RNA提取注意事项-总结

一、研钵的处理

一般用三蒸水洗净后,放干后用锡箔纸包好后置高温160-250度烘烤4小时左右,可以灭活所有的酶并杀灭细菌和真菌孢子,冷却后即可使用

那如果我有几十个标本的话,我每提一个就要消毒一次研钵?

是啊。你可以一次准备好几个研钵,一次做几个样。完了再用锡箔纸包上,高温消毒 老师您好,研钵最好在150摄氏度的烘箱中烘烤5-7小时,如您不急,可烘烤过夜,

我们实验室的做法是:锡箔纸包好,直接180℃烘烤4个小时左右,之后再放入-20℃冰箱中预冷备用。

研钵最好用锡箔纸包好,放在180度烘箱中处理6个小时以上。

二、器械的处理

提取rna的所有器械均应经depc处理吗?

总之,1).提取rna的所有器械最好先用DEPC处理,然后再高温灭菌; 2).RNA提取尽量在低温条件下操作,同时整个过程尽量要迅速;

3)RNA提取出来以后立即-70度保存,如果暂时不用,可以保存在75%的酒精溶液中。

就个人经历浅谈一下

1)如果枪头和EP管是刚拆包的,就无需DEPC处理,处理后反而会破坏?硅化涂层?导致取液不准和挂液;镊子、装EP管的饭盒等要先用DEPC处理,然后再高温灭菌;

2)戴橡胶手套,常用95%的酒精擦手、离心机、实验时用到的EP管架和实验操作区域。不要对着实验区域说话;离心时不能完全按说明书上写的时间,如果离心完管里还有液体就再离心一会。

我觉得提取RNA的器械不必都用DEPC处理。我通常是这样做的: 1.枪头是DEPC处理,然后高压消毒。 2.EP管高压消毒即可。

3.包装样品用的锡箔纸和装试剂的瓶子高温(200度以上)烘烤4小时。 4.镊子、手术剪等器械用75%酒精消毒即可。 5.取材的时候要尽可能快,并迅速放进液氮。

6.保存RNA我通常用DEPC水,—70度保存。我提的RNA快一年了,依然很好。要说一句的是:我的低温冰箱曾经停电3、4天,竟然RNA没有怎么降解,呵呵!

我的经验是枪头不用DEPC水处理,但是要用新的;

EP管直接高压消毒,固体物质如瓶子、量筒先用DEPC水浸泡,然后高温干烤; 取材时不要说话。 三、

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