鸭糖皮质激素(
GC
)酶联免疫分æž?/p>
试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用ã€?/p>
检测范围:
96T
12pg/ml -426 pg/ml
使用目的ï¼?/p>
本试剂盒用于测定鸭血清、血浆及相关液体样本中糖皮质激素(
GC
)含量ã€?/p>
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鸭糖皮质激素(
GC
)水平。用纯化的鸭糖皮è´?/p>
激ç´?/p>
ï¼?/p>
GC
ï¼?/p>
抗体包被微孔板,
制成固相抗体ï¼?/p>
往包被单抗的微孔中依次加入糖皮质激ç´?/p>
ï¼?/p>
GC
ï¼?/p>
ï¼?/p>
再与
HRP
标记的糖皮质激素(
GC
)抗体结合,形成抗体
-
抗原
-
酶标抗体复合物,经过彻底
洗涤后加底物
TMB
显色ã€?/p>
TMB
�/p>
HRP
酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最
终的黄色。颜色的深浅和样品中的糖皮质激素(
GC
)呈正相关。用酶标仪在
450nm
波长ä¸?/p>
测定吸光度(
OD
值)
,通过标准曲线计算样品中鸭糖皮质激素(
GC
)浓度ã€?/p>
试剂盒组æˆ?/p>
1
30
倍浓缩洗涤液
20ml
×
1
ç“?/p>
7
终止æ¶?/p>
6ml
×
1
ç“?/p>
2
酶标试剂
6ml
×
1
ç“?/p>
8
标准品(
800pg/ml
ï¼?/p>
0.5ml
×
1
ç“?/p>
3
酶标包被æ�?/p>
12
孔Ã?/p>
8
�/p>
9
标准品稀释液
1.5ml
×
1
ç“?/p>
4
样品稀释液
6ml
×
1
ç“?/p>
10
说明ä¹?/p>
1
ä»?/p>
5
显色å‰?/p>
A
æ¶?/p>
6ml
×
1
ç“?/p>
11
封板è†?/p>
2
å¼?/p>
6
显色å‰?/p>
B
æ¶?/p>
6ml
×
1/
ç“?/p>
12
密封è¢?/p>
1
�/p>
标本要求
1
.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验,可将标本放äº?/p>
-20
℃保存,但应避免反复冻融
2
.不能检测含
NaN3
的样品,å›?/p>
NaN3
抑制辣根过氧化物酶的ï¼?/p>
HRP
)活性ã€?/p>
操作步骤
1.
标准品的稀释:
本试剂盒提供原倍标准品一支,
用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释ã€?/p>
400pg/ml
5
号标准品
150
μ
l
的原倍标准品加入
150
μ
l
标准品稀释液
200pg/ml
4
号标准品
150
μ
l
çš?/p>
5
号标准品加入
150
μ
l
标准品稀释液
100pg/ml
3
号标准品
150
μ
l
çš?/p>
4
号标准品加入
150
μ
l
标准品稀释液
50pg/ml
2
号标准品
150
μ
l
çš?/p>
3
号标准品加入
150
μ
l
标准品稀释液
25pg/ml
1
号标准品
150
μ
l
çš?/p>
2
号标准品加入
150
μ
l
标准品稀释液
2.
加样ï¼?/p>
分别设空白孔
(空白对照孔不加样品及酶标试剂,
其余各步操作相同ï¼?/p>
、标准孔ã€?
待测样品孔ã€?/p>
在酶标包被板上标准品准确加样
50
μ
l
ï¼?/p>
待测样品孔中先加样品稀释液
40
μ
l
ï¼?