M13
鍣弻浣?/p>
M13 phage
涓�绉嶄笣鐘跺櫖鑿屼綋锛屽彲鎰熸煋鍚?/p>
F
鍥犲瓙鐨勫ぇ鑲犳潌鑿岀粏鑳炪�?/p>
閬椾紶瀛?/p>
锛堜竴绾у绉戯級锛?/p>
鍒嗗瓙閬椾紶瀛?/p>
锛堜簩绾у绉戯級
M13
鍣弻浣撴槸涓�绉嶄笣鐘?/p>
鍣弻浣擄紝
鍐呮湁涓�涓幆鐘跺崟
閾?/p>
DNA
鍒?/p>
瀛愶紝
闀?/p>
6407
涓牳鑻烽吀锛?/p>
鍚?/p>
DNA
澶嶅埗鍜屽櫖鑿屼綋澧炴畺鎵�闇�鐨勯仐浼犱俊鎭�?/p>
M13DNA
鐨勫
鍒惰捣濮?/p>
浣嶇偣瀹氫綅鍦ㄥ熀
鍥犻棿闅斿尯鍐呫�備絾鏄熀鍥犻棿闅斿尯鐨?/p>
鏈変簺鏍歌嫹閰稿簭鍒楀嵆浣垮彂鐢熺獊
鍙樸�佺己澶辨椿鎻?/p>
鍏ュ婧?/p>
DNA
鐗囨锛屼篃涓嶄細褰?/p>
鍝?/p>
M13DNA
鐨勫鍒讹紝
杩欎负
M13DNA
鏋勫缓鍏嬮殕杞戒綋
鎻愪緵浜嗘潯浠躲�?/p>
鍏朵腑
M13mp
绯?/p>
鍒楀閲庣敓鍨?/p>
M13
鍔犱互鏀归�狅紝鎻掑叆
浜嗗鍏嬮殕浣嶇偣鍜?/p>
LacZ
鍩?/p>
鍥狅紝鍙绾冲婧?/p>
DNA300-400bp
锛屽彲鐢ㄤ簬鍒跺
DNA
娴嬪簭
鏃?/p>
鐢ㄧ殑鍗曢摼妯℃澘
鍜屾牳閰告帰閽堛�?/p>
瀹冩槸涓�绉嶈川绮掕浇浣撱�?/p>
M13
鍣弻浣撳湪鎰熸煋闆勬�уぇ鑲犳潌鑿岋紙
F+
鎴?/p>
Hfr
锛夋椂锛岄兘鏄互涓�绔惛闄勫湪
F
鍨嬭弻姣涚殑椤剁锛?/p>
鎵�浠ョО涓?/p>
F
鐗瑰紓鎬т笣鐘跺櫖鑿屼綋銆傝�屽闆屾�уぇ鑲犳潌鑿岋紙
F-
锛変笉鏁忔劅銆傛墍浠?/p>
Hfr
鍨嬬殑澶ц偁鏉嗚弻鍜?/p>
鎼哄甫
F'
璐ㄧ矑鐨勫ぇ鑲犳潌鑿岄兘鑳借鎰熸煋
鐩稿叧搴旂敤閰嶇疆锛?/p>
M13
鍣弻浣撳崟閾惧熀鍥犵粍
DNA
蹇�熸彁鍙栬瘯鍓傜洅
鐩稿叧渚嬪瓙锛氬厰鎶?/p>
M13
鍣弻浣撻叾鏍囨姉浣撶殑鍒跺锛?/p>
M13
鍣弻浣?/p>
宸茶骞挎硾鍦板簲鐢ㄤ簬鍣弻浣撳睍绀?/p>
鎶�鏈�?/p>
M13
鐨勯叾鏍?/p>
鎶椾綋
,
鏄湪鍣弻浣撳睍绀烘妧鏈瓫閫夌粨鏋?/p>
ELISA
妫�娴嬩腑涓嶅彲缂哄皯鐨?/p>
璇曞墏
銆傛垜
浠埗澶囦簡鍏旀姉
M13
鎶楄娓?/p>
,
鍏?/p>
鏁堜环
楂樹簬
1:6000;
缁忎袱姝ラケ鍜?/p>
纭吀閾垫矇娣�
,
鍒濇绾寲浜嗗厰鎶?/p>
M13
鎶椾綋
;
鐢?/p>
杩囩閰搁挔
娉曞鎶椾綋杩涜浜嗚荆鏍?/p>
杩囨哀鍖栭叾
鐨?/p>
鏍囪
,
閰?/p>
鏍囪鎶椾綋
娲绘�т负
1:6400
銆?/p>
鍣弻浣撻噴鏀炬柟寮忥細
M13
鍣弻浣撴憾婧愭�э紝涓嶈瑙ｅ涓昏弻銆傛瀬澶у湴绠�鍖栦簡姣忚疆娣橀�夎繃绋嬩腑鐨勫櫖鑿屼綋绾寲
姝ラ锛屽彧鐢ㄧ畝鍗曠殑
PEG
娌夋穩鏂规硶鍗冲彲銆?/p>
铻嶅悎鏂瑰紡锛?/p>
M13
鍣弻浣?/p>
N
绔笌
pIII
铔嬬櫧铻嶅悎锛屼笉閫傚悎鍏嬮殕
cDNA
锛屽洜涓?/p>
cDNA
涓负
oligo
d(T))
甯镐綅浜庣炕璇?/p>
缁堟瀵嗙爜瀛愮殑涓嬫父銆?/p>
铻嶅悎搴忓垪澶у皬锛?/p>
M13
鍣弻浣撳睍绀鸿偨搴撲负
7
鑲姐�?/p>
12
鑲藉拰鐜?/p>
7
鑲?/p>
NEBM13
鍣弻浣撳睍绀鸿偨搴撳彲鐢ㄤ簬瀹氫綅鎶楀師鍐冲畾绨囷紝
纭畾铔嬬櫧璐ㄧ浉浜掍綔鐢ㄤ綅鐐癸紝
閴村畾閰剁殑搴曠墿鎴栨姂鍒剁墿锛?/p>
閴村畾鍙椾綋婵�娲荤墿鎴栨姂鍒跺墏锛?/p>
鐮斿埗澶氳偨鑽墿锛屽紑鍙戞柊鑽紝
鑲跨槫娌荤枟鍜?/p>
鐤嫍鍒堕�狅紝鐢ㄩ�斿箍娉?/p>
M13
鍣弻浣撴劅鏌撻泟鎬уぇ鑲犳潌鑿岄渶瑕佸畬鏁寸殑
F
鑿屾瘺锛岄�氳繃
F
鍥犲瓙缂栫爜鐨勬�ц弻姣涜繘鍏ュ涓荤粏鑳炲唴锛屽鏋滃櫖鑿?/p>
浣?/p>
DNA
閫氳繃鎰熸煋瀵煎叆缁嗚弻锛岄偅涔堜篃鍙互鎰熸煋闆屾�уぇ鑲犳潌鑿岋紝浣嗘槸閫氳繃杞煋浜х敓鐨勫瓙浠ｉ绮掍笉鑳芥劅鏌撳煿鍏?/p>
鍩轰腑鐨勫叾浠栫粏鑿岋紝鎵�浠ョ梾姣掔殑浜ч噺寰堝皯
鍗曢摼鍜屽弻閾?/p>
M13
鍣弻浣?/p>
DNA
鐨勫ぇ瑙勬ā鍒跺锛?/p>
杩欎釜鏂规涓昏鐢ㄤ簬鍒跺澶ч噺
M13
鍣弻浣?/p>
鐨勫弻
閾?/p>
DNA
锛屽洜鍦ㄥ疄楠屽涓?/p>
M13
鍣弻浣撶粡甯歌鐢ㄤ綔鍏嬮殕杞戒綋锛屼互鍙婂湪鏌愪簺鐗规畩鐢ㄩ�旀椂闇�瑕佸埗澶囧ぇ閲忕殑鍗曢摼
鍣?