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部分内容来源于网络,有侵权请联系删除?/p>

 

表达载体的构建方法及步骤

 

 

一、载体的选择及如何阅读质粒图?/p>

 

 

目前,载体主要有病毒和非病毒两大?/p>

,

其中质粒

 

DNA 

是一种新的非病毒转基

因载体?/p>

 

一个合格质粒的组成要素?/p>

 

?/p>

1

)复制起始位?/p>

 

Ori 

即控制复制起始的位点。原核生?/p>

 

DNA 

分子中只?/p>

一个复制起始点。?/p>

 

真核生物

 

DNA 

分子有多个复制起始位点?/p>

 

?/p>

2

)抗生素抗性基因可以便于加以检测,?/p>

 

Amp+ ,Kan+ 

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3

)多克隆位点

 

MCS 

克隆携带外源基因片段

 

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4

?/p>

 

P/E 

启动?/p>

/

增强?/p>

 

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5

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Terms 

终止信号

 

?/p>

6

)加

 

poly

?/p>

A

)信号可以起到稳?/p>

 

mRNA 

作用

 

选择载体主要依据构建的目的,

同时要考虑载体中应有合适的限制酶切位点?/p>

?/p>

果构建的?/p>

 

的是要表达一个特定的基因,则要选择合适的表达载体?/p>

 

载体选择主要考虑下述

3

点:

 

?/p>

1

】构?/p>

 

DNA 

重组体的目的,克隆扩?/p>

/

基因表达,选择合适的克隆载体

/

?/p>

达载体?/p>

 

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2

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载体的类型:

 

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1

)克隆载体的克隆能力-据克隆片段大小

(大选大,小选小)。如

<10kb 

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一、载体的选择及如何阅读质粒图?/p>

 

 

目前,载体主要有病毒和非病毒两大?/p>

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其中质粒

 

DNA 

是一种新的非病毒转基

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一个合格质粒的组成要素?/p>

 

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即控制复制起始的位点。原核生?/p>

 

DNA 

分子中只?/p>

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真核生物

 

DNA 

分子有多个复制起始位点?/p>

 

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)抗生素抗性基因可以便于加以检测,?/p>

 

Amp+ ,Kan+ 

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3

)多克隆位点

 

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克隆携带外源基因片段

 

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作用

 

选择载体主要依据构建的目的,

同时要考虑载体中应有合适的限制酶切位点?/p>

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的是要表达一个特定的基因,则要选择合适的表达载体?/p>

 

载体选择主要考虑下述

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一、载体的选择及如何阅读质粒图?/p>

 

 

目前,载体主要有病毒和非病毒两大?/p>

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其中质粒

 

DNA 

是一种新的非病毒转基

因载体?/p>

 

一个合格质粒的组成要素?/p>

 

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即控制复制起始的位点。原核生?/p>

 

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分子有多个复制起始位点?/p>

 

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克隆携带外源基因片段

 

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作用

 

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同时要考虑载体中应有合适的限制酶切位点?/p>

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的是要表达一个特定的基因,则要选择合适的表达载体?/p>

 

载体选择主要考虑下述

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一、载体的选择及如何阅读质粒图?/p>

 

 

目前,载体主要有病毒和非病毒两大?/p>

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是一种新的非病毒转基

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分子中只?/p>

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)多克隆位点

 

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克隆携带外源基因片段

 

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作用

 

选择载体主要依据构建的目的,

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载体选择主要考虑下述

3

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重组体的目的,克隆扩?/p>

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