D随机的非互补结合
5 已知胰凝乳蛋白酶的转换数是100s-1，DNA聚合酶是15s-1。下列说法正确的是（ ） A 胰凝乳蛋白酶的底物结合常数高于DNA聚合酶
B 胰凝乳蛋白酶反应速度比DNA聚合酶反应速度更大
C 在一定的酶浓度和饱和底物水平下胰凝乳蛋白酶反应速度比DNA聚合酶在相同条件下更低
D 在饱和底物水平下，胰凝乳蛋白酶的反应速度大约是DNA聚合酶反应速度的6.7倍
四、问答及计算题
1何为酶的活力和比活力？测定酶活力时应注意什么？为什么测定酶活力时以测定初速度为宜，并且底物浓度远远大于酶浓度？
2已糖激酶溶液在45℃，12min内会丢失50%活性。但是当有大量底物葡萄糖存在时，该酶在45℃只丢失3%活性。试解释此现象。
9甘油醛-3-磷酸脱氢酶，相对分子质量为4万，由4个相同亚基组成，每个亚基上有一个活性位点，在最适条件下，5ug纯酶制品每分钟可以催化2.8umol甘油醛-3-磷酸转化为甘油酸-3-磷酸。请计算酶的比活力和单个活性位点的转换数。
10α-糜蛋白酶（Mr 24 000）可以水解苯甲酰-L-酪氨酸乙酯。比活为45.0umol/min/mg酶。已知α-糜蛋白酶只有一个活性位点。求转换数。
11 （1）对于一个遵循米氏动力学的酶而言，当[S] = Km时，若υ= 35umol/min，Vmax是多少umol/min？
（2）当[S] = 2×10-5mol/L，υ= 40umol/min，这个酶的Km是多少？
（3）若I表示竞争性抑制剂，KI=4×10-5mol/L，当[S] =3×10-2mol/L和[I]= 3×10-5mol/L时，υ是多少？
12 在不同底物浓度的反应体系中，分别测有无抑制剂存在时的υ，数据如下：
-4
[S] 无I 有I（2.2×10mol/L）
-4
mol/L(×10) v(μmol/min) v(μmol/min) 1.0 28 17 1.5 36 23 2.0 43 29 5.0 65 50 7.5 74 61
求有无抑制剂存在时的Vmax和Km(Kˊm),并判断这种抑制剂是什么类型的抑制剂。 13 称取25mg蛋白酶粉配制成25mL酶溶液，从中取出0.1mL酶液，以酪蛋白为底物，用Folin-酚比色法测定酶活力，得各每小时产生1500ug酪氨酸。另取2mL酶液，用凯氏定氮法测得蛋白氮为0.2mg。若以每分钟产生1ug酪氨酸的酶量为1个活力单位计算，根据以上数据，求出：（1）1mL酶液中所含蛋白质量及活力单位；（2）比活力；（3）1g酶制剂的总蛋白量及总活力。
参 考 答 案
一、填充题
1酶蛋白 辅酶因子 酶蛋白 辅酶因子 2 凹穴 疏水 3 核酶（具有催化作用的RNA） 4酶的辅助因子 直接的激活剂 5 2 4 5 6 碱性氨基酸 碱性 7 n 小 8 远远超过酶浓度 最适温度 最适 初 9 酶的活力单位数 10 81
11 绝对 立体 12 –1/Km 1/Vmax 13 亚基解离
14 正碳离子 五价磷过渡态 Zn2+-活化水 四面体肽键 氧阴离子 活化水
15 无酶时不反应 被靶酶专一性激活 与靶酶反应必须比解离更为迅速，即K1＞＞Kdis 16 最慢的 第一步反应 17 酶活性中心 18 别构酶 共价调节酶 齐变 序变 19丝氨酸 20蛋白激酶 蛋白磷酸酯酶
21糖基化 乙酰化 γ-羧基化 ADP-核糖基化 22天冬氨酸 组氨酸 23腺苷酰化 脱腺苷酰化 24比活力 总活力 25增大 变小
二、是非题
1错 2对 3对 4错 5错 6对 7错 8错 9错 10错 11对 12对13错 14对 15错 16错 17错 18错 19对 20对 21对22错23对 24错25对 26对27错 28错 29错 30对
三、选择题1D 2B 3A 4A 5D6D 7D 8B 9A 10C 11C 12B 13A 14B 15A
16B 17B 18B 19C 20D
四、问答及计算题
1酶活力指酶催化某一化学反应的能力，可以用一定条件下所催化的化学反应的反应速度来表示。
酶比活力指一定量的酶，例如1mg或1g等，所具有的总的活力。
由于酶催化的反应只在反应初始阶段具有恒定的速率，因此测定酶的活力以测定初速度为宜。
由于酶的活性受到测定环境如底物浓度、pH、温度、抑制剂、激活剂等影响，因此酶活力测定要选择最适条件，包括最适pH、最适温度、最适底物浓度、最适离子强度等。由于酶活力与酶量是成正比的，为保证所有的酶都能结合底物，参与反应，底物浓度要远远大于酶浓度。
2 已糖激酶能催化葡萄糖与ATP反应，使葡萄糖磷酸化。在无ATP时，葡萄糖与已糖激酶结合，能稳定游离酶分子，抵抗酶变性。由于无ATP，不会发生上述反应。 9 比活力=2.8U/5×10-3mg = 560 U/ mg
转换数/活性位点=2.8umol/min÷(5ug/40 000ug/umol×4) = 5600/min = 93.3/s 10转换数=45.0×10-6×1 000×24 000=1 080/min 11答：（1）Vmax= 70umol/min （2）Km=1.5×10-5mol/L
（3）因为，[S]﹥﹥Km,[I],所以，υ= Vmax= 70umol/min
12答：先分别求出1/[S]，1/V，1/V′，作1/V∽1/[S]，1/V′∽1/[S]图，从图中求出：1/Vmax = 0.01 min/μmol Vmax = 100μmol/min
3-4
-1/ Km = -3.7×10L/ mol Km = 2.7×10mol/L
3-4
-1/ Kˊm = -2.0×10L/ mol Kˊm = 5×10mol/L 因为Vmax不变，Km增大，所以是竞争性可逆抑制。 13答：（1）0.625mg蛋白质；250U （2）400U/mg蛋白质 （3）0.625g；2.5×105U
第五章：核酸化学
一、填充题
1、核酸完全的水解产物是（ ）、（ ）和（ ） 。其中（ ） 又可分为（ ）碱和（ ）碱。 2、体内的嘌呤主要有（ ）和（ ）；嘧啶碱主要有（ ）、（ ）和（ ）。某些RNA分子中还含有微量的其它碱基，称为（ ）。 3、嘌呤环上的第（ ）位氮原子与戊糖的第（ ）位碳原子相连形成（ ）键，通过这种键相连而成的化合物叫（ ）。
4、体内两种主要的环核苷酸是（ ）和（ ）。 5、写出下列核苷酸符号的中文名称：ATP（ ）；dCDP（ ）。 6、RNA的二级结构大多数是以单股（ ）的形式存在，但也可局部盘曲形成（ ）结构，典型的tRNA结构是（ ）结构。 7、tRNA的三叶草型结构中有（ ）环，（ ）环，（ ）环及（ ）环，还有（ ）。
8、tRNA的三叶草型结构中，其中氨基酸臂的功能是（ ），反密码环的功能是（ ）。
9、其中一股链为5’ATGCC3’的双螺旋DNA的互补链顺序是（ ）。
二、是非题
1 稀有碱基是指细胞中含量很少的游离嘌呤或嘧啶。（ ）
2 如果DNA样品A的Tm低于DNA样品B 的Tm，那么样品A含有的A-T碱基对高于样品B 。（ ）
3 由于DNA是多阴离子，所以它的熔点随盐物质质量浓度增加而增加。（ ） 4 超速离心测定DNA相对分子质量时待测DNA溶液应具有较高浓度。（ ） 5 “荷载的”tRNA指结合有氨基酸的tRNA。（ ） 6 包括核糖体在内的所有RNP，蛋白质是其主要的功能成分，核酸则作为结构成分。（ ） 7 用碱水解核酸，可以得到纯的3ˊ-核苷酸的混合物。（ ）
8 对于提纯的DNA样品，测得OD260/OD280＜1.8，则说明样品中有蛋白质残留。（ ） 9 真核生物成熟mRNA的两端均带有游离的3ˊ-OH。（ ） 10 rRNA在蛋白质合成中只起到装配者作用，而tRNA不但具有携带氨酸功能并有解译作用。
三、选择题
1、自然界游离核苷酸中，磷酸最常见是位于（ ） A 戊糖的C-5′上 B 戊糖的C-2′上
C 戊糖的C-3′上 D 戊糖的C-2′和C-5′上
2、可用于测量生物样品中核酸含量的元素是（ ） A 碳 B 氢 C 氧 D 磷
3、下列哪种碱基只存在于RNA而不存在于DNA（ ） A 尿嘧啶 B 腺嘌呤 C 胞嘧啶 D 胸腺嘧啶 4、 核酸中核苷酸之间的连接方式是（ ） A 2′，3′磷酸二酯键 B 糖苷键
C 2′，5′磷酸二酯键 D 3′，5′磷酸二酯键
5、 核酸对紫外线的最大吸收峰在哪一波长附近（ ） A 280nm B 260nm
C 200nm D 340nm 6、 DNA变性是指（ ）
A 分子中磷酸二酯键断裂 B 多核苷酸链解聚
C DNA分子由超螺旋→双链双螺旋 D 互补碱基之间氢键断裂 7、 DNA Tm值较高是由于下列哪组核苷酸含量较高所致（ ） A G+A B C+G C A+T D C+T
8 某DNA分子中腺嘌呤的含量为15%，则胞嘧啶的含量应为（ ） A 15% B 30% C 40% D 35% 9、寡聚dT-纤维素柱层析用于（ ）。 A 从总DNA中分离纯化质粒DNA B 从总核蛋白中分离出DNP
C从总RNA中纯化mRNA D 除去杂蛋白 10、双链DNA热变性后（ ）
A 黏度下降 B 沉降系数下降 C 浮力密度下降 D 紫外吸收下降
四、问答题
1DNA的Walson-Crick双螺旋结构模型要点是什么？
2 DNA在纯水室温下放置时，为什么线状双链DNA 会分离成它的组成链？ 3 预测所给样品各组成部分的相对迁移速度或相对沉降位置.
（1）琼脂糖凝胶电泳分离某质粒DNA的环状、开环形、线形和变性无规则线团的混合物。 （2）氯化铯密度梯度离心分离长度相同的两种DNA的混合物，A来自一种嗜热菌，B来自大肠杆菌。
4 下列哪些物质能降低双链DNA的Tm值？并解释它们的作用方式。 SSB；核组蛋白；氯化钠；甲酰胺；碱
5 某细菌DNA相对分子质量为4.0×108，求（1）此DNA分子长度；（2）此DNA分子的体积；（3）此DNA分子含多少个螺旋？
6 某DNA分子的浮力密度是1.699g/cm3，求其含（G-C）%？ 7 试用酶学方法来区别：（1）单链DNA和双链DNA；（2）线状DNA和环状DNA
参 考 答 案
一、填充题
1磷酸 含氮碱 戊糖 含氮碱 嘌呤 嘧啶
2．腺嘌呤 鸟嘌呤 胞嘧啶 尿嘧啶 胸腺嘧啶 稀有碱基 3．9 1 糖苷键 嘌呤核苷 4．CAMP cGMP
5．三磷酸腺苷 脱氧二磷酸胞苷 6．多核苷酸链 双螺旋 三 叶草
7．二氢尿嘧啶 反密码 TφC 额外 氨基酸臂 8．与氨基酸结合 辨认密码子 9、5’GGCAT3’