ
g/L
3
号标准品
150
μ
l
?/p>
4
号标准品加入
150
μ
l
标准品稀释液
1
μ
g/L
2
号标准品
150
μ
l
?/p>
3
号标准品加入
150
μ
l
标准品稀释液
0.5
μ
g/L
1
号标准品
150
μ
l
?/p>
2
号标准品加入
150
μ
l
标准品稀释液