、正误题（在题后的括号中打√或打×，每小题2分，共20分） 1.所有的蛋白质均由20种氨基酸组成。（ ） 2.蛋白质变性后的结果是溶解度降低。（ ）
3.血红蛋白是由两个α亚基和两个β亚基（α2β2）组成的。（ ） 4.蛋白质分子二级结构主要靠氢键维系。（ ）
5.酶和一般化学催化剂相比，仅仅是有更强的催化能力。（ ）
6.不能用透析、超滤等物理方法除去抑制剂而恢复酶活性称为酶的可逆抑制作用。（ ）
7. 镰刀型红细胞贫血病是一种先天遗传性的分子病，其病因是由于正常血红蛋白分子中的一个谷氨酸残基被缬氨酸残基所置换。（ ） 8.绝大部分酶的化学本质是蛋白质。（ ） 9. 天然氨基酸都有一个不对称α-碳原子。（ ） 10.酶动力学主要是研究酶的最适作用温度。（ ）
11. 在水溶液中，蛋白质溶解度最小时的pH值通常就是它的等电点。（ ） 12. 在蛋白质和多肽中，只有一种连接氨基酸残基的共价键，即肽键。（ ） 13.蛋白质分子中的亚基是指参与构成蛋白质四级结构的具有独立三级结构的多 肽链。（）
14．属于酸性氨基酸的是Glu和Asp。（ ）
15．竞争性可逆抑制剂一定与酶的底物结合在酶的同一部位。（ ） 16．脯氨酸多的肽链中，蛋白质的α-螺旋结构较难形成。（ ） 17．蛋白质的二级结构就是α-螺旋结构。（ ） 18．酶的Km愈大表明酶对底物的亲和性愈大。（ ）
19．维系酶活性中心结构的力主要是氨基酸侧链之间的氢键。（ ）
20．酶的最适温度与酶的作用时间有关,作用时间长,则最适温度高,作用时间短,则最适温度低 。（ ）
二、选择题（每小题2分，共40分）（在备选答案中有一个是正确的） 1.如下排列顺序的化合物：苯丙-赖-色-苯丙-亮-赖，可以认为 A.是一具有6个肽键的分子 B.是一碱性多肽 C.是一酸性多肽 D.是一中性多肽
E.以上均不是
2.下列氨基酸中哪一种不具备旋光性 A.亮氨酸 B.丙氨酸 C.甘氨酸 D.丝氨酸 E.缬氨酸
3.下列哪组氨基酸属于酸性氨基酸 A.赖氨酸和精氨酸
B.半胱氨酸和甲硫氨酸 C.谷氨酰胺和天冬酰胺 D.酪氨酸和色氨酸 E.谷氨酸和天冬氨酸
4.具有紫外吸收的氨基酸是 A.苏氨酸 B.谷氨酸 C.亮氨酸 D.酪氨酸
5.能用于测定蛋白质分子量的技术方法是 A.聚丙烯酰胺凝胶电泳 B.分子筛层析 C.超速离心 D.硫酸铵沉淀
6. 有一混合蛋白质溶液，各种蛋白质的pI为4.6；5.0；5.3；6.7；7.3。电泳时欲使其中4种泳向正极，缓冲液的pH应该是
A．5．0 B．4．0 C．6．0 D．7．0 E．8．0 7.关于酶的活性中心，下列哪些是正确的 A.必需基团一定在酶的活性中心上 B.与底物结合时，其构象发生改变 C.含催化基团和结合基团
D.具有结合底物并使之转变成产物的能力 8．关于竞争性抑制的叙述，不正确的是 A.如果[I]恒定，增大[S]，抑制作用减弱 B.如果[S]恒定，增大[I]，抑制作用增强 C.[S]远大于[I]，抑制作用近于消失
D.竞争性抑制剂与底物结合在酶的相同部位上
E.竞争性抑制作用的动力学特征是Km值减小，Vmax不变 9．关于酶反应的初速度的叙述，下列哪项是正确的 A.是ν-[S]曲线上任何一点的速度
B.是产物生成量与时间呈线性关系时的速度 C.是产物对酶活性产生负反馈抑制时的速度
D.是反应速度对酶浓度呈矩形双曲线变化时的速度
E.是反应速度与底物浓度呈正比时的反应速度 10．蛋白质分子中-S-S-断裂的方法是（ ）
A、加尿素 B、透析法 C、加过甲酸 D、加重金属盐
11. 下列哪种方法可得到蛋白质的\指纹\图谱?
A.酸水解,然后凝胶过滤
B.彻底碱水解并用离子交换层析测定氨基酸的组成 C.用氨肽酶降解并测定被释放的氨基酸的组成 D.用胰蛋白酶降解,然后进行纸层析和纸电泳 E.用2,4-二硝基氟苯处理蛋白质
12. 有一多肽经酸水解后产生等摩尔的Lys，Gly和A1a.如用胰蛋白酶水解该肽，仅发现有游离的Gly和一种二肽。下列多肽的一级结构中，哪一个符合该肽的结构?
A. Gly-Lys-Ala-Lys-Gly-Ala B. Ala-Lys-Gly C. Lys-Gly-Ala D. Gly-Lys-Ala E. Ala-Gly-Lys
13. 必需氨基酸是对（ ）而言的。
A、植物 B、动物 C、动物和植物 D、人和动物 14. 在下列所有氨基酸溶液中，不引起偏振光旋转的氨基酸是（ ）
A、丙氨酸 B、亮氨酸 C、甘氨酸 D、丝氨酸
+
15. 谷氨酸的pK’1(-COOH)为2.19，pK’2(-NH3)为9.67，pK’3r(-COOH)为4.25，其pI是（ ）
A、4.25 B、3.22 C、6.96 D、5.93 16.重金属Hg、Ag是一类( )
A、竞争性抑制剂 B、不可逆抑制剂 C、非竞争性抑制剂 D、反竞争性抑制剂
17. 某酶今有4种底物(S)，其Km值如下，该酶的最适底物为（ ） A、S1：Km＝5×10-5M B、S2：Km＝1×10-5M
C、S3：Km＝10×10-5M D、S4：Km＝0.1×10-5M 18.酶的非竞争性抑制剂对酶促反应的影响是：（ ）
A、Vmax不变，Km增大 B、Vmax不变，Km减小 C、Vmax增大，Km不变 D、Vmax减小，Km不变 19.酶原是酶的 前体（ ）
A、有活性 B、无活性 C、提高活性 D、降低活性 20. 天然蛋白质中不存在的氨基酸是（ ）
A、半胱氨酸 B、瓜氨酸 C、丝氨酸 D、蛋氨酸
三、填空题（每空1分，共15分）
蛋白质序列测定步骤是1 __多肽链的拆分;___________2____测定蛋白质分子中的1．
多肽链数目_____________3 _________二硫键的断裂；______4_________测定每条多肽链的氨基酸组成，并计算出氨基酸成分的分子比；_____5_________分析多肽链的N-未端和C-末端；_____6_______多肽链断裂成多个肽段__7________测定每个肽段的氨基酸顺序____8________确定多肽链片段的顺序_____ 9_确定原多肽链中的二硫键__ 。
2．通常将酶分为_______氧化还原酶___、___转移酶____、__水解酶_____、________裂合酶_______、_异构酶___和__合成酶___等六大类。
四、问答题（25分）
1.有一个基因工程产物蛋白质：MW 5.4 KD，PI6.3，请你写出分离该蛋白质的方案。（10分）
首先要粗提取，把所有蛋白质提取出来，然后再根据分子量，采用超滤的方法分离目的蛋白以外的杂蛋白；然后采用分子筛层析，离子交换层析，等电点聚焦层析或亲和层析分离蛋白。其中非常重要一点是是否写出在整个分离过程中要选择一个跟踪鉴定的方法。
粗提: 1．先把所有蛋白质提取出来,即用NaCl、丙酮、乙醇将蛋白质在低温（0-4C)沉淀出来。
2.用中空纤维，截流值6KD的中空纤维，将6万分子量的蛋白质去除； 再 用截流值为4.5KD的中空纤维，将4万分子量的杂蛋白去除。 精提：1.离子交换 2.分子筛 3．亲和层析 4．等电点沉淀
跟踪测定： 分子量大小（SDS-PAGE）；PI测
2．一个抗菌素多肽经酸完全水解后得知含有亮氨酸，苯丙氨酸，脯氨酸，缬氨酸和赖氨酸，并以等分子存在。分子量测得约1170KD，C-未端分析结果证明是阴性，用胰蛋白酶水解后的产物经电泳和纸层析分离得到一个点子,用DNFB处理后
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