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《分子生物学》教?/p>

 

 

E DNA 

复制

 

教学目的和要?/p>

 

1 

理解

DNA

复制的半保留机制和半不连续复?/p>

 

2 

掌握细菌

DNA

复制过程及有重要作用的酶和蛋白质

 

3

了解细胞周期

 

4 

了解真核生物

DNA

复制的特?/p>

 

E1 DNA

复制概述

 

半保留机?/p>

 

 

DNA

两条亲代链分别作为模板催化新生子链的合成,新?/p>

DNA

的一条链?/p>

原来的旧链,

另一条是新合成的?/p>

为半保留复制?/p>

Meselson 

?/p>

 

Stahl (1958

?/p>

)

用实验证明了

该机制(见教?/p>

P71

?/p>

。亲代链分开及新?/p>

DNA

开始复制处称为复制叉?/p>

DNA

合成的底?/p>

是脱氧核苷三磷酸

?/p>

dNTP 

?/p>

:dATP 

 

 

dGTP 

 

?/p>

 

dCTP 

 

?/p>

 

 

dTTP 

 

?/p>

合成的能量来?/p>

 

dNTP

的水解?/p>

 

复制子、复制起始与终点

 

 

以单一单位复制的任一?/p>

DNA

都称为复制子。每个复制子都有

固定的起始点,原核生物许多病毒的

DNA 

呈环形,为单一复制子,通常两个复制叉从一?/p>

起始点向两个方向复制?/p>

复制的起始和细胞生长周期调节都在起始点处调节?/p>

真核生物的线

性染色体由多复制子构成,每个复制子都有自己的起始点,起始点在最初解链处富含

AT

?/p>

列,它比富含

GC

的起始点更易解链?/p>

 

半不连续复制

 

 

由于

DNA

新链合成只允许以

5/

?/p>

3/ 

 

方向

 

进行,而两条亲本链反向平行?/p>

因而一条新链从起始点按

 

5/

?/p>

3/ 

 

方向连续合成(前导链?/p>

,另一条新链(后随链)从复?/p>

叉开始按

 

5/

?/p>

3/ 

 

方向先合成一些短?/p>

DNA

片段(冈崎片段)

,再由连接酶连成一条连?/p>

?/p>

DNA

。即前导链连续合成为长链,后随链则是间断合成的,这种合成方式为半不连续复

制?/p>

 

RNA

引导

 

 

在每一片段?/p>

5/ 

端先合成一小段

RNA

(引物)

,引?/p>

DNA

合成?/p>

 

E2 

细菌?/p>

DNA

复制

 

 

 

 

起始

 

 

 

 

 

 

E.coli

的起始点位于遗传基因?/p>

 

oriC

?/p>

大肠杆菌编码的蛋?/p>

 

DnaA

首先识别和结

合于

 

oriC

?/p>

9bp

重复序列形成复合物,

?/p>

45bp

成为单链?/p>

 

DnaB

进入?/p>

它是

DNA

解旋酶,

利用

ATP

水解产生的能量解开双链

DNA

?/p>

形成的单链泡被单链结合蛋?/p>

 

 

Ssb

所覆盖?/p>

DNA

引发酶结合到

DNA

上并合成引物

RNA

?/p>

 

解旋

 

 

 

 

 

DNA

解旋酶沿模板链前进,打开双螺旋使复制顺利进行,在闭环

DNA

中复制叉

处解旋所形成的正超螺旋可通过Ⅱ型拓扑异构酶即

DNA

旋转酶的作用而释放?/p>

 

延伸

 

 

 

 

DNA

聚合酶Ⅲ的全酶二聚体引发体和

DNA

解旋酶结合成复合体(复制体)

,以?/p>

?/p>

900bp

的速率合成

DNA

。引发体含有

 

DnaB

解旋酶和

DNA

引物酶,在后续链上间断合

?/p>

RNA

引物?/p>

 

DNA

聚合酶Ⅲ催化合成

DNA

,该酶含有聚合酶

α

亚基和一?/p>

3/ 

 

?/p>

5/

外切

核酸?/p>

ε

亚基?/p>

DNA

聚合酶Ⅰ负责切除引物并填补缺口,

该酶具有

5/ 

?/p>

 

 

3/ 

聚合酶?/p>

5/ 

?/p>

 

 

3/ 

外切核酸酶及

3/ 

 

?/p>

5/

校正外切核酸酶活性?/p>

DNA

连接酶填补片段间的缺口?/p>

 

终止与分?/p>

 

 

两个复制叉在

 

oriC

?/p>

1800

的对面相遇?/p>

该区域有终止子位点,

它们?/p>

 

DnaB

抑制剂(

tus

基因的产物)结合,阻止复制叉移动。复制结束后两个相扣的子?/p>

DNA

由拓

扑异构酶Ⅳ(一种Ⅱ型拓扑异构酶)解联,分配到两个子细胞?/p>

 

E3 

 

 

细胞周期

 

 

 

细胞周期

 

 

 

细胞分裂为两个子细胞的全部过程为细胞周期,它包括

DNA

的复制和细胞?/p>

裂。细胞周期分

4

个时期:

G1

期—细胞为复制作准备;

S

期?/p>

DNA

复制?/p>

G2

期?/p>

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复制

 

教学目的和要?/p>

 

1 

理解

DNA

复制的半保留机制和半不连续复?/p>

 

2 

掌握细菌

DNA

复制过程及有重要作用的酶和蛋白质

 

3

了解细胞周期

 

4 

了解真核生物

DNA

复制的特?/p>

 

E1 DNA

复制概述

 

半保留机?/p>

 

 

DNA

两条亲代链分别作为模板催化新生子链的合成,新?/p>

DNA

的一条链?/p>

原来的旧链,

另一条是新合成的?/p>

为半保留复制?/p>

Meselson 

?/p>

 

Stahl (1958

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)

用实验证明了

该机制(见教?/p>

P71

?/p>

。亲代链分开及新?/p>

DNA

开始复制处称为复制叉?/p>

DNA

合成的底?/p>

是脱氧核苷三磷酸

?/p>

dNTP 

?/p>

:dATP 

 

 

dGTP 

 

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合成的能量来?/p>

 

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的水解?/p>

 

复制子、复制起始与终点

 

 

以单一单位复制的任一?/p>

DNA

都称为复制子。每个复制子都有

固定的起始点,原核生物许多病毒的

DNA 

呈环形,为单一复制子,通常两个复制叉从一?/p>

起始点向两个方向复制?/p>

复制的起始和细胞生长周期调节都在起始点处调节?/p>

真核生物的线

性染色体由多复制子构成,每个复制子都有自己的起始点,起始点在最初解链处富含

AT

?/p>

列,它比富含

GC

的起始点更易解链?/p>

 

半不连续复制

 

 

由于

DNA

新链合成只允许以

5/

?/p>

3/ 

 

方向

 

进行,而两条亲本链反向平行?/p>

因而一条新链从起始点按

 

5/

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3/ 

 

方向连续合成(前导链?/p>

,另一条新链(后随链)从复?/p>

叉开始按

 

5/

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3/ 

 

方向先合成一些短?/p>

DNA

片段(冈崎片段)

,再由连接酶连成一条连?/p>

?/p>

DNA

。即前导链连续合成为长链,后随链则是间断合成的,这种合成方式为半不连续复

制?/p>

 

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引导

 

 

在每一片段?/p>

5/ 

端先合成一小段

RNA

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DNA

合成?/p>

 

E2 

细菌?/p>

DNA

复制

 

 

 

 

起始

 

 

 

 

 

 

E.coli

的起始点位于遗传基因?/p>

 

oriC

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大肠杆菌编码的蛋?/p>

 

DnaA

首先识别和结

合于

 

oriC

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9bp

重复序列形成复合物,

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45bp

成为单链?/p>

 

DnaB

进入?/p>

它是

DNA

解旋酶,

利用

ATP

水解产生的能量解开双链

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形成的单链泡被单链结合蛋?/p>

 

 

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所覆盖?/p>

DNA

引发酶结合到

DNA

上并合成引物

RNA

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解旋

 

 

 

 

 

DNA

解旋酶沿模板链前进,打开双螺旋使复制顺利进行,在闭环

DNA

中复制叉

处解旋所形成的正超螺旋可通过Ⅱ型拓扑异构酶即

DNA

旋转酶的作用而释放?/p>

 

延伸

 

 

 

 

DNA

聚合酶Ⅲ的全酶二聚体引发体和

DNA

解旋酶结合成复合体(复制体)

,以?/p>

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900bp

的速率合成

DNA

。引发体含有

 

DnaB

解旋酶和

DNA

引物酶,在后续链上间断合

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DNA

聚合酶Ⅲ催化合成

DNA

,该酶含有聚合酶

α

亚基和一?/p>

3/ 

 

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5/

外切

核酸?/p>

ε

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DNA

聚合酶Ⅰ负责切除引物并填补缺口,

该酶具有

5/ 

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3/ 

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5/ 

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3/ 

外切核酸酶及

3/ 

 

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5/

校正外切核酸酶活性?/p>

DNA

连接酶填补片段间的缺口?/p>

 

终止与分?/p>

 

 

两个复制叉在

 

oriC

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1800

的对面相遇?/p>

该区域有终止子位点,

它们?/p>

 

DnaB

抑制剂(

tus

基因的产物)结合,阻止复制叉移动。复制结束后两个相扣的子?/p>

DNA

由拓

扑异构酶Ⅳ(一种Ⅱ型拓扑异构酶)解联,分配到两个子细胞?/p>

 

E3 

 

 

细胞周期

 

 

 

细胞周期

 

 

 

细胞分裂为两个子细胞的全部过程为细胞周期,它包括

DNA

的复制和细胞?/p>

裂。细胞周期分

4

个时期:

G1

期—细胞为复制作准备;

S

期?/p>

DNA

复制?/p>

G2

期?/p>

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复制

 

教学目的和要?/p>

 

1 

理解

DNA

复制的半保留机制和半不连续复?/p>

 

2 

掌握细菌

DNA

复制过程及有重要作用的酶和蛋白质

 

3

了解细胞周期

 

4 

了解真核生物

DNA

复制的特?/p>

 

E1 DNA

复制概述

 

半保留机?/p>

 

 

DNA

两条亲代链分别作为模板催化新生子链的合成,新?/p>

DNA

的一条链?/p>

原来的旧链,

另一条是新合成的?/p>

为半保留复制?/p>

Meselson 

?/p>

 

Stahl (1958

?/p>

)

用实验证明了

该机制(见教?/p>

P71

?/p>

。亲代链分开及新?/p>

DNA

开始复制处称为复制叉?/p>

DNA

合成的底?/p>

是脱氧核苷三磷酸

?/p>

dNTP 

?/p>

:dATP 

 

 

dGTP 

 

?/p>

 

dCTP 

 

?/p>

 

 

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?/p>

合成的能量来?/p>

 

dNTP

的水解?/p>

 

复制子、复制起始与终点

 

 

以单一单位复制的任一?/p>

DNA

都称为复制子。每个复制子都有

固定的起始点,原核生物许多病毒的

DNA 

呈环形,为单一复制子,通常两个复制叉从一?/p>

起始点向两个方向复制?/p>

复制的起始和细胞生长周期调节都在起始点处调节?/p>

真核生物的线

性染色体由多复制子构成,每个复制子都有自己的起始点,起始点在最初解链处富含

AT

?/p>

列,它比富含

GC

的起始点更易解链?/p>

 

半不连续复制

 

 

由于

DNA

新链合成只允许以

5/

?/p>

3/ 

 

方向

 

进行,而两条亲本链反向平行?/p>

因而一条新链从起始点按

 

5/

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3/ 

 

方向连续合成(前导链?/p>

,另一条新链(后随链)从复?/p>

叉开始按

 

5/

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3/ 

 

方向先合成一些短?/p>

DNA

片段(冈崎片段)

,再由连接酶连成一条连?/p>

?/p>

DNA

。即前导链连续合成为长链,后随链则是间断合成的,这种合成方式为半不连续复

制?/p>

 

RNA

引导

 

 

在每一片段?/p>

5/ 

端先合成一小段

RNA

(引物)

,引?/p>

DNA

合成?/p>

 

E2 

细菌?/p>

DNA

复制

 

 

 

 

起始

 

 

 

 

 

 

E.coli

的起始点位于遗传基因?/p>

 

oriC

?/p>

大肠杆菌编码的蛋?/p>

 

DnaA

首先识别和结

合于

 

oriC

?/p>

9bp

重复序列形成复合物,

?/p>

45bp

成为单链?/p>

 

DnaB

进入?/p>

它是

DNA

解旋酶,

利用

ATP

水解产生的能量解开双链

DNA

?/p>

形成的单链泡被单链结合蛋?/p>

 

 

Ssb

所覆盖?/p>

DNA

引发酶结合到

DNA

上并合成引物

RNA

?/p>

 

解旋

 

 

 

 

 

DNA

解旋酶沿模板链前进,打开双螺旋使复制顺利进行,在闭环

DNA

中复制叉

处解旋所形成的正超螺旋可通过Ⅱ型拓扑异构酶即

DNA

旋转酶的作用而释放?/p>

 

延伸

 

 

 

 

DNA

聚合酶Ⅲ的全酶二聚体引发体和

DNA

解旋酶结合成复合体(复制体)

,以?/p>

?/p>

900bp

的速率合成

DNA

。引发体含有

 

DnaB

解旋酶和

DNA

引物酶,在后续链上间断合

?/p>

RNA

引物?/p>

 

DNA

聚合酶Ⅲ催化合成

DNA

,该酶含有聚合酶

α

亚基和一?/p>

3/ 

 

?/p>

5/

外切

核酸?/p>

ε

亚基?/p>

DNA

聚合酶Ⅰ负责切除引物并填补缺口,

该酶具有

5/ 

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3/ 

聚合酶?/p>

5/ 

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3/ 

外切核酸酶及

3/ 

 

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5/

校正外切核酸酶活性?/p>

DNA

连接酶填补片段间的缺口?/p>

 

终止与分?/p>

 

 

两个复制叉在

 

oriC

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1800

的对面相遇?/p>

该区域有终止子位点,

它们?/p>

 

DnaB

抑制剂(

tus

基因的产物)结合,阻止复制叉移动。复制结束后两个相扣的子?/p>

DNA

由拓

扑异构酶Ⅳ(一种Ⅱ型拓扑异构酶)解联,分配到两个子细胞?/p>

 

E3 

 

 

细胞周期

 

 

 

细胞周期

 

 

 

细胞分裂为两个子细胞的全部过程为细胞周期,它包括

DNA

的复制和细胞?/p>

裂。细胞周期分

4

个时期:

G1

期—细胞为复制作准备;

S

期?/p>

DNA

复制?/p>

G2

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复制

 

教学目的和要?/p>

 

1 

理解

DNA

复制的半保留机制和半不连续复?/p>

 

2 

掌握细菌

DNA

复制过程及有重要作用的酶和蛋白质

 

3

了解细胞周期

 

4 

了解真核生物

DNA

复制的特?/p>

 

E1 DNA

复制概述

 

半保留机?/p>

 

 

DNA

两条亲代链分别作为模板催化新生子链的合成,新?/p>

DNA

的一条链?/p>

原来的旧链,

另一条是新合成的?/p>

为半保留复制?/p>

Meselson 

?/p>

 

Stahl (1958

?/p>

)

用实验证明了

该机制(见教?/p>

P71

?/p>

。亲代链分开及新?/p>

DNA

开始复制处称为复制叉?/p>

DNA

合成的底?/p>

是脱氧核苷三磷酸

?/p>

dNTP 

?/p>

:dATP 

 

 

dGTP 

 

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dCTP 

 

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?/p>

合成的能量来?/p>

 

dNTP

的水解?/p>

 

复制子、复制起始与终点

 

 

以单一单位复制的任一?/p>

DNA

都称为复制子。每个复制子都有

固定的起始点,原核生物许多病毒的

DNA 

呈环形,为单一复制子,通常两个复制叉从一?/p>

起始点向两个方向复制?/p>

复制的起始和细胞生长周期调节都在起始点处调节?/p>

真核生物的线

性染色体由多复制子构成,每个复制子都有自己的起始点,起始点在最初解链处富含

AT

?/p>

列,它比富含

GC

的起始点更易解链?/p>

 

半不连续复制

 

 

由于

DNA

新链合成只允许以

5/

?/p>

3/ 

 

方向

 

进行,而两条亲本链反向平行?/p>

因而一条新链从起始点按

 

5/

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3/ 

 

方向连续合成(前导链?/p>

,另一条新链(后随链)从复?/p>

叉开始按

 

5/

?/p>

3/ 

 

方向先合成一些短?/p>

DNA

片段(冈崎片段)

,再由连接酶连成一条连?/p>

?/p>

DNA

。即前导链连续合成为长链,后随链则是间断合成的,这种合成方式为半不连续复

制?/p>

 

RNA

引导

 

 

在每一片段?/p>

5/ 

端先合成一小段

RNA

(引物)

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DNA

合成?/p>

 

E2 

细菌?/p>

DNA

复制

 

 

 

 

起始

 

 

 

 

 

 

E.coli

的起始点位于遗传基因?/p>

 

oriC

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大肠杆菌编码的蛋?/p>

 

DnaA

首先识别和结

合于

 

oriC

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9bp

重复序列形成复合物,

?/p>

45bp

成为单链?/p>

 

DnaB

进入?/p>

它是

DNA

解旋酶,

利用

ATP

水解产生的能量解开双链

DNA

?/p>

形成的单链泡被单链结合蛋?/p>

 

 

Ssb

所覆盖?/p>

DNA

引发酶结合到

DNA

上并合成引物

RNA

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解旋

 

 

 

 

 

DNA

解旋酶沿模板链前进,打开双螺旋使复制顺利进行,在闭环

DNA

中复制叉

处解旋所形成的正超螺旋可通过Ⅱ型拓扑异构酶即

DNA

旋转酶的作用而释放?/p>

 

延伸

 

 

 

 

DNA

聚合酶Ⅲ的全酶二聚体引发体和

DNA

解旋酶结合成复合体(复制体)

,以?/p>

?/p>

900bp

的速率合成

DNA

。引发体含有

 

DnaB

解旋酶和

DNA

引物酶,在后续链上间断合

?/p>

RNA

引物?/p>

 

DNA

聚合酶Ⅲ催化合成

DNA

,该酶含有聚合酶

α

亚基和一?/p>

3/ 

 

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5/

外切

核酸?/p>

ε

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DNA

聚合酶Ⅰ负责切除引物并填补缺口,

该酶具有

5/ 

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3/ 

聚合酶?/p>

5/ 

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3/ 

外切核酸酶及

3/ 

 

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5/

校正外切核酸酶活性?/p>

DNA

连接酶填补片段间的缺口?/p>

 

终止与分?/p>

 

 

两个复制叉在

 

oriC

?/p>

1800

的对面相遇?/p>

该区域有终止子位点,

它们?/p>

 

DnaB

抑制剂(

tus

基因的产物)结合,阻止复制叉移动。复制结束后两个相扣的子?/p>

DNA

由拓

扑异构酶Ⅳ(一种Ⅱ型拓扑异构酶)解联,分配到两个子细胞?/p>

 

E3 

 

 

细胞周期

 

 

 

细胞周期

 

 

 

细胞分裂为两个子细胞的全部过程为细胞周期,它包括

DNA

的复制和细胞?/p>

裂。细胞周期分

4

个时期:

G1

期—细胞为复制作准备;

S

期?/p>

DNA

复制?/p>

G2

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期后?



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